microRNA脂質(zhì)體

microRNA是真核細胞中發(fā)現(xiàn)的短(約22mer)非編碼RNA，通過結(jié)合互補的mRNA序列發(fā)揮生物調(diào)節(jié)劑的作用。miRNA以初級miRNA的形式從其編碼的核基因轉(zhuǎn)錄，其長度為數(shù)百個核苷酸。RNaseIII酶，Drosha，將初級miRNA加工成pre-miRNA(長度為70個核苷酸)，攜帶一個特征的發(fā)夾環(huán)。然后pre-miRNA移動到細胞質(zhì)中，在那里RNaseIII酶Dicer產(chǎn)生成熟的miRNA和乘客鏈。***，成熟的miRNA被整合到RNAi誘導的沉默復合體中，以降解它們的靶mRNA。由DOTMA、膽固醇和vitaminETPGS1k琥珀酸鹽組成的陽離子脂質(zhì)體被證明可以有效遞送pre-miRNA-133b,導致A549非小肺*細胞中成熟miRNA-133b的表達比對照組細胞增加2.3倍，Mcl-1蛋白的表達減少1.8倍。經(jīng)尾靜脈注射含有pre-miRNA-133b的陽離子脂質(zhì)體(1.5mg/kg)的ICR小鼠肺組織中成熟miRNA-133b的表達比接受含有紊亂的pre-mirna的陽離子脂質(zhì)體的小鼠高52倍。 脂質(zhì)體由磷脂、脂肪酸酯和磷脂的脂肪醇醚組成，呈球形顆粒，包含一個親水核和一個兩親性的外層脂質(zhì)雙層。石家莊脂質(zhì)體載藥全氟丙烷

薄膜分散法原理：將磷脂和膽固醇等膜材溶解在有機溶劑中，在容器壁上形成均勻的薄膜，然后加入水相，通過攪拌或震蕩使膜材水化，自組裝形成脂質(zhì)體。示例：在“枸杞多糖脂質(zhì)體制備工藝”中，以大豆卵磷脂和膽固醇為膜材，采用薄膜分散水化法制備枸杞多糖脂質(zhì)體。通過單因素實驗得出藥脂比、膜材比、水化溫度均對包合率有影響。此方法操作相對簡單，適用于多種藥物的包封，但包封率可能受到多種因素影響1。二、反相蒸發(fā)法原理：將磷脂等膜材溶解在有機溶劑中，加入含有藥物的水相，進行超聲處理形成油包水型乳劑，然后減壓蒸發(fā)除去有機溶劑，使磷脂在水相中形成脂質(zhì)體。示例：“大豆卵磷脂脂質(zhì)體制備的研究”以大豆油腳為原料制備高純度大豆卵磷脂，用反相蒸發(fā)法制備果酸脂質(zhì)體。用透射電子顯微鏡表征了其形態(tài)結(jié)構(gòu)，證實其直徑在100～200nm之間。該方法適用于包封水溶性藥物，可制備較大粒徑的脂質(zhì)體3。三、注入法原理：將磷脂和膽固醇等膜材溶解在有機溶劑中，然后緩慢注入到水相中，在注入過程中，有機溶劑迅速擴散，磷脂等膜材在水相中自組裝形成脂質(zhì)體。舉例：該方法操作簡便，可用于實驗室規(guī)模的制備。但需要注意控制注入速度和攪拌條件，以確保脂質(zhì)體的均勻性和穩(wěn)定性。載藥脂質(zhì)體載藥熒光脂質(zhì)體載藥是一種具有廣泛應用前景的藥物傳遞系統(tǒng)。

脂質(zhì)體的緩釋作用***藥物可通過脂質(zhì)體的包封，以緩釋方式進入體循環(huán)。DepoCyt®由阿糖胞苷組成，是1999年進入市場的***個緩釋注射產(chǎn)品。DepoFoam?是SkyePharma在DepoCyt®that中應用的一種緩釋注射技術，用于***淋巴瘤，即淋巴瘤性腦膜炎。雖然阿糖胞苷可用于控制這類淋巴瘤，但由于其血漿半衰期短，約為20分鐘，因此需要頻繁地進行脊柱注射，這給患者帶來了不依從性、痛苦和高昂的***費用。相反，使用DepoCyt®可以將注射頻率降低到每2nd周一次，DepoCyt®是由包裹在球形顆粒的非同心內(nèi)部水腔內(nèi)的藥物組成的。分隔內(nèi)部腔室的雙層脂質(zhì)膜由天然存在的脂質(zhì)的合成類似物組成。與未包裹的阿糖胞苷相比，DepoCyt®通過鞘內(nèi)給藥比較大化了細胞周期s期特異性細胞毒***物的***潛力。此外，由于阿糖胞苷延長CSFt1/2時間，可減少給藥頻率。

