影響成像的清晰度提高圖像對比度：穩(wěn)定的熒光染料可以在較長時(shí)間內(nèi)保持較高的熒光強(qiáng)度，使得目標(biāo)組織與周圍組織之間的對比度更高。例如，在ATP熒光納米探針基于ZIF-90和近紅外染料用于**小鼠成像的研究中，CP@ZIF-90納米探針具有***的光穩(wěn)定性和化學(xué)穩(wěn)定性，在檢測ATP時(shí)具有**長的發(fā)射波長（705nm）和比較大的熒光增強(qiáng)（32倍），能夠成功用于活細(xì)胞（293T和CT26細(xì)胞）中內(nèi)源性和外源性ATP水平的實(shí)時(shí)熒光成像2。相比之下，不穩(wěn)定的熒光染料可能會隨著時(shí)間的推移而減弱熒光強(qiáng)度，降低圖像的對比度，使得目標(biāo)組織難以清晰地顯示出來。增強(qiáng)圖像分辨率：穩(wěn)定的熒光染料有助于提高成像的分辨率，使圖像更加清晰地顯示動物體內(nèi)的細(xì)微結(jié)構(gòu)。例如，在多光譜光聲成像小動物中熒光染料的研究中，通過多光譜方法對目標(biāo)發(fā)色團(tuán)和熒光染料進(jìn)行靈敏區(qū)分，以25fmol的靈敏度和150μm的空間分辨率對小動物中熒光染料的深度分辨分布進(jìn)行成像5。如果熒光染料不穩(wěn)定，可能會導(dǎo)致成像分辨率下降，無法清晰地顯示動物體內(nèi)的細(xì)微結(jié)構(gòu)，影響對疾病的診斷和研究。熒光染料可以單獨(dú)使用，也可以組合成復(fù)合熒光染料使用。納米熒光染料脂溶

溫度高溫可能會導(dǎo)致熒光染料的穩(wěn)定性下降。例如，在55℃條件下放置5d后，分散熒光染料色漿的粒徑有所增加1。對于殼聚糖衍生物，雖然染料的取代對其熱穩(wěn)定性影響較小，但特征分解溫度仍會因染料的不同而有幾度的變化（小于10°C）2。光照紫外光對熒光染料的破壞較大。半花菁熒光染料反式-4-[對-(N,N-二乙醇胺)苯乙烯基]-N-乙基吡啶溴化鹽（DHEASPBr-C2）在紫外光下更容易受到破壞，兩種染料均不同程度地產(chǎn)生一些光降解產(chǎn)物35。量子點(diǎn)作為穩(wěn)定的熒光標(biāo)記，與其他有機(jī)染料（尼羅紅和DiI）相比，在連續(xù)激光照射下具有更高的穩(wěn)定性10。四、納米材料封裝納米材料封裝在熒光染料周圍可以提供保護(hù)層，從而提高熒光染料的穩(wěn)定性。例如，用二氧化硅納米粒子封裝1,1'-diOctadeCyl-3,3,3',3'-tetramethylindocarbocyanine（DIL）合成的納米顆粒（SIDIL），在200W的鹵素?zé)粝螺椛?0分鐘后，與裸稀染料相比，吸光度強(qiáng)度更穩(wěn)定，表明Si納米顆粒包封改善了光穩(wěn)定性性能7。顯微鏡熒光染料DIDDiD、DiR、DiO和DiI染料是最常見的細(xì)胞膜染料，它們是一族親脂性的熒光染料，用于細(xì)胞的形態(tài)學(xué)和結(jié)構(gòu)研究。

可視化經(jīng)絡(luò)：向人體穴位（PC5、PC6和PC7）和非穴位對照處注射兩種熒光染料（熒光素鈉和吲哚菁綠，以評估在人體中是否也能觀察到過去40年動物研究中示蹤染料在特定皮膚點(diǎn)注射后產(chǎn)生與針灸經(jīng)絡(luò)密切對齊的線性遷移現(xiàn)象。結(jié)果表明，在PC6注射的19次熒光素試驗(yàn)中，有15次（79%）染料沿與心包經(jīng)密切匹配的路徑向近端緩慢擴(kuò)散，并在穴位PC3處近端出現(xiàn)并合并。PC6對照處注射兩種染料均未產(chǎn)生任何***的線性通路跟蹤藥物生物分布：合成并制備各種染料納米顆粒，通過體內(nèi)熒光成像測定研究Bel-7402**瘤小鼠對熒光納米顆粒的生物分布，結(jié)果表明某些染料納米顆?？梢苑从匙仙即嫉慕M織分布，基于這些結(jié)果可以為藥物分布調(diào)查和疾病靶向***中選擇染料提供指導(dǎo)。用于量子點(diǎn)標(biāo)記**成像：量子點(diǎn)是一類新型的熒光標(biāo)記物，其獨(dú)特的光學(xué)性質(zhì)使其成為有吸引力的體內(nèi)標(biāo)記物，可用于深層組織成像。通過熒光擴(kuò)散斷層掃描（FDT）方法對CdTe/CdSe-核/殼熒光納米晶體進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，展示了將含有量子點(diǎn)的膠囊放入小動物食管中模擬標(biāo)記**的死后實(shí)驗(yàn)結(jié)果，并應(yīng)用基于計(jì)算比較大曲率零點(diǎn)的算法處理熒光圖像以檢測熒光包含物的邊界，證明了FDT方法在人類組織或人類**動物模型中對深層熒光**成像的潛在能力。

