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上海哪一家EdU細胞增殖檢測試劑盒原理

來源: 發(fā)布時間:2024-12-24

EdU細胞增殖方法簡單,方便,無需DNA變性,能夠與各種抗體或熒光蛋白同時標(biāo)記,以檢測細胞其他性狀特征。為了與其他熒光共同使用,東寰生物提供多種染料供選擇,覆蓋常用檢測通道,方便您輕松選擇適合的染料,比較大限度地擴展第三方染色的適用范圍,比較大限度地滿足您的檢測儀器要求,完全解決您的實驗難題。EdU細胞增殖檢測方法不需要劇烈的DNA變性操作,只需溫和的細胞固定化和透化處理,能夠較好地保護細胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細胞內(nèi)抗原識別位點,更適合結(jié)合其他染料或蛋白標(biāo)記(如P65抗體)等進行多重標(biāo)記,從而在細胞水平獲取更多的直觀多維特征信息,更適合深入開展細胞功能方面的研究上海東寰告訴您EdU細胞增殖檢測試劑盒的運用方式。上海哪一家EdU細胞增殖檢測試劑盒原理

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測定ATP水平檢測細胞增殖活細胞需要不斷以ATP的形式輸入自由能,因此通過檢測ATP的增加水平可檢測細胞增殖。ATPBioluminescenceAssayKitHSII及ATPBioluminescenceAssayKitCLSII是通過經(jīng)典的熒光素酶發(fā)光對ATP檢測定量的試劑盒。前者主要應(yīng)用于高靈敏度檢測極低濃度ATP的實驗,后者主要應(yīng)用于當(dāng)有持續(xù)信號產(chǎn)生而需要高重復(fù)性結(jié)果的實驗。DNA的合成的檢測:DNA的新組裝合成是細胞生長的必要條件,故經(jīng)常被用來進行細胞增殖、細胞活力及凋亡的檢測。BrdU及EdU,都是胸腺嘧啶的非放射性類似物,能摻入增殖細胞的DNA中,可通過對BrdU及EdU的檢測,從而對DNA的合成量進行測定。EdU細胞增殖檢測試劑盒購買EdU細胞增殖檢測試劑盒常見的用途有哪些?上海東寰告訴您。

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另一方面,EdU上的乙炔基能與生物素標(biāo)記的疊氮化物(Biotinlabeledazide)通過一價銅離子的催化發(fā)生共價反應(yīng),形成穩(wěn)定的三唑環(huán),該反應(yīng)非常迅速,被稱作點擊反應(yīng)(Clickreaction),其反應(yīng)原理參見圖1。通過點擊反應(yīng),新合成的DNA會被相應(yīng)的生物素探針?biāo)鶚?biāo)記,從而可以使用適當(dāng)?shù)臋z測設(shè)備檢測到增殖的細胞。圖1.BeyoClick?EdU檢測法中的點擊反應(yīng)(Clickreaction)原理圖。生物素或熒光探針等標(biāo)記的疊氮化物(LabeledAzide)與摻入到細胞DNA中的EdU,在銅離子的催化發(fā)生共價反應(yīng),形成穩(wěn)定的三唑環(huán),終使細胞DNA標(biāo)記上生物素等探針。本試劑盒反應(yīng)簡單、檢測靈敏度高。本試劑盒基于簡單高效的點擊反應(yīng),無需DNA變性,只需少量的小分子疊氮化物探針即可非常有效地標(biāo)記出摻入的EdU,并且可以檢測到單個細胞的增殖情況。

本試劑盒使用便捷、兼容性好。本試劑盒只需常用的多聚甲醛固定和TritonX-100穿透,就可以使疊氮化物探針有效進入細胞并發(fā)生點擊反應(yīng),不會影響細胞形態(tài),不會影響基于抗體的免疫熒光和免疫組化檢測,也不會影響DNA的熒光染色(如PI染色檢測細胞周期、DAPI或Hoechst染料檢測細胞核)。而BrdU法為了使大分子的BrdU抗體進入細胞并與DNA上的BrdU結(jié)合,需要對雙鏈DNA進行變性處理(如酸變性、熱變性或者DNase消化等),這種變性可能會影響細胞形態(tài),影響后續(xù)的免疫熒光和免疫組化檢測、DNA的熒光染色等。BrdU法和BeyoClick?EdU法檢測原理的比較參見圖2。EdU細胞增殖檢測試劑盒運用再哪些領(lǐng)域?

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上海東寰生物科技有限公司即核苷滲入法。以前常用的核苷滲入法是BrdU(胸腺嘧啶核苷酸類似物)法,但BrdU法的缺點是需要變性DNA后才能與抗體結(jié)合,導(dǎo)致了DNA雙鏈結(jié)構(gòu)的破壞,影響了其他染料的結(jié)合染色,導(dǎo)致染色彌散,準(zhǔn)確性降低等問題。EdU法作為新型的核苷滲入法具有以下優(yōu)點:安全—–不使用[3H]thymidine,無放射性污染。簡單—–基于小分子化學(xué)反應(yīng)的檢測方法,簡單高效,需三步:EdU孵育;細胞固定;熒光檢測。無需DNA變性和孵育抗體。上海東寰向您介紹EdU細胞增殖檢測試劑盒的好處。湖南提供EdU細胞增殖檢測試劑盒哪家好

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