常見問題及對策3:如何避免磁珠在儲存或使用過程中可能出現(xiàn)的聚集情況?磁珠應保存在2~8℃,使用時應避免由于污染而導致的不可逆聚集,或因干燥而導致的聚集。磁珠在低pH的洗脫緩沖液中發(fā)生聚集屬于正?,F(xiàn)象,不影響磁珠的正常使用。在Bindingbuffer和Elut...
檢測EPCAM、MUC16兩種抗原在上皮性卵巢*循環(huán)腫瘤細胞中表達的相關性。方法分別用羧基磁珠制備EPCAM、MUC16兩種免疫磁珠,分3組:EPCAM免疫磁珠檢測組、MUC16免疫磁珠檢測組、2種磁珠均等混合檢測組。對來源于同一患者的等體積外周血樣本進行循環(huán)...
抗熒光素單克隆抗體免疫磁珠,并進行初步應用。方法采用B淋巴細胞雜交瘤技術制備抗熒光素單克隆抗體;制備腹水,經(jīng)50%硫酸銨粗提后,再經(jīng)陰離子交換樹脂DE52進一步純化單克隆抗體;采用氧化共沉淀法制備納米磁性粒子;乳液聚合法制備羧基磁性微球;用碳二亞胺將抗熒光素單...
建立免疫磁珠法分離,并培養(yǎng)人腦膠質(zhì)瘤干細胞的方法.方法將術中取得的腦膠質(zhì)瘤標本,通過剪切、消化和吹打成單細胞懸液,篩網(wǎng)過濾,免疫磁珠分選試劑盒分選出CD133+細胞,用神經(jīng)干細胞無血清培養(yǎng)法培養(yǎng)出具有單細胞克隆能力的細胞球,取第3代進行誘導分化,分化前后用免疫...
利用免疫磁珠法分選并鑒定人前列腺*類干細胞.方法利用免疫磁珠法從人前列腺*細胞株PC3中分選CD133+/CD44+細胞,通過免疫組化,流式細胞術,CCK8,平板克隆形成實驗及裸鼠成瘤實驗鑒定其表面標志物表達情況及**干細胞特性.結果經(jīng)免疫磁珠法分選所得CD1...
常見問題及對策5:磁珠在使用過程中出現(xiàn)結塊現(xiàn)象?磁珠在使用時如果出現(xiàn)結塊現(xiàn)象一般較難振蕩打散,容易導致分布不均,出現(xiàn)該問題的原因是磁珠在磁場中放置太久而使磁珠牢固的結合在一起。用超聲波水浴處理2min即可打散磁珠使其重新分散,但應注意超聲處理也會使磁珠在樣品溶...
用多聚抗原肽(multipleantigenpeptides,MAP)包被磁珠制備單表位抗體的方法.方法:通過Fmoc法固相化學合成UreB的8分支單表位MAP,將其作為免疫原免疫小鼠,獲得多克隆抗血清.將MAP以共價偶聯(lián)的方式包被磁珠制備免疫磁珠(immun...
免疫磁珠(Immunomagneticbead,IMB)技術是20世紀80年代出現(xiàn)的技術方法。以免疫學為基礎,滲透到病理、生理、藥理、微生物、生化及分子遺傳學等各個領域,其在免疫檢測、細胞分離、生物大分子純化和分子生物學等方面有著越來越***的使用。免疫磁珠的...
BEENbio鏈霉親和素磁珠本產(chǎn)品是由磁性納米顆粒與高純度的鏈霉親和素共價偶聯(lián)而成。這種微球能用于捕獲生物素標記的底物,如抗原、抗體和核酸等。鏈霉親和素(streptavidin)與生物素(biotin)的結合是***的非共價生物交互作用之一,因此,這也是親和...
分離轉基因小鼠骨髓造血干細胞.運用針對小鼠干細胞表面特異表達的干細胞抗原-1(stemcellantigen-1,Sca-1)的單克隆抗體和包被于磁顆粒表面的第二抗體,采用磁吸附細胞分選方法(MACS)分離小鼠骨髓造血干細胞,用流式細胞術(FACS)檢測MAC...
