在現(xiàn)代分子生物學(xué)研究中,實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qPCR)已成為基因表達(dá)分析、病毒檢測(cè)和基因定量的重要工具。其中,One Step RT-qPCR SYBR Green Kit憑借其獨(dú)特的優(yōu)勢(shì),成為眾多科研工作者的優(yōu)先試劑盒。簡(jiǎn)化操作流程,降低污染風(fēng)險(xiǎn)One Step RT-qPCR SYBR Green Kit采用一步法反應(yīng)體系,將逆轉(zhuǎn)錄(RT)和qPCR反應(yīng)集成在同一反應(yīng)管中完成。這種設(shè)計(jì)不僅簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作步驟,減少了人為誤差,還有效降低了因反復(fù)開蓋導(dǎo)致的樣品污染風(fēng)險(xiǎn)。例如,傳統(tǒng)的兩步法需要分別進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄和qPCR反應(yīng),操作復(fù)雜且污染風(fēng)險(xiǎn)較高,而一步法試劑盒則避免了這些問題。高靈敏度與高特異性該試劑盒使用高效的逆轉(zhuǎn)錄酶和熱啟動(dòng)Taq DNA聚合酶,結(jié)合優(yōu)化的反應(yīng)緩沖體系,能夠顯著提高反應(yīng)的靈敏度和特異性。其檢測(cè)靈敏度可達(dá)極低濃度的RNA樣本,例如在某些實(shí)驗(yàn)中,即使RNA濃度低至0.1 pg,也能實(shí)現(xiàn)精細(xì)檢測(cè)。此外,試劑盒中添加了抑制非特異性擴(kuò)增的組分,確保熔解曲線呈現(xiàn)單峰,進(jìn)一步提高了檢測(cè)的準(zhǔn)確性。Hifair? Ⅱ 1st Strand cDNA Synthesis Kit :適用于從總RNA或mRNA模板合成鏈cDNA,具有高熱穩(wěn)定性。NY-BR-1 p904 (A2)
在分子生物學(xué)研究中,PCR技術(shù)是基因擴(kuò)增的重要工具,而Pfu Master Mix (2×) (Without Dye) 則是實(shí)現(xiàn)高保真擴(kuò)增的理想選擇。這種預(yù)混液結(jié)合了Pfu DNA聚合酶的高保真特性和優(yōu)化的反應(yīng)體系,為科研人員提供了一個(gè)效率、便捷且可靠的實(shí)驗(yàn)平臺(tái)。Pfu Master Mix (2×) (Without Dye) 是一種即用型的2倍濃度預(yù)混液,含有Pfu DNA聚合酶、dNTPs、優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液以及必要的輔助成分。Pfu DNA聚合酶以其保真性而聞名,其3'-5'外切酶活性能夠在DNA合成過程中糾正錯(cuò)誤摻入的堿基,從而提高擴(kuò)增產(chǎn)物的準(zhǔn)確性。與Taq DNA聚合酶相比,Pfu酶的錯(cuò)誤率更低,使其成為需要精確擴(kuò)增的實(shí)驗(yàn)(如基因克隆、突變分析和測(cè)序準(zhǔn)備)的優(yōu)先工具。此外,Pfu Master Mix (2×) (Without Dye) 的無(wú)染料配方為實(shí)驗(yàn)提供了更大的靈活性。實(shí)驗(yàn)人員可以根據(jù)具體需求選擇后續(xù)的檢測(cè)方法,例如凝膠電泳分析、平末端克隆或測(cè)序,而無(wú)需擔(dān)心染料對(duì)結(jié)果的干擾。這種無(wú)染料設(shè)計(jì)特別適合需要進(jìn)一步處理的PCR產(chǎn)物,例如用于構(gòu)建重組質(zhì)粒或進(jìn)行下游功能分析。Pfu Master Mix (2×) (Without Dye) 的2倍濃度設(shè)計(jì)進(jìn)一步簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作。實(shí)驗(yàn)人員只需加入模板DNA和引物,即可直接進(jìn)行反應(yīng),減少了手動(dòng)配制反應(yīng)體系的步驟和可能出現(xiàn)的誤差。大腸桿菌DNA連接酶Recombinant Biotinylated Human MAGE-A3 (HLA-A*24:02) Protein, His-Avi Tag 是一種通過重組DNA技術(shù)。
