在一個(gè)具體實(shí)施方式中,壓迫元件采用黃銅和鋅的混合物制備而成。具體地情況,混合物為h62黃銅,即含銅量為%~%,余量為鋅含量的黃銅。而銅、鋅皆屬于非鐵磁性物質(zhì)。在另一個(gè)具體實(shí)施方式中,壓迫元件采用聚乳酸(polylactic,pla)制備而成。pla是一種無(wú)毒無(wú)刺激的合成高分子材料,其原料是乳酸,不含任何金屬。h62黃銅棒或pla棒在體內(nèi),即不會(huì)受磁療、電療引起的磁場(chǎng)、電場(chǎng)干擾,也不會(huì)對(duì)磁療、電療儀器及磁共振儀器產(chǎn)生不良影響。驗(yàn)性動(dòng)物模型是指研究者通過使用物理的、化學(xué)的和生物的致病因素作用于動(dòng)物。徐匯區(qū)生殖疾病動(dòng)物模型建模
特發(fā)性肺纖維化模型小鼠(右)相對(duì)于對(duì)照組小鼠肺部組織MASSON染色對(duì)比(4周)5.急性肺損傷模型急性肺損傷(acutelunginjury,ALI)是各種直接和間接致傷因素導(dǎo)致的肺泡上皮細(xì)胞及內(nèi)皮細(xì)胞損傷,造成彌漫性肺間質(zhì)及肺泡水腫,導(dǎo)致的急性低氧性呼吸功能不全。以肺容積減少、肺順應(yīng)性降低、通氣/血流比例失調(diào)為病理生理特征,臨床上表現(xiàn)為進(jìn)行性低氧血癥和呼吸窘迫,肺部影像學(xué)上表現(xiàn)為非均一性的滲出變,其發(fā)展至嚴(yán)重階段(氧合指數(shù)<200)被稱為急性呼吸窘迫綜合征(acuterespiratorydistresssyndrome,ARDS)。5.1急性肺損傷大鼠模型建立口碑好的疾病動(dòng)物模型建模優(yōu)勢(shì)查閱已有的相關(guān)小鼠模型綜述文獻(xiàn)。
即為本發(fā)明構(gòu)建的一種pirb基因敲入的小鼠動(dòng)物模型。本發(fā)明所采用第二種技術(shù)方案的特點(diǎn)還在于,步驟1中得到grna1和grna2后分別與trancrrna在25℃孵育10min形成二級(jí)結(jié)構(gòu)。步驟3中g(shù)rna1、grna2的濃度均為2~10pmol/ul,cas9蛋白的注射濃度為30~100ng/μl。步驟4中southern雜交采用bamhi和avrii核酸內(nèi)切酶切割f1代雜合子小鼠的dna。本發(fā)明的有益效果是:本發(fā)明提供了pirb基因敲入的小鼠動(dòng)物模型及其構(gòu)建方法,本發(fā)明的小鼠動(dòng)物模型對(duì)于pirb基因功能的研究和在體驗(yàn)證提供了良好的基礎(chǔ)。分離自pirb基因敲入小鼠的細(xì)胞還可以用于研究pirb發(fā)揮調(diào)節(jié)作用的下游機(jī)制。通過pirb敲入動(dòng)物模型與不同類型cre小鼠的雜交,可以用于研究ad不同***或不同細(xì)胞類型pirb的調(diào)節(jié)作用。
在一個(gè)具體實(shí)施方式中,壓迫元件采用黃銅和鋅的混合物制備而成。具體地,混合物為h62黃銅,即含銅量為%~%,余量為鋅含量的黃銅。而銅、鋅皆屬于非鐵磁性物質(zhì)。在另一個(gè)具體實(shí)施方式中,壓迫元件采用聚乳酸(polylactic,pla)制備而成。pla是一種無(wú)毒無(wú)刺激的合成高分子材料,其原料是乳酸,不含任何金屬。h62黃銅棒或pla棒在體內(nèi),即不會(huì)受磁療、電療引起的磁場(chǎng)、電場(chǎng)干擾,也不會(huì)對(duì)磁療、電療儀器及磁共振儀器產(chǎn)生不良影響。得到大鼠慢性背根神經(jīng)壓迫模型。便于研究者按實(shí)驗(yàn)?zāi)康男枰S時(shí)采取各種樣品。
