熒光染料:能發(fā)出熒光的染料。在吸收紫外線或可見光后,能把短波長的光轉(zhuǎn)變?yōu)椴ㄩL較長的可見光波而反射出來,呈閃亮的鮮艷色彩。例如,酸性曙紅、熒光黃、紅汞以及某些分散染料等。它們大多是含有苯環(huán)或雜環(huán)并帶有共軛雙鍵的化合物。熒光染料可以單獨使用,也可以組合成復(fù)合熒光染料使用。其中復(fù)合熒光染料是利用熒光共振能量轉(zhuǎn)移技術(shù)合成的熒光染料,由距離非常近、能量可以在彼此間傳遞的一個供體及一個受體熒光物分子所組成。復(fù)合染料在受體分子的激發(fā)波長被激發(fā),在供體分子的發(fā)射波長發(fā)射一個光子。熒光染料發(fā)展非常迅速,已開發(fā)的用于科研和臨床應(yīng)用的熒光染料已基本覆蓋了由紫外到可見光及紅外的整個光譜范圍。5(6)-FITC (Fl...
一、體外生物發(fā)光試驗熒光素試劑的制備:D-熒光素,鉀鹽,無菌純水,完全培養(yǎng)基(自行配置)1、用無菌水制備100X熒光素原液(15mg/ml),輕輕顛倒搖動至熒光素完全溶解?;靹蚝罅⒓词褂没蚍盅b后-20℃凍存。2、將D-luciferin,potassiumsalt溶解于預(yù)熱好的組織培養(yǎng)基中制備成濃度為150μg/ml的工作液。用組織培養(yǎng)基1∶100稀釋儲存液,配置工作液(終濃度150μg/mL)3、去除培養(yǎng)細胞的培養(yǎng)基圖像分析前,向細胞培養(yǎng)板中添加1×熒光素工作液,然后進行圖像分析-注射器濾膜過濾除菌,0.2μm注:成像前在37℃下對細胞進行短時間孵育可增強信號。熒光染料可以單獨使用,也可以組...
如何選擇的染料? 考慮到熒光染料種類繁多,您如何為您的特定應(yīng)用選擇使用哪種染料?以下是您需要考慮的一些因素?!c實驗設(shè)計的兼容性:雖然它們可能與其他熒光團共享一些光譜相似性,但每種染料都是***的,并且具有不同的功能、激發(fā)和發(fā)射波長、波段形狀和寬度以及光穩(wěn)定性。為確保成功,請選擇與您的實驗設(shè)計相輔相成的一種。與設(shè)備的兼容性:選擇與您正在使用的照明源相匹配的染料。在選擇合適的熒光儀器時,請考慮儀器的靈敏度、動態(tài)范圍、穩(wěn)定性和通量、信噪比和信空白比。為了獲得更好的結(jié)果,請確保染料的發(fā)射曲線與可用的檢測方法相匹配。與樣品中其他熒光材料的相容性:在雙重或三重標(biāo)記實驗中,您選擇的染料的發(fā)射和激...
FITC熒光標(biāo)記蛋白的應(yīng)用及特點:活性熒光染料,如FITC、7-氨基-4-甲基香豆素(AMC)、羅丹明B(RhodamineB)或AlexaFluor染料,可用于標(biāo)記抗體或蛋白質(zhì)功能基團,生成分子探針,并通過熒光成像進行檢測。當(dāng)用熒光染料化學(xué)標(biāo)記特異性抗體或其他純化生物分子時,它們成為用于檢測靶抗原或相互作用配偶體的熒光探針,用于細胞成像、流式細胞手術(shù)、蛋白質(zhì)痕跡和酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)。由于熒光標(biāo)記物具有無放射物污染、操作簡單等優(yōu)點,在蛋白質(zhì)功能研究、藥物篩選等許多研究領(lǐng)域得到了越來越廣泛的應(yīng)用。 南京星葉生物科技有限公司Super Fluor 系列(效果同Alexa Fl...