AdvanceFast PCR Master Mix (2×) (With Dye) 是一種即用型2×預(yù)混液,專為快速、有效的PCR擴(kuò)增設(shè)計(jì)。該預(yù)混液包含Hieff Canace® AdvanceFast High-Fidelity DNA Polymerase、dNTPs、優(yōu)化的緩沖體系以及電泳指示染料,能夠明顯提高PCR反應(yīng)的速度和特異性。產(chǎn)品特點(diǎn)該預(yù)混液的重要優(yōu)勢(shì)在于其快速擴(kuò)增能力,擴(kuò)增速度可達(dá)15秒/kb,甚至在1 kb以內(nèi)的片段中,極限速度可達(dá)5秒/kb。此外,預(yù)混液中的高保真DNA聚合酶具有3'-5'外切酶活性,能夠有效降低錯(cuò)誤率,提高擴(kuò)增產(chǎn)物的準(zhǔn)確性。其優(yōu)化的緩沖體系和延伸因子使其能夠擴(kuò)增長(zhǎng)達(dá)13 kb的片段,適用于復(fù)雜模板的擴(kuò)增。預(yù)混液中還添加了電泳指示染料,PCR產(chǎn)物可直接進(jìn)行電泳,無(wú)需額外添加上樣緩沖液。此外,該產(chǎn)品含有特異保護(hù)劑,即使經(jīng)過反復(fù)凍融,仍能保持穩(wěn)定的活性。應(yīng)用場(chǎng)景AdvanceFast PCR Master Mix (2×) (With Dye) 廣應(yīng)用于常規(guī)PCR、基因克隆、復(fù)雜模板擴(kuò)增以及高通量建庫(kù)等場(chǎng)景。其快速擴(kuò)增能力和高特異性使其特別適合大規(guī)模基因檢測(cè)、菌落PCR以及微量DNA的檢測(cè)??傊?,AdvanceFast PCR Master Mix (2×) (With Dye) 憑借其快速擴(kuò)增、高特異性和便捷性,為分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)提供了高效的解決方案,尤其適合需要快速結(jié)果和高通量操作的場(chǎng)景。
高靈敏度與特異性該試劑采用熱啟動(dòng)Taq DNA聚合酶,結(jié)合抗體封閉技術(shù),有效避免了低溫條件下的非特異性擴(kuò)增,提高了反應(yīng)的特異性和靈敏度。探針法qPCR通過熒光探針與目標(biāo)基因的特異性結(jié)合,避免了非特異性產(chǎn)物的干擾,檢測(cè)靈敏度和特異性高于傳統(tǒng)的SYBR Green方法。低濃度ROX校正染料試劑中含有低濃度ROX作為被動(dòng)參考染料,能夠有效校正孔間熒光信號(hào)的差異,減少因移液誤差或樣品蒸發(fā)等因素引起的熒光波動(dòng),確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性和重復(fù)性。UDG防污染系統(tǒng)內(nèi)置UDG(Uracil-DNA Glycosylase)防污染系統(tǒng),通過降解含有尿嘧啶的PCR產(chǎn)物,有效防止了實(shí)驗(yàn)室中殘留的PCR產(chǎn)物對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的干擾,避免假陽(yáng)性結(jié)果的出現(xiàn)??焖贁U(kuò)增與多重檢測(cè)優(yōu)化的反應(yīng)體系支持快速擴(kuò)增程序,可在短時(shí)間內(nèi)完成高靈敏度檢測(cè),同時(shí)適用于多重PCR檢測(cè),可在單個(gè)反應(yīng)孔中同時(shí)檢測(cè)多個(gè)基因。適用性該試劑適用于多種樣本類型,包括cDNA、基因組DNA等,尤其適合低豐度基因的定量檢測(cè),如低表達(dá)的mRNA、lncRNA、小RNA等。Pfu酶的熱穩(wěn)定性優(yōu)于Taq酶,即使在98℃的高溫下也能保持活性,特別適合高GC含量模板的擴(kuò)增。
