高阻密封技術(shù)還***降低了電流記錄的背景噪聲，從而大幅提高了時(shí)間、空間和電流分辨率，如10μs的時(shí)間分辨率、1平方微米的空間分辨率和10-12年的電流分辨率。影響電流記錄分辨率的背景噪聲不僅來(lái)自膜片鉗放大器本身，還來(lái)自信號(hào)源的熱噪聲。信號(hào)源就像一個(gè)簡(jiǎn)單的電阻，其熱噪聲為σn=4Kt△f/R其中σn為電流均方差的平方根，k為玻爾茲曼常數(shù)，t為溫度，△f為測(cè)量帶寬，R為電阻值?？梢钥闯?，為了獲得低噪聲電流記錄，信號(hào)源的內(nèi)阻必須非常高。如果在1kHz帶寬、10%精度的條件下記錄1pA的電流，信號(hào)源的內(nèi)阻應(yīng)該大于2gω。電壓鉗技術(shù)只能測(cè)量?jī)?nèi)阻為100kω~50mω的大電池的電流，常規(guī)技術(shù)和制備無(wú)法達(dá)到所需的分辨率。電壓鉗技術(shù)的主要在于將膜電位固定在指令電壓的水平，這樣才能研究在給定膜電位下膜電流隨時(shí)間的變化關(guān)系。日本全自動(dòng)膜片鉗實(shí)驗(yàn)操作

膜片鉗技術(shù)是一種用于研究生物細(xì)胞膜離子通道的實(shí)驗(yàn)方法。它通過(guò)在細(xì)胞膜上形成小孔，從而對(duì)細(xì)胞膜的離子通道進(jìn)行精確的電生理記錄和描述。在膜片鉗實(shí)驗(yàn)中，研究人員通常會(huì)先將細(xì)胞膜上的脂質(zhì)雙層通過(guò)特殊設(shè)備進(jìn)行穿刺，形成一個(gè)小孔。然后，他們將一個(gè)玻璃微電極插入這個(gè)小孔中，以接觸并測(cè)量細(xì)胞膜內(nèi)部的電位變化。這個(gè)玻璃微電極的端非常細(xì)，不會(huì)對(duì)細(xì)胞膜產(chǎn)生太大的干擾。通過(guò)膜片鉗技術(shù)，科學(xué)家可以精確地測(cè)量離子通道的活動(dòng)，從而了解離子通道在細(xì)胞生理學(xué)中的作用。例如，他們可以測(cè)量離子通道在不同刺激下如何開啟或關(guān)閉，以及這些變化如何影響細(xì)胞的電活動(dòng)和化學(xué)信號(hào)傳遞。此外，膜片鉗技術(shù)還可以用于研究和鑒定新的藥物靶點(diǎn)。通過(guò)觀察藥物對(duì)離子通道活動(dòng)的影響，科學(xué)家可以評(píng)估新藥對(duì)特定疾病的zhi療潛力?？偟膩?lái)說(shuō)，膜片鉗技術(shù)是一種非常有用的實(shí)驗(yàn)方法，它為我們提供了深入研究細(xì)胞膜離子通道以及藥物作用機(jī)制的工具。日本全自動(dòng)膜片鉗細(xì)胞功能特性封接（seal）是膜片鉗記錄的關(guān)鍵步驟之一。

膜片鉗技術(shù)與其他技術(shù)的結(jié)合Neher等**將膜片鉗技術(shù)與Fura2熒光鈣測(cè)量技術(shù)相結(jié)合，同時(shí)進(jìn)行細(xì)胞內(nèi)熒光強(qiáng)度、細(xì)胞膜離子通道電流、細(xì)胞膜電容等多項(xiàng)指標(biāo)變化的快速交替測(cè)量，從而獲得同一事件過(guò)程中各因素的各自變化，進(jìn)而分析這些變化之間的關(guān)系。Neher將能夠光解鈣離子的鈣螯合物引入膜片鉗技術(shù)，進(jìn)而可以定量研究鈣離子濃度與分泌速率的關(guān)系以及相對(duì)較大的分泌速率。他還發(fā)明了膜片鉗的膜電容檢測(cè)與碳纖維電極的電化學(xué)檢測(cè)相結(jié)合的技術(shù)。然后***將光電聯(lián)合檢測(cè)技術(shù)和碳纖維電極電化學(xué)檢測(cè)技術(shù)相結(jié)合。這種結(jié)合既能研究分泌機(jī)制，又能鑒定分泌物質(zhì)，彌補(bǔ)了各單一方法的不足。Eberwine于1991年***將膜片鉗技術(shù)與RT-PCR技術(shù)相結(jié)合，可以在分子水平上解釋形態(tài)相似但電活動(dòng)不同的結(jié)果，隨后開始了膜片鉗與分子生物學(xué)技術(shù)相結(jié)合的時(shí)代:基因重組技術(shù)和膜通道蛋白重建技術(shù)。