熒光標(biāo)記技術(shù)是指運用熒光染料與待研究對象結(jié)合,利用它的熒光特性,提供待研究對象相關(guān)信息。熒光標(biāo)記具有操作簡便、高穩(wěn)定性、高靈敏度等優(yōu)勢,使熒光染料在生命科學(xué)研究中應(yīng)用,包括:標(biāo)記活細胞或固定細胞中的蛋白質(zhì)、多肽;作為功能性指示劑表征細胞健康狀況;設(shè)計各種熒光探針,尋找特定蛋白或藥物靶點。應(yīng)用分類:多肽、蛋白、抗體標(biāo)記:氨基標(biāo)記、巰基標(biāo)記、羧基標(biāo)記;***成像:水溶性/脂溶性熒光染料、近紅外I區(qū)/II區(qū)熒光染料南京星葉生物科技有限公司提供不同用途的熒光染料,了解更多(包括但不限于) 5(6)-FITC (Fluorescein 5(6)-isothiocyanate) 是一種胺活性衍...
三、細胞實驗D-熒光素鉀鹽體外生物發(fā)光試驗:D-熒光素鉀鹽,無菌純水,完全培養(yǎng)基(自行配制)1、貼壁細胞:將細胞接種于培養(yǎng)板中孵育數(shù)小時或過夜,使細胞貼壁。懸浮細胞:可以將細胞接種于培養(yǎng)板后直接進行后續(xù)操作,無需孵育。如果倍增時間相對較短,則應(yīng)考慮倍增時間進行細胞計數(shù)。2、將15mg熒光素鉀鹽溶解于1ml無菌水中,制備成100X熒光素儲備液(15mg/ml),輕輕顛倒搖動至熒光素鉀鹽完全溶解?;靹蚝罅⒓词褂没蚍盅b后-20℃凍存。3、用預(yù)熱好的細胞培養(yǎng)基1∶100稀釋100X熒光素儲備液(15mg/ml),配制成熒光素工作液(終濃度150μg/ml),即配即用。4、去除培養(yǎng)板中的培養(yǎng)基。5、在成...
羅丹明屬于呫噸族。與市場上的許多其他染料相比,羅丹明具有出色的光穩(wěn)定性以及許多光物理特性,使其非常適合用作激光染料、熒光探針和顏料。它們在聚合物納米粒子表面的表征、聚合物-生物偶聯(lián)物的檢測、活細胞的成像以及寡核苷酸在膠乳上的吸附分析等方面特別有用。羅丹明熒光染料的衍生物也用作:分子開關(guān),病毒表面修飾,化學(xué)傳感器,硫醇。不同類型的染料通過它們各自的取代基(R1、R2、R3、R4和G)來區(qū)分。由于它們的差異,這些熒光染料在溶液中也表現(xiàn)出不同的光物理特性(例如不同的熒光壽命和發(fā)射比較大值)。氨基被剛性化的羅丹明染料無論溫度范圍如何都表現(xiàn)出高量子產(chǎn)率,而在每個氮處具有兩個烷基取代基的那些表現(xiàn)出活化的內(nèi)...
為什么要使用熒光染料?雖然不同的染色技術(shù)(即考馬斯染色、銀染色、熒光染色)可用于可視化凝膠電泳分離的蛋白質(zhì),但使用熒光染料具有其獨特的優(yōu)勢。他們提供:高靈敏度:對于大多數(shù)分析物,熒光測量的靈敏度比吸光度測量高1000倍,即使在使用小樣本時也可以令人滿意地達到ppt(萬億分之一)的檢測限。寬線性動態(tài)范圍。輸出與樣品濃度成正比。低干擾:由于吸收光的材料數(shù)量眾多,分光光度測量通常會遇到干擾問題。在進行熒光測量時不會遇到這個問題,因為只有少數(shù)材料具有熒光能力。高通量:熒光測量具有簡單而強大的協(xié)議,并且可以自動化用于高通量應(yīng)用。Super Fluor 680(效果同Alexa Fluor 680)琥珀酰...
SUPERGreenI(10,000×DMSO溶液,電泳級)儲存條件及注意事項4℃避光可保存12個月。本品用DMSO溶解,因DMSO的熔點是18.5℃,使用前請放置到室溫充分溶解。SUPERGreenI核酸染料特點●無毒性:屬花菁類染料,容易生物降解,無致*毒性?!耢`敏度高:至少可檢出20pgDNA,高于EB染色法25~100倍?!裥旁氡雀撸簶悠窡晒庑盘枏姡尘靶盘柕??!癫僮骱唵危簾o須脫色或沖洗,即可直接用紫外凝膠透射儀或可見光透射儀觀察。●適用范圍廣:可適用于多種凝膠電泳方法:瓊脂糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠電泳、脈沖電場凝膠電泳和毛細管電泳等?!袷褂梅奖悖簩Ψ肿由飳W(xué)中常用的酶(如:Taq酶、反...