DiI染料標(biāo)記機(jī)制DiI（1,1'-dioctadecyl-3,3,3',3'-tetramethylindocarbocyanineperchlorate）是一種親脂性的熒光染料，常用于神經(jīng)元標(biāo)記。在大鼠中，通過結(jié)晶狀的熒光DiI可以對牙初級傳入神經(jīng)元（DPANs）進(jìn)行逆行熒光標(biāo)記。在小鼠中，雖然也可以使用DiI進(jìn)行標(biāo)記，但之前*能使用Fluoro-Gold這種具有神經(jīng)毒性的熒光染料，且其膜穿透特性優(yōu)于碳菁染料。后來研究人員對DiI在大鼠中的標(biāo)記技術(shù)進(jìn)行了重新評估，旨在將其應(yīng)用于小鼠。新型的DiI配方具有改進(jìn)的穿透性能和染色效率，可以評估軸突染料從應(yīng)用部位到三叉神經(jīng)節(jié)的運(yùn)輸速度、染色的DPANs數(shù)量以及熒光強(qiáng)度。其標(biāo)記機(jī)制主要是利用DiI的親脂性，能夠與神經(jīng)元細(xì)胞膜結(jié)合，隨著軸突的運(yùn)輸而擴(kuò)散到神經(jīng)元的各個(gè)部位，從而實(shí)現(xiàn)對神經(jīng)元的標(biāo)記。生物發(fā)光是利用熒光素酶報(bào)告基因在體內(nèi)表達(dá)產(chǎn)生的熒光蛋白與體外注射的熒光素底物發(fā)生化學(xué)反映產(chǎn)生熒光。

真核細(xì)胞：對于真核細(xì)胞，空間信息上的離子分布可以通過使用離子敏感熒光染料結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)電生理技術(shù)獲得。文獻(xiàn)0提到“Adyefluoresceswhenitisilluminatedwithlightwhichcanexcitethedyemoleculetoahigherenergystate.Thischapterdiscussescalciumsensitivefluorescentindicatorssincecalciumisthemostcommonlystudiedion,althoughdyesareavailableforavarietyofionsincludingNa+,K+,Cl-,andH+.Duringatypicalexperimentacell,inabrainsliceorprimaryculture,isinjectedwithanion-sensitivefluorescentdyeandvisualizedonahighpowermicroscope.”，即在腦切片或原代培養(yǎng)中，真核細(xì)胞可以注入離子敏感熒光染料，通過高倍顯微鏡觀察來測量離子濃度1。微生物：測量微生物中類似事件的方法被證明更具挑戰(zhàn)性。文獻(xiàn)11提到“雖然熒光和電生理方法（包括電極使用和膜片鉗）已被開發(fā)出來，用于測量真核細(xì)胞中的這些事件，但由于微生物的體積小且結(jié)合起來更復(fù)雜，因此測量微生物中類似事件的方法被證明更具挑戰(zhàn)性。羅丹明具有出色的光穩(wěn)定性以及許多光物理特性，使其非常適合用作激光染料、熒光探針和顏料。黑龍江熒光染料Fluor 750

染料DiI, DiO, DiD 和 DiR是一類親脂性熒光染料家族，用于標(biāo)記細(xì)胞膜和疏水性組織。納米熒光染料脂溶

結(jié)果表明，隨研磨時(shí)間延長，4種分散熒光染料色漿的粒徑和熒光強(qiáng)度均有所降低。其中，分散熒光桃紅BG色漿離心穩(wěn)定性較好，離心50分鐘后的比吸光度仍達(dá)到78.1%。在55℃條件下放置5天后，分散熒光桃紅BG染料色漿粒徑的增加率*為7.5%，熱穩(wěn)定性能較好；加熱處理過后分散熒光染料色漿的熒光強(qiáng)度有所降低。綜合比較，分散熒光桃紅BG染料色漿的穩(wěn)定性能良好1。綜上所述，不同化學(xué)結(jié)構(gòu)的熒光染料在光穩(wěn)定性、化學(xué)穩(wěn)定性以及在不同環(huán)境下的穩(wěn)定性等方面存在著明顯的差異。這些差異主要取決于熒光染料的分子結(jié)構(gòu)、共軛體系、取代基的性質(zhì)以及所處的環(huán)境等因素。了解這些差異對于選擇合適的熒光染料以及設(shè)計(jì)具有更高穩(wěn)定性的新型熒光染料具有重要的意義。納米熒光染料脂溶