cns,pirb的功能和下游抑制性信號(hào)通路仍然未被闡明,因此迫切需要pirb的細(xì)胞和動(dòng)物模型。目前對(duì)于pirb基因功能的研究,多采用可溶性的pirb的胞外段(pirbextracellularpeptide,pep)和抑制劑,或者采用慢病毒轉(zhuǎn)染。前者受到是否能夠透過血腦屏障和抑制劑效率的影響,后者慢病毒轉(zhuǎn)染在原代細(xì)胞和在體的轉(zhuǎn)染效率比較低,使研究pirb的功能受到極大的限制。為解決這些問題,我們通過crispr/cas9技術(shù)建立了pirb基因敲入小鼠,將pirb基因敲入c57bl/6j的rosa26位點(diǎn),為研究pirb在免疫系統(tǒng)或者神經(jīng)系統(tǒng)的作用和機(jī)制提供了很好的工具。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:本發(fā)明的目的在于提供pirb基因敲入的小鼠動(dòng)物模型。動(dòng)物疾病模型廣泛應(yīng)用于新藥靶點(diǎn)發(fā)現(xiàn)及篩選。視覺疾病動(dòng)物模型建模原理
歡迎致電咨詢疾病動(dòng)物模型建模。徐匯區(qū)生殖疾病動(dòng)物模型建模
實(shí)驗(yàn)期間每天進(jìn)行陰道涂片,觀測(cè)動(dòng)情周期變化。進(jìn)一步地,檢測(cè)***水平是指:檢測(cè)雌***(e2)、促卵泡生長(zhǎng)素(fsh)和促黃體生成素(lh)的水平。進(jìn)一步地,檢測(cè)對(duì)比卵巢重量是指:比較各組大鼠雙側(cè)卵巢臟器系數(shù)。進(jìn)一步地,陰道涂片是指:采用陰道脫落細(xì)胞涂片法,使用染色劑為亞甲基藍(lán)。本發(fā)明利用順鉑成功地建立了大鼠卵巢早衰模型,為基礎(chǔ)研究建立穩(wěn)定的卵巢早衰動(dòng)物模型奠定了良好的基礎(chǔ)。本發(fā)明使用的各種術(shù)語(yǔ)和短語(yǔ)具有本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的一般含義。提及的術(shù)語(yǔ)和短語(yǔ)如有與公知含義不一致的,以本發(fā)明所表述的含義為準(zhǔn)。附圖說(shuō)明圖1:e2水平檢測(cè)結(jié)果示意圖。圖2:fsh水平檢測(cè)結(jié)果示意圖。圖3:lh水平檢測(cè)結(jié)果示意圖。圖4:大鼠體重檢測(cè)結(jié)果示意圖。圖5:大鼠卵巢重量統(tǒng)計(jì)示意圖。圖6:動(dòng)情周期檢測(cè)(光鏡下10倍)示意圖,其中,a、b、c、d依次為:動(dòng)情前期,動(dòng)情期,動(dòng)情后期,動(dòng)情間期。圖7:he染色觀察不同方法造模對(duì)卵泡形態(tài)的影響(光鏡下10倍)示意圖,其中,a、b、c、d依次為:空白組,2mg組,4mg組,6mg組。具體實(shí)施方式下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的說(shuō)明。然而,本發(fā)明的范圍并不限于下述實(shí)施例。本領(lǐng)域的專業(yè)人員能夠理解,在不背離本發(fā)明的精神和范圍的前提下~徐匯區(qū)生殖疾病動(dòng)物模型建模