常用抗體標(biāo)記熒光染料的特性及其應(yīng)用 1、FITC:激發(fā)波長488nm,比較大發(fā)射波長525nm。1)其標(biāo)記的抗體適用于所有配備488nm氟離子激光器的流式細胞儀;2)在流式細胞儀的FL1通道檢測;3)可用于熒光顯微鏡技術(shù)4)熒光強度易受PH值影響,PH值降低時其熒光強度減弱。2、AlexaFluor488:激發(fā)波長488nm,比較大發(fā)射波長519nm。1)其標(biāo)記的抗體適用于所有配備488nm氟離子激光器的流式細胞儀:2)在流式細胞儀的FL1通道檢測;3)具有超乎尋常的光穩(wěn)定性,非常適用于熒光顯微鏡技術(shù);4)在較寬的PH值范圍內(nèi)保持穩(wěn)定(PH4~10)。5)南京星葉生物科技有限公司Su...
羅丹明屬于呫噸族。與市場上的許多其他染料相比,羅丹明具有出色的光穩(wěn)定性以及許多光物理特性,使其非常適合用作激光染料、熒光探針和顏料。它們在聚合物納米粒子表面的表征、聚合物-生物偶聯(lián)物的檢測、活細胞的成像以及寡核苷酸在膠乳上的吸附分析等方面特別有用。羅丹明熒光染料的衍生物也用作:分子開關(guān),病毒表面修飾,化學(xué)傳感器,硫醇。不同類型的染料通過它們各自的取代基(R1、R2、R3、R4和G)來區(qū)分。由于它們的差異,這些熒光染料在溶液中也表現(xiàn)出不同的光物理特性(例如不同的熒光壽命和發(fā)射比較大值)。氨基被剛性化的羅丹明染料無論溫度范圍如何都表現(xiàn)出高量子產(chǎn)率,而在每個氮處具有兩個烷基取代基的那些表現(xiàn)出活化的內(nèi)...
SuperFluor活化酯(與Invitrogen的AlexaFluor活化酯完全相同)SuperFlour系列熒光探針,具有更強的熒光強度,更廣的pH應(yīng)用范圍(pH4~10),更好的抗淬滅性。在生物熒光領(lǐng)域已逐漸替代FITC,Cy3,Cy5,Cy5.5,Cy7等熒光染料。1.標(biāo)記效率低——計算結(jié)果顯示每摩爾145,000MW的蛋白標(biāo)記的熒光團少于4mol有以下原因:1)緩沖液中含有痕量伯銨成分,與染料反應(yīng)降低了標(biāo)記效率。如果蛋白已經(jīng)溶于含氨基的緩沖液(如Tris或氨基乙酸),標(biāo)記前用PBS透析。2)蛋白含量較低(≤1mg/mL)會影響標(biāo)記效率。3)標(biāo)記步驟中加入碳酸氫鈉的作用是將反應(yīng)混合物的...
在1990年代***使用的綠色熒光蛋白(從水母維多利亞水母克?。┘捌溲苌铮ɡ缭寮t藍蛋白、藻膽蛋白和藻紅蛋白等)是當(dāng)今生物學(xué)研究中**常用的一些生物熒光團。雖然熒光團可用于在細胞、細菌和各種***中表達質(zhì)粒,但它們的使用有一些缺點,即它可能很耗時,并且在融合時還能夠改變某些細胞蛋白的正常生物學(xué)功能。此外,與許多其他熒光團相比,生物熒光團的光穩(wěn)定性和靈敏度較低。綠色熒光蛋白(GFP)綠色熒光蛋白是當(dāng)下流行的生物熒光團之一,由238個氨基酸組成,其中三個負責(zé)發(fā)出可見綠色熒光的結(jié)構(gòu)。在水母本身中,熒光團與水母發(fā)光蛋白(一種蛋白質(zhì))相互作用,當(dāng)添加鈣時會發(fā)出藍光。通過DNA重組,研究人員可以使用負責(zé)...
