GB 29989 嬰幼兒食品和乳品中左旋肉堿的測(cè)定

酶技術(shù)法

該方法也有不足,由于DTNB 還能與待測(cè)樣品中其他的硫醇類(-SH)物質(zhì)起反應(yīng)DTNB與CoASH不能完全反應(yīng),從而影響測(cè)定的準(zhǔn)確度。因此為了消除-SH物質(zhì)的干擾Marquis 在測(cè)定前將樣品置于90CpH85的環(huán)境中處理5min;也有人用H20，化樣品中含硫醇基的物質(zhì)8(2)2-酮戊二酸脫酶(0GDH)法。JochenSchafer 和Heinz Reichmann(1989)對(duì)原方法進(jìn)行改進(jìn),在測(cè)定游離輔酶A時(shí)用2-  戊二酸取代DTNB,在2-酮戊二酸脫酶(OGDH)催化下與COASH反應(yīng)生產(chǎn)珀酷輔酶A和還原型輔酶I(NADH)NADH在340m 處有強(qiáng)吸收。與原方法相比，OCDH與 COASH反應(yīng)的專一性更強(qiáng)，反應(yīng)更加完全,且不受其他-SH 的影響。該方法靈敏度高至nmol級(jí)，肉堿回收率在103%~115%之間適合低肉堿含量的樣品。 上海普譽(yù)科貿(mào)有限公司為您提供 左旋肉堿測(cè)定用，期待您的光臨！吉林嬰幼兒食品用左旋肉堿測(cè)定用試劑L肉堿

GB 29989 嬰幼兒食品和乳品中左旋肉堿的測(cè)定

熒光光度法

MitsuoMaehara等14(1988)采用一種簡(jiǎn)單的熒光法對(duì)血清中游離肉堿進(jìn)行測(cè)定,測(cè)定原理與分光光度法基本類似。肉堿與乙酷CoA在CAT的催化下反應(yīng)生成乙酷肉堿和COASH，COASH與BIPM耦合生產(chǎn)強(qiáng)熒光物質(zhì)COA-BIPM光強(qiáng)度與肉堿的含量成正比。通過測(cè)定熒光強(qiáng)度,可以得知血清中的肉堿含量。該方法的批內(nèi)和批間變異系數(shù)(C分別為5.2%和2.6%,肉堿回收率在98%~113%之間與顯色法的測(cè)定結(jié)果相比具有良好的相關(guān)性(相關(guān)系數(shù)r>0.90)。該方法靈敏度較高,比較低檢測(cè)限為10pmol/L。KojiroMatsumoto等[15](1990)開發(fā)了光流動(dòng)注射法對(duì)丙戊酸***的患者血清中的肉堿進(jìn)行測(cè)定。該方法使用了肉堿脫氫酶(CDH)和硫辛酷胺脫氫酶(DS)兩種固定化酶催化兩步反應(yīng)***是肉堿和氧化型輔酶I(NAD+)在CDH的催化下反應(yīng)生成還原型輔酶I(NADH)第二步是NADH和刃天青(C12H7NO4)在DS的催化下反應(yīng)生成物質(zhì)試靈(C12H7NO3)試鹵靈的熒光強(qiáng)度與肉堿的含量成正比。用該方法檢測(cè)肉堿時(shí),肉堿的標(biāo)準(zhǔn)曲線在0.1~1.0nmol范圍內(nèi)線性測(cè)的激發(fā)光波長(zhǎng)和發(fā)光波長(zhǎng)分別為560nm和580nm。 奶粉測(cè)定用左旋肉堿測(cè)定用試劑乙酰肉堿轉(zhuǎn)移酶上海普譽(yù)科貿(mào)有限公司為您提供 左旋肉堿測(cè)定用服務(wù)，價(jià)格實(shí)惠，歡迎您的來電哦！

GB29989 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)嬰幼兒食品和乳品中左旋肉堿的測(cè)定

