ELISA,即酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(Enzyme - Linked Immunosorbent Assay),其試劑盒基于抗原 - 抗體特異性結(jié)合的原理。在試劑盒中,首先將已知的抗原或抗體固定在微孔板的表面。如果檢測(cè)樣本中含有相應(yīng)的抗體或抗原,就會(huì)與之特異性結(jié)合。然后加入酶標(biāo)記的二抗或抗原,這種酶標(biāo)記物能夠與之前結(jié)合的物質(zhì)再次特異性結(jié)合。加入底物,在酶的催化作用下,底物發(fā)生顏色反應(yīng)或化學(xué)發(fā)光反應(yīng)等可檢測(cè)的信號(hào)變化。通過(guò)檢測(cè)信號(hào)的強(qiáng)度,可以定量或定性地分析樣本中的目標(biāo)物質(zhì)。例如在檢測(cè)某種疾病相關(guān)蛋白時(shí),樣本中的蛋白與微孔板上固定的抗體結(jié)合,后續(xù)的反應(yīng)步驟逐步放大信號(hào),從而實(shí)現(xiàn)對(duì)低濃度蛋白的精確檢測(cè)。避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。認(rèn)可ELISA試劑盒信息推薦
ELISA試劑盒的線性范圍是指在檢測(cè)過(guò)程中,目標(biāo)物質(zhì)濃度與檢測(cè)信號(hào)之間呈線性關(guān)系的范圍。這個(gè)范圍對(duì)于準(zhǔn)確測(cè)量目標(biāo)物質(zhì)的濃度非常重要。不同的ELISA試劑盒針對(duì)不同的目標(biāo)物質(zhì)具有不同的線性范圍。例如,某一檢測(cè)特定蛋白質(zhì)的試劑盒,其線性范圍可能是10 - 1000 pg/mL。在這個(gè)范圍內(nèi),可以根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線準(zhǔn)確地計(jì)算出樣本中蛋白質(zhì)的濃度。如果樣本中的目標(biāo)物質(zhì)濃度超出線性范圍,就可能導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果不準(zhǔn)確。因此,在使用試劑盒之前,需要了解其線性范圍,并根據(jù)樣本的預(yù)期濃度選擇合適的試劑盒或者對(duì)樣本進(jìn)行適當(dāng)?shù)南♂尰驖饪s處理。河南認(rèn)可ELISA試劑盒歡迎選購(gòu)進(jìn)口ELISA試劑盒,上海伊麗薩生物科技代理品牌產(chǎn)品的性價(jià)比超高,一握伊麗薩的手。
ELISA試劑盒是一種用于檢測(cè)特定蛋白質(zhì)、抗體或其他分子的試劑盒。ELISA是一種酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),利用特異性抗體與抗原或特定分子結(jié)合,然后使用酶標(biāo)記的二抗或底物來(lái)檢測(cè)結(jié)合事件。ELISA試劑盒通常包括抗體、底物、緩沖液、酶標(biāo)記物等試劑,可用于醫(yī)學(xué)、生物學(xué)、生物技術(shù)等領(lǐng)域的研究和診斷。ELISA試劑盒在國(guó)內(nèi)有許多種叫法,例如:ELISA檢測(cè)試劑盒、ELISA Kit、酶聯(lián)免疫試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等,比較常見(jiàn)的叫法是ELISA檢測(cè)試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒等。
操作方法:雙抗體夾心法1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃ 過(guò)夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡(jiǎn)稱洗滌,下同)。2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育1小時(shí)。然后洗滌。(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔)。3. 加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小時(shí),洗滌。4. 加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。5. 終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。6. 結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽(yáng)性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽(yáng)性。上海伊麗薩生物科技,進(jìn)口ELISA試劑盒代理領(lǐng)域的佼佼者。
ELISA試劑盒也可用于食品安全檢測(cè)中的農(nóng)藥殘留檢測(cè)。在農(nóng)作物種植過(guò)程中,農(nóng)藥的使用不可避免,但過(guò)量的農(nóng)藥殘留會(huì)影響消費(fèi)者的健康。ELISA試劑盒能夠檢測(cè)多種農(nóng)藥殘留,如有機(jī)磷農(nóng)藥、擬除蟲(chóng)菊酯類農(nóng)藥等。例如,檢測(cè)蔬菜中的有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的ELISA試劑盒,通過(guò)特異性的抗原 - 抗體反應(yīng),可以快速檢測(cè)出蔬菜中是否存在有機(jī)磷農(nóng)藥殘留。這種檢測(cè)方式具有成本低、速度快的優(yōu)點(diǎn),能夠?qū)Υ罅康霓r(nóng)產(chǎn)品進(jìn)行初步篩查,對(duì)于保障食品安全具有重要意義。杭州Novateinbio ELISA試劑盒特惠活動(dòng)。安徽專注ELISA試劑盒廠家價(jià)格
使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。認(rèn)可ELISA試劑盒信息推薦
ELISA試劑盒的靈敏度是其重要特性之一。高靈敏度意味著它能夠檢測(cè)到極低濃度的目標(biāo)物質(zhì)。這得益于ELISA反應(yīng)中抗原 - 抗體特異性結(jié)合的高度親和性以及酶放大信號(hào)的作用。在一些疾病的早期診斷中,例如標(biāo)志物的檢測(cè),靈敏度高的ELISA試劑盒可以在發(fā)生早期,體內(nèi)標(biāo)志物含量極低時(shí)就檢測(cè)到其存在。例如前列腺特異抗原(PSA)的檢測(cè),靈敏的ELISA試劑盒能夠檢測(cè)到納克級(jí)甚至更低濃度的PSA,有助于前列腺的早期篩查。此外,對(duì)于一些微量的細(xì)胞因子檢測(cè),高靈敏度的ELISA試劑盒也能準(zhǔn)確捕捉到其濃度變化,為免疫相關(guān)疾病的研究和診斷提供可靠數(shù)據(jù)。認(rèn)可ELISA試劑盒信息推薦