在1990年代***使用的綠色熒光蛋白(從水母維多利亞水母克?。┘捌溲苌铮ɡ缭寮t藍蛋白、藻膽蛋白和藻紅蛋白等)是當(dāng)今生物學(xué)研究中**常用的一些生物熒光團。雖然熒光團可用于在細胞、細菌和各種***中表達質(zhì)粒,但它們的使用有一些缺點,即它可能很耗時,并且在融合時還能夠改變某些細胞蛋白的正常生物學(xué)功能。此外,與許多其他熒光團相比,生物熒光團的光穩(wěn)定性和靈敏度較低。綠色熒光蛋白(GFP)綠色熒光蛋白是當(dāng)下流行的生物熒光團之一,由238個氨基酸組成,其中三個負責(zé)發(fā)出可見綠色熒光的結(jié)構(gòu)。在水母本身中,熒光團與水母發(fā)光蛋白(一種蛋白質(zhì))相互作用,當(dāng)添加鈣時會發(fā)出藍光。通過DNA重組,研究人員可以使用負責(zé)...
在1990年代***使用的綠色熒光蛋白(從水母維多利亞水母克隆)及其衍生物(例如藻紅藍蛋白、藻膽蛋白和藻紅蛋白等)是當(dāng)今生物學(xué)研究中**常用的一些生物熒光團。雖然熒光團可用于在細胞、細菌和各種***中表達質(zhì)粒,但它們的使用有一些缺點,即它可能很耗時,并且在融合時還能夠改變某些細胞蛋白的正常生物學(xué)功能。此外,與許多其他熒光團相比,生物熒光團的光穩(wěn)定性和靈敏度較低。綠色熒光蛋白(GFP)綠色熒光蛋白是當(dāng)下流行的生物熒光團之一,由238個氨基酸組成,其中三個負責(zé)發(fā)出可見綠色熒光的結(jié)構(gòu)。在水母本身中,熒光團與水母發(fā)光蛋白(一種蛋白質(zhì))相互作用,當(dāng)添加鈣時會發(fā)出藍光。通過DNA重組,研究人員可以使用負責(zé)...
所需的CY3-NHS酯的量取決于待標(biāo)記蛋白的量,以及CY3-NHS的比較好摩爾比為10。示例:假設(shè)所需的標(biāo)記蛋白為500μL2mg/mLIgG(MW=150,000),用100μLDMSO溶解1mgCY3-NHS酯,得到所需的CY3-NHS酯體積為5.05μL,詳細計算過程如下:1)mmol(IgG)=mg/mL(IgG)×mL(IgG)/MW(IgG)=2mg/mL×0.5mL/150,000mg/mmol=6.7×10-6mmol2)mmol(CY3-NHS酯)=mmol(IgG)×10=6.7×10-6mmol×10=6.7×10-5mmol3)uL(CY3-NHS酯)=mmol(CY3...
三:貼壁細胞染色1、將貼壁細胞培養(yǎng)于無菌蓋玻片上。2、從培養(yǎng)基中移走蓋玻片,吸走過量培養(yǎng)液,但要使表面保持濕潤。3、在蓋玻片的一角加入100μL的染料工作液,輕輕晃動使染料均勻覆蓋所有細胞。4、37℃孵育細胞2~20min,不同的細胞比較好培養(yǎng)時間不同??梢?0min作為起始孵育時間,之后優(yōu)化體系以得到均一的標(biāo)記效果。5、吸干染料工作液,用培養(yǎng)液洗蓋玻片2~3次,每次用預(yù)溫的培養(yǎng)基覆蓋所有細胞,孵育5~10min,然后吸干培養(yǎng)基。但要使表面保持濕潤。四:結(jié)果檢測樣品可在培養(yǎng)基中進行檢測,可通過熒光顯微鏡成像或流式細胞儀分析。非磺化花青類染料- 該組中的一些染料包括 cy3、cy3.3、cy5、...