脂質(zhì)體制備方法：破碎技術尺?和尺?分布是脂質(zhì)體性能和安全性的關鍵屬性。有?種?法可?于減少脂質(zhì)體的尺?，如(超)超聲(通過浴或探針)，擠壓，均質(zhì)，或組合?法，如凍融擠壓，凍融超聲和?壓均質(zhì)擠壓技術。在這些技術中，擠壓和?壓均質(zhì)(HPH)是在制藥制造中**常?的技術。?尺?的脂質(zhì)體通過聚碳酸酯膜(50nm～5μm)成為粒徑分布精細的較?的脂質(zhì)體。眾所周知，商業(yè)化的納?脂質(zhì)體產(chǎn)品，包括Onivyde、Vyxeos、Marqibo等，都是采?這種?法進??產(chǎn)的。該?法相對簡單，重現(xiàn)性好，只需要適中的條件。尺?減?的潛在機制是MLV在膜孔??處破裂，并在膜通過過程中重新排列。關鍵的?藝參數(shù)，如聚碳酸酯膜的孔徑、通過循環(huán)次數(shù)、壓?和流速等，都可以影響脂質(zhì)體的??和?層性。Ong等?發(fā)現(xiàn)，在?較其他不同的納?化技術(包括凍融超聲、超聲和均質(zhì)化)時，擠出是***的技術。然?，擠壓可能會降低脂質(zhì)體的包封性并改變不對稱脂質(zhì)體的結(jié)構(gòu)。HPH?于?產(chǎn)各種納?制劑，如脂質(zhì)體、納?晶體和納?乳液。它既適?于?體系，也適?于??體系，并提供不同的?產(chǎn)規(guī)模，從容量為10L/h的實驗室規(guī)模到容量為10萬L/h的?型?產(chǎn)規(guī)模。采用特定技術制備高負載脂質(zhì)體粉。

脂質(zhì)體的靶向釋放載藥脂質(zhì)體在體內(nèi)的行為主要受囊泡的吸收、分布和消除等各種藥動學參數(shù)的影響。肝臟、脾臟和骨髓中的固定組織巨噬細胞是脂質(zhì)體在靜脈給藥后可能進入的主要部位。大脂質(zhì)體(>0.5μm直徑)被固定組織巨噬細胞和血液單核細胞吞噬。對于小脂質(zhì)體(<0.1μm)，吞噬細胞的吞噬和肝實質(zhì)細胞的攝取途徑參與了這些脂質(zhì)體從血液中的消除。通過靜脈給藥進行的脂質(zhì)體藥代動力學研究顯示，它們主要通過肝臟和脾臟從血液中快速***。脂質(zhì)組成在組織/生物分布和血液***中也起作用。脂質(zhì)體的命運由表面電荷、表面特定配體的存在、蛋白質(zhì)的結(jié)合特性和脂質(zhì)體膜對被包裹標記物的通透性決定。中性帶電荷的脂質(zhì)體表面的蛋白質(zhì)調(diào)理作用**小，因為它們的膜包裹緊密且堅硬，有利于藥物的保留。脂質(zhì)體載藥實現(xiàn)靶向給藥面臨著穩(wěn)定性、靶向性和藥物釋放控制等關鍵技術難點。石家莊脂質(zhì)體載藥熒光

微流體法制備脂質(zhì)體的關鍵技術參數(shù)。石家莊脂質(zhì)體載藥全氟丙烷

CpGODNs是一種合成的單鏈DNA，已知可作為疫苗佐劑，也可以使用陽離子脂質(zhì)體遞送。Th1介導的免疫反應是由CpGODNs與toll樣受體9的相互作用促進的，據(jù)報道，CpGODNs具有抗**活性。陽離子脂質(zhì)體已被用于有效地遞送CpGODNs，以****反應或*****。CpGODNs與DOTAP或DOTAP和膽固醇組成的陽離子脂質(zhì)體絡合。研究發(fā)現(xiàn)，與裸CpGODNs相比，經(jīng)鼻給藥的陽離子脂質(zhì)體CpGODNs能更有效地預防肺轉(zhuǎn)移，抑制肺內(nèi)腫瘤細胞的增殖，延長小鼠的存活時間。此外，CpGODNs與DOTAP和膽固醇組成的陽離子脂質(zhì)體的復合體通過***自然殺傷細胞表現(xiàn)出抗**活性。由CpGODNs和陽離子脂質(zhì)組成的脂質(zhì)體已被測試具有預防類鼻疽的能力，類鼻疽是一種由假假伯克氏菌引起的傳染病。將CpGODNs與陽離子脂質(zhì)體絡合，每只小鼠給予100ug的劑量，30天后給小鼠注射假芽孢桿菌。結(jié)果表明，DOTAP脂質(zhì)體與CpGODNs復合物比DOPC脂質(zhì)體與CpGODNs復合物更有效地預防假芽孢桿菌***。石家莊脂質(zhì)體載藥全氟丙烷