dNTP/dUTPMixture(2.5mMeach/5mM):助力分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的高效防污染解決方案在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,PCR技術(shù)是基因擴(kuò)增和檢測(cè)的工具之一。然而,PCR產(chǎn)物的殘留污染可能導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果,嚴(yán)重影響實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和可靠性。dNTP/dUTPMixture(2.5mMeach/5mM)作為一種高效的防污染試劑,通過與尿嘧啶DNA糖苷酶(UDG)聯(lián)合使用,能夠有效解決這一問題。產(chǎn)品特點(diǎn)高純度與穩(wěn)定性dNTP/dUTPMixture(2.5mMeach/5mM)采用高純度的dATP、dCTP、dGTP和dUTP,純度≥99%,確保實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。該產(chǎn)品在-20℃下可穩(wěn)定保存24個(gè)月,使用時(shí)需避免反復(fù)凍融。防污染機(jī)制該產(chǎn)品通過在PCR反應(yīng)中用dUTP替代dTTP,使擴(kuò)增產(chǎn)物中摻入dU堿基。隨后,UDG酶能夠特異性地降解含有dU的DNA產(chǎn)物,從而有效去除殘留的PCR產(chǎn)物污染。這種防污染系統(tǒng)特別適用于高通量PCR實(shí)驗(yàn)和需要嚴(yán)格控制假陽(yáng)性的應(yīng)用場(chǎng)景。兼容性與適用性dNTP/dUTPMixture適用于多種DNA聚合酶,如Taq酶和BstDNA聚合酶等,可用于PCR、real-timePCR、RT-PCR、引物延伸反應(yīng)以及cDNA合成等多種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。然而,需要注意的是,某些具有校正活性的酶可能不適用于該混合物,具體需參考酶的產(chǎn)品說(shuō)明書。Phusion DNA Polymerase 的重要優(yōu)勢(shì)在其高保真性。其錯(cuò)誤率比Taq DNA聚合酶低50倍以上,比Pfu DNA聚合酶低6倍。One Step RT-qPCR SYBR Green Kit (UDG Plus)
聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)技術(shù)已成為不可或缺的工具,廣泛應(yīng)用于基因擴(kuò)增突變檢測(cè)基因表達(dá)分析等多個(gè)領(lǐng)域。NY-BR-1 p904 (A2)
Uracil-DNAGlycosylase(E.coli)(5U/μl):高效除PCR污染的關(guān)鍵酶在分子生物學(xué)研究中,PCR技術(shù)的應(yīng)用極為廣,但PCR產(chǎn)物的交叉污染問題一直是影響實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確性和可靠性的關(guān)鍵因素之一。Uracil-DNAGlycosylase(E.coli)(UDG)作為一種高效的酶工具,憑借其獨(dú)特的性能和廣的應(yīng)用,已成為解決這一問題的理想選擇。一、產(chǎn)品特點(diǎn)高效水解尿嘧啶Uracil-DNAGlycosylase(UDG)能夠特異性地催化DNA中尿嘧啶(dU)堿基與脫氧核糖之間的N-糖苷鍵水解,釋放游離尿嘧啶。這種酶對(duì)單鏈和雙鏈DNA均有效,但對(duì)RNA或長(zhǎng)度不超過6個(gè)堿基的DNA寡核苷酸無(wú)活性。防止PCR產(chǎn)物污染UDG的主要應(yīng)用之一是防止PCR產(chǎn)物的交叉污染。通過在PCR反應(yīng)中使用dUTP替代dTTP,生成含有dU的PCR產(chǎn)物,UDG可以特異性地切割這些含有dU的DNA,從而防止其在后續(xù)反應(yīng)中作為模板被擴(kuò)增。反應(yīng)條件兼容性UDG在pH8.0左右表現(xiàn)出活性,且不需要二價(jià)陽(yáng)離子,可在較寬的pH范圍內(nèi)工作。它對(duì)高離子強(qiáng)度(>200mM)敏感,因此在使用時(shí)需注意反應(yīng)體系的離子濃度。NY-BR-1 p904 (A2)