PI是一種可對DNA染色的細胞核染色試劑,它在嵌入雙鏈DNA后釋放紅色熒光。常用于細胞凋亡(apoptosis)或細胞壞死(necrosis)的檢測,常用于流式細胞儀分析。盡管PI不能通過活細胞膜,但卻能穿過破損的細胞膜而對核染色。PI經(jīng)常被用來與Calcein,AM、Hoechst33258或Hoechst33342等一起使用,能同時對活細胞和死細胞染色。PI-DNA復(fù)合物的激發(fā)和發(fā)射波長分別為535nm和615nm。2.染色過程(1)將1/10培養(yǎng)基體積的PI染色液加入到細胞培養(yǎng)基中(也可以用1/10濃度的PI緩沖液代替培養(yǎng)基)。(2)在37℃培養(yǎng)細胞10~20分鐘。(3)用PBS或合適的...
FITC熒光標(biāo)記蛋白的應(yīng)用及特點:活性熒光染料,如FITC、7-氨基-4-甲基香豆素(AMC)、羅丹明B(RhodamineB)或AlexaFluor染料,可用于標(biāo)記抗體或蛋白質(zhì)功能基團,生成分子探針,并通過熒光成像進行檢測。當(dāng)用熒光染料化學(xué)標(biāo)記特異性抗體或其他純化生物分子時,它們成為用于檢測靶抗原或相互作用配偶體的熒光探針,用于細胞成像、流式細胞手術(shù)、蛋白質(zhì)痕跡和酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)。由于熒光標(biāo)記物具有無放射物污染、操作簡單等優(yōu)點,在蛋白質(zhì)功能研究、藥物篩選等許多研究領(lǐng)域得到了越來越廣泛的應(yīng)用。 南京星葉生物科技有限公司Super Fluor 系列(效果同Alexa Fl...
DiD,DiO,DiI,DiR和DiS染料是一族親脂性的熒光染料,可以用來染細胞膜和其它脂溶性生物結(jié)構(gòu)。當(dāng)與細胞膜結(jié)合后其熒光強度**增強,這類染料有著很高的淬滅常數(shù)和激發(fā)態(tài)壽命。一旦對細胞染色,這類染料在整個細胞膜上擴散,比較好濃度時可以使整個細胞膜染色。它們的熒光顏**分明顯:DiI(橙色熒光),DiO(綠色熒光),DiD(紅色熒光)和 DiR (深紅色熒光)這使得他們可以用來對活細胞進行多色成像和流式分析。DiI和DiO可以分別用標(biāo)準(zhǔn)的 FITC和TRITC的濾光片。DiD可以用 633 nm He–Ne 激光器激發(fā),有著比DiI更長的激發(fā)波長和發(fā)射波長,在細胞和組織染色中更有價值。 D...
熒光染料在細胞實驗中具有廣泛的應(yīng)用1、細胞膜標(biāo)記:可以使用熒光染料標(biāo)記細胞膜,以觀察和研究細胞膜的動態(tài)和結(jié)構(gòu)變化。2、染色體和DNA標(biāo)記:用熒光染料標(biāo)記染色體或DNA,可以觀察和分析DNA復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、修復(fù)等過程3、蛋白質(zhì)標(biāo)記:通過熒光染料標(biāo)記蛋白質(zhì),可以研究蛋白質(zhì)的相互作用、定位和運動等特性。4、細胞器標(biāo)記:使用特定波長的熒光染料可以標(biāo)記和可視化細胞中的線粒體、溶酶體等細胞器。5、神經(jīng)科學(xué)應(yīng)用:熒光染料在神經(jīng)科學(xué)中也有廣泛應(yīng)用,如標(biāo)記神經(jīng)元和突觸,觀察神經(jīng)信號的傳遞等。6、基因表達分析:通過熒光染料標(biāo)記基因表達產(chǎn)物,可以定量分析基因的表達水平和細胞中的分布情況。熒光染料,由于靈敏度高,操作方便...
Cy3 (Cyanine 3) 是一種發(fā)橘黃色熒光的花青素?zé)晒馊玖稀y3染料的激發(fā)峰和發(fā)射峰分別在550 nm和570 nm左右,它的熒光肉眼觀察很明亮,并且對pH不敏感,在共聚焦顯微鏡中可以用532nm(肩峰)或者556nm(頂峰)的激光束激發(fā),在普通熒光顯微鏡中可以用 TRITC (tetramethylrhodamine) 的濾片觀察,所以在絕大部分熒光儀器上都可以使用。Cy3也是Dil等細胞電位追蹤劑的母核,所以它是在生物技術(shù)中非常有用的熒光染料。在熒光成像時,Cy3的背景熒光一般認為比TAMRA等TRITC系列的染料低。 Cy3可以用來標(biāo)記蛋白,抗體,多肽等,它常見的使用是標(biāo)記核酸...