試劑配制

高氯酸溶液（13%）：13mL高氯酸稀釋至100mL。

氫氧化鈉溶液（10mol/L）：稱取40g氫氧化鈉用水溶解，冷卻后稀釋至100mL。3.2.3氫氧化鉀溶液（4.0mol/L）：稱取22.4g氫氧化鉀用水溶解，冷卻后稀釋至100mL。

顯色儲(chǔ)備液：分別稱取50mg2-硝基苯甲酸、5.96gN-2-羥乙基哌嗪-N-2-乙烷磺酸、185mg乙二胺四乙酸二鈉溶于30mL去離子水中，用10mol/LNaOH溶液調(diào)pH至7.4～7.6，然后用水定容至50mL。此液置于4℃冰箱中可保存3個(gè)月。

顯色工作液：吸取5.0mL顯色儲(chǔ)備液用水定容至25mL。

乙酰輔酶A（AcetylCoA）溶液：稱取20.0mg乙酰輔酶A溶于2.0mL水中。臨用時(shí)配制。

酶循環(huán)法MamoruTakahashi等(1(1994)開發(fā)了一種使用肉堿脫氫酶(CDH)測(cè)定血清中左旋肉堿的高靈敏度方法。該方法是一個(gè)還原型輔酶I(NADH硫代氧化型輔酶I(Thio-NAD+)和肉堿脫酶(CDH)共同參與的新型酶循環(huán)技術(shù),原理是左旋肉堿在CDH和Thio-NAD+的存在下轉(zhuǎn)化為脫氫肉堿同時(shí)生成硫代還原型輔酶I(Thio-NADH)脫肉堿又在CDH和NADH的存在下轉(zhuǎn)化為左旋肉堿同時(shí)生成NAD+此反應(yīng)每循環(huán)一次,將生成與左旋肉堿等當(dāng)量的Thio-NADH,因此在一定時(shí)間內(nèi),循環(huán)反應(yīng)的次數(shù)便是Thio-NADH生成相當(dāng)于左旋肉堿的倍數(shù)通過測(cè)定Thio-NADH積累而引起415nm處的光吸收增量即可得知左旋肉堿的含量,還可以提高左旋肉堿的n倍靈敏度。用該方法測(cè)定血清中L-肉堿時(shí)L肉堿的標(biāo)準(zhǔn)曲線在5~250mol/L范圍內(nèi)是線性收率在96.5%~106%之間批內(nèi)與批間的變異系數(shù)(CD分別為在0.66%~4.33%之間和1.02%~2.56%之間。該方法不受膽紅素、血紅蛋白各種酷酷DL-肉堿和抗壞血酸鹽的干擾，且操作過程簡(jiǎn)單、快速、精確、自動(dòng)。左旋肉堿測(cè)定用，就選上海普譽(yù)科貿(mào)有限公司，有想法可以來我司咨詢！

    乙酰輔酶A 嬰幼兒食品和乳品中左旋肉堿測(cè)定用試劑

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乙酰輔酶性質(zhì)乙酰輔酶A是人體內(nèi)重要的化學(xué)物質(zhì)。首先，**酸氧化脫羧，脂酸的β－氧化的產(chǎn)物。同時(shí)，它是脂酸合成，膽固醇合成和酮體生成的碳來源。三大營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的徹底氧化殊途同歸，都會(huì)生成乙酰輔酶A以進(jìn)入三羧酸循環(huán)。乙酰輔酶A是活化了的乙酸?；鶊F(tuán)（CH3CO-=乙?；┡c輔酶A的半胱氨酸殘基的SH-基團(tuán)相連。這其實(shí)是高能鍵硫酯鍵。它是脂肪酸的beta-氧化及糖酵解后產(chǎn)生的**酸氧化脫羧的產(chǎn)物。在三羧酸循環(huán)的第一步，乙酰基轉(zhuǎn)移到草酰乙酸中，生成檸檬酸。循環(huán)也叫檸檬酸循環(huán)。吉林嬰幼兒食品用左旋肉堿測(cè)定用試劑L肉堿

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