膜片鉗技術(shù)是當(dāng)前研究細(xì)胞膜電流及離子通道的蕞重要的技術(shù)。從技術(shù)層面來(lái)解釋的話，膜片鉗技術(shù)(patchclamp)是指利用鉗制電壓或者電流的方法(通常為鉗制電壓)來(lái)記錄細(xì)胞膜離子通道電活動(dòng)的微電極技術(shù)。膜片鉗技術(shù)的原理為：使用一個(gè)一頭尖一頭粗的錐狀玻璃管，管中設(shè)有微電極，管的前列直徑約1.5~3.0μm，通過(guò)負(fù)壓吸引使前列口與細(xì)胞膜形成千兆歐姆級(jí)的阻抗封接，前列口內(nèi)的細(xì)胞膜區(qū)域與周圍其他區(qū)域形成了電學(xué)分隔，然后人工鉗制此片區(qū)域細(xì)胞膜的電位，即可達(dá)到對(duì)膜片上離子通道電流的監(jiān)測(cè)與記錄。維持細(xì)胞正常形態(tài)和功能完整性。

實(shí)驗(yàn)溶液浸溶細(xì)胞溶液和微電極玻璃管內(nèi)的填充液成分對(duì)全細(xì)胞膜片鉗記錄也是很重要的內(nèi)容，這關(guān)系到封接的容易程度、細(xì)胞存活狀態(tài)及膜電位的狀態(tài)等。在實(shí)驗(yàn)記錄過(guò)程中，尤其是神經(jīng)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)，需要迅速更換細(xì)胞浸溶液濃度以免受體敏感性降低（desensitization）或需要模擬快速突觸反應(yīng)的壽命。原則上細(xì)胞的浸溶液成分或玻璃管內(nèi)填充液成分應(yīng)該與細(xì)胞外或細(xì)胞內(nèi)間質(zhì)的成分相似，實(shí)際研究中，為了探討某些通道或電位特性，對(duì)這些實(shí)驗(yàn)溶液的成分或濃度會(huì)作必要調(diào)整，沒(méi)有哪種溶液是理想的。膜片鉗通常由兩個(gè)平行的、彎曲的鉗臂組成，鉗臂的末端有一對(duì)夾持墊，可以?shī)A住薄片材料。進(jìn)口細(xì)胞膜片鉗電生理工具

膜電位Vm由高輸入阻抗的電壓跟隨器所測(cè)量。日本全自動(dòng)膜片鉗實(shí)驗(yàn)操作

電壓鉗的缺點(diǎn)∶電壓鉗技術(shù)目前主要用于巨火細(xì)胞的全細(xì)胞電流研究，特別在分子克隆的卵母細(xì)胞表達(dá)電流的鑒定中發(fā)揮其它技術(shù)不能替代的作用。但也有其致命的弱點(diǎn)1、微電極需刺破細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞，以致造成細(xì)胞漿流失，破壞了細(xì)胞生理功能的完整性;2、不能測(cè)定單一通道電流。因?yàn)殡妷恒Q制的膜面積很大，包含著大量隨機(jī)開放和關(guān)閉著的通道，而且背景噪音大，往往掩蓋了單一通道的電流。3、對(duì)體積小的細(xì)胞（如哺乳類***元，直徑在10-30μm之間）進(jìn)行電壓鉗實(shí)驗(yàn)，技術(shù)上有更大的困難。由于電極需插入細(xì)胞，不得不將微電極的前列做得很細(xì)，如此細(xì)的前列致使電極阻抗很大，常常是60～-8OMΩ或120～150MΩ（取決于不同的充灌液）。這樣大的電極阻抗不利于作細(xì)胞內(nèi)電流鉗或電壓鉗記錄時(shí)在短時(shí)間（μs）內(nèi)向細(xì)胞內(nèi)注入電流，達(dá)到鉗制膜電壓或膜電流之目的。再者，在小細(xì)胞上插入的兩根電極可產(chǎn)生電容而降低測(cè)量電壓電極的反應(yīng)能力。日本全自動(dòng)膜片鉗實(shí)驗(yàn)操作