CY7是一種CY染料。CY為花菁(Cyanine)的縮寫,是由奇數(shù)個甲基單元連接的兩個氮原子組成的化合物。菁類化合物具有波長長、吸收和發(fā)射可調(diào)、消光系數(shù)高的特點CY系染料常被用于蛋白、抗體以及小分子化合物的標(biāo)記,對于蛋白抗體的標(biāo)記,可以通過簡單的混合反應(yīng)來完成結(jié)合,下面我們介紹了蛋白抗體標(biāo)記的標(biāo)記方法,具有一定的參考意義。一、比較好蛋白制備1)為獲得標(biāo)記效果,請制備蛋白(抗體)濃度為2mg/mL。2)蛋白溶液的pH值為8.5±0.5。如果pH值低于8.0,應(yīng)使用1M3)如果蛋白濃度低于2mg/mL,標(biāo)記效率會**降低。為獲得比較好標(biāo)記效率,建議**終蛋白濃度范圍為2-10mg/mL。4)蛋白必...
3.粘壁細胞的染色(1)使粘壁的細胞在無菌實驗室培養(yǎng)。(2)從培養(yǎng)基中移走蓋玻片,吸走過量培養(yǎng)液,將蓋玻片放在潮濕的環(huán)境中。(3)在蓋玻片的一角加入100μL的染料工作液,輕輕晃動使染料均勻覆蓋所有細胞。(4)在37℃培養(yǎng)細胞2~20分鐘,不同的細胞比較好培養(yǎng)時間不同。(5)吸干染料工作液,用培養(yǎng)液洗蓋玻片2~3次,每次用預(yù)溫的培養(yǎng)基覆蓋所有細胞,培養(yǎng)5~10分鐘,然后吸干培養(yǎng)基。 4.顯微鏡檢測(1)DiD,DiO,DiI,DiR和DiS濾光器的選擇參見表1。(2)多色染料的同時檢測,濾光器按照以下設(shè)定:a)DiI和DiO=OmegaXF52,Chroma51004;b)DiI和D...
過標(biāo)記——計算結(jié)果顯示每摩爾145,000MW的蛋白標(biāo)記的熒光團大于10mol。雖然過標(biāo)記的蛋白也可以使用,但可能會引起蛋白的聚集、降低抗體結(jié)合抗原的特異性,這些都會造成非特異性結(jié)合。過標(biāo)記還會引起熒光淬滅??梢栽黾拥鞍谆驕p少反應(yīng)時間。3.未結(jié)合染料難以去除——盡管大部分時候用分離柱可以較好的純化蛋白偶聯(lián)物,但仍可能會有痕量的游離染料留在偶聯(lián)物溶液中,會使標(biāo)記計算的值偏高??捎梅蛛x柱再次分離或透析去除。4.蛋白或蛋白偶聯(lián)物無法洗脫——不要再加緩沖液,只需再次離心一次或幾次。Cy3 (Cyanine 3) 是一種發(fā)橘黃色熒光的花青素?zé)晒馊玖?。安徽細胞熒光染? 小動物***熒光成像技術(shù)是...
蛋白熒光標(biāo)記技術(shù)是目前**為常見的蛋白體外標(biāo)記技術(shù),利用級聯(lián)放大反應(yīng)原理,將極度敏感性且易于檢測的熒光素通過某個基團吸附或共價結(jié)合后,標(biāo)記到特異性抗原或抗體分子上,應(yīng)用熒光顯微鏡觀察熒光標(biāo)記物因增強放大效應(yīng)而產(chǎn)生顏色、光譜等變化,以分析示蹤相應(yīng)抗體或抗原性質(zhì)與含量的方法。該技術(shù)在具有高度精確性的熒光顯微鏡下,借助高度靈敏性的熒光檢測,在各種生物過程中對目的蛋白進行可視化,從而通過抗原抗體高度特異性免疫定量表達或在細胞研究中定位。蛋白熒光標(biāo)記已成為研究蛋白質(zhì)互作、酶活性、***示蹤以及細胞分選重要工具。蛋白標(biāo)記常用熒光染料隨著蛋白熒光標(biāo)記技術(shù)不斷發(fā)展,各類熒光素廣泛應(yīng)用于生物實驗中,目前常用標(biāo)記...
蛋白熒光標(biāo)記技術(shù)是目前**為常見的蛋白體外標(biāo)記技術(shù),利用級聯(lián)放大反應(yīng)原理,將極度敏感性且易于檢測的熒光素通過某個基團吸附或共價結(jié)合后,標(biāo)記到特異性抗原或抗體分子上,應(yīng)用熒光顯微鏡觀察熒光標(biāo)記物因增強放大效應(yīng)而產(chǎn)生顏色、光譜等變化,以分析示蹤相應(yīng)抗體或抗原性質(zhì)與含量的方法。該技術(shù)在具有高度精確性的熒光顯微鏡下,借助高度靈敏性的熒光檢測,在各種生物過程中對目的蛋白進行可視化,從而通過抗原抗體高度特異性免疫定量表達或在細胞研究中定位。蛋白熒光標(biāo)記已成為研究蛋白質(zhì)互作、酶活性、***示蹤以及細胞分選重要工具。蛋白標(biāo)記常用熒光染料隨著蛋白熒光標(biāo)記技術(shù)不斷發(fā)展,各類熒光素廣泛應(yīng)用于生物實驗中,目前常用標(biāo)記...
小動物***熒光成像技術(shù)是現(xiàn)***物醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域的一項重要技術(shù),因其具有操作簡單、實時直觀、靈敏度高、實驗成本低等特點,已廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)、醫(yī)學(xué)研究及藥物開發(fā)等方面。納米材料在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用,旨在解決傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)面臨的各種醫(yī)學(xué)挑戰(zhàn),包括生物利用度差,靶向特異性受損,全身和***毒性等。納米材料具有很多與眾不同的優(yōu)點,比如多功能性、大的負載量、靶向性、血液循環(huán)時間長等。納米材料在生物醫(yī)學(xué)中起著關(guān)鍵作用,可以有效攜帶成像探針、***劑或生物材料并傳遞至靶點,如特定的***、組織甚至細胞。光學(xué)成像主要包括生物發(fā)光(bioluminescenceimaging,BLI)和焚光成像(...
與花青和羅丹明染料一樣,熒光素也是一種有機染料。熒光素的比較大吸收波長為494nm,比較大發(fā)射波長為521nm(通常吸收藍色范圍內(nèi)的光并發(fā)射綠色范圍內(nèi)的光),熒光素是一種高熒光物質(zhì)。即使在非常少量的情況下也可以檢測到它,并且在與抗體結(jié)合時用于顯微鏡檢查。熒光素的衍生物包括異硫氰酸熒光素、俄勒岡綠和羧基萘并熒光素等。與許多其他熒光染料一樣,熒光素價格低廉且易于使用,使其成為生物學(xué)研究中很受歡迎的染料之一。與大多數(shù)其他染料不同,熒光素在水溶液中是無毒的。因此,它是極少數(shù)用作地下水示蹤劑的染料之一。吲哚菁綠在生物識別和藥物輸送方面也有廣泛的應(yīng)用。重慶蘇州熒光染料CY5熒光染料是一種被廣泛應(yīng)用于生物分...
注:建議對每只動物模型都需要建立熒光素酶動力學(xué)曲線,從而確定比較高信號檢測時間和信號平臺期。保存和操作的過程中都要避光。另外水溶性儲存液過濾除菌后,可以-20℃或-80℃分裝凍存,避免反復(fù)凍融。如果有條件,對儲存液充氮氣或氬氣(防止氧化),穩(wěn)定性和保存時間更長。 注射方式,動物類型以及體重等都會影響信號的發(fā)射,因此建議每次實驗都要做熒光素酶動力學(xué)曲線,確定比較好信號平臺期和比較好的檢測時間。熒光素鉀鹽和熒光素鈉鹽應(yīng)用上沒有差別,兩者的差別在于物理性狀上如外形和溶解性。鈉鹽的水溶性高于鉀鹽。從目前發(fā)表的文獻來看,鉀鹽的使用率遠高于鈉鹽,尤其是體內(nèi)實驗。兩者功效相同。 為了您的安全和健康,請穿實驗...