羥基淀粉沉淀去除臍血紅細胞和免疫磁珠(MACS)陽性選擇,建立富集,分離臍血CD34+細胞的簡易實用方法,通過造血祖細胞集落培養(yǎng)分析其在細胞因子作用下的增殖潛能,觀察羥基淀粉沉淀對造血細胞增殖功能的影響.方法:采用羥基淀粉沉淀和改進的MACS富集,分離臍血CD...
免疫磁性細胞分選系統(tǒng)分離純化骨髓衍生肝干細胞亞群c-Kit^+lin^-。方法:實驗于2006—07/08在南方醫(yī)科大學實驗動物中心完成。6~8周齡的SPF級純系BALB,C雄性小鼠10只,體質(zhì)量18~20g。收集小鼠股骨骨髓細胞,利用免疫磁性細胞分選系統(tǒng),通...
利用免疫磁珠從SD大鼠坐骨神經(jīng)分離培養(yǎng)獲得大量,高純度雪旺細胞的方法.[方法]選用4-7dSD大鼠,無菌條件下取雙側坐骨神經(jīng),解剖鏡下剝離去除神經(jīng)外膜,獲得神經(jīng)束,將神經(jīng)束剪碎至1mm3大小.采用雙酶2次消化法消化,胎牛血清中止消化后,離心并加入DF12培養(yǎng)液...
人腦**組織中分離,培養(yǎng),純化和鑒定腦**干細胞(BTSCs),探討CD133免疫磁珠分選方法獲取BTSCs的可行性及BTSCs的生物學特性.方法:留取人腦膠質(zhì)母細胞瘤新鮮標本,分離獲得腦腫瘤細胞.應用CD133免疫磁珠分選方法純化BTSCs;流式細胞儀檢測分...
免疫磁珠法(MiniMACS)在分離純化外周血CD4+和CD8+T淋巴細胞亞群中的應用.方法:應用密度梯度離心法分離外周血單個核細胞(Peripheralbloodmononucleatecells,PBMC),采用MiniMACS分別分離和純化39例標本外周...
COIP實驗步驟第三步:免疫共沉淀根據(jù)不同的抗體結合方式,這里的免疫共沉淀步驟會稍有不同,但是本質(zhì)是一樣的,都是為了形成抗原-蛋白復合物。如果直接使用 Protein A/G 結合的 beads,先進行細胞裂解液/蛋白混合物與抗體的孵育,再加入 beads 將...
免疫磁性細胞分選系統(tǒng)分離純化骨髓衍生肝干細胞亞群c-Kit^+lin^-。方法:實驗于2006—07/08在南方醫(yī)科大學實驗動物中心完成。6~8周齡的SPF級純系BALB,C雄性小鼠10只,體質(zhì)量18~20g。收集小鼠股骨骨髓細胞,利用免疫磁性細胞分選系統(tǒng),通...
免疫磁珠分離法純化抗血清的實驗條件,并與A蛋白親和層析法比較純化效果,以求得到一種簡便,快速,高效的純化IgG方法.結果表明:從5只新西蘭兔獲得210 mL試管凝集效價高達1:5 120的兔抗鰻弧菌抗血清,磁珠與IgG結合10 min達到平衡,其比較大結合量為...
探討小鼠脾臟CD8+T細胞的免疫磁珠負性分選方法,并對分選后所得細胞進行純度、活力及功能檢測.方法以免疫磁珠負性分選法從小鼠脾臟細胞中分離CD8+T細胞,流式細胞術檢測所得細胞的純度,臺盼藍檢測細胞活力并用ConA刺激檢測增殖能力.結果經(jīng)過流式細胞儀測定免疫磁...
抗熒光素單克隆抗體免疫磁珠,并進行初步應用。方法采用B淋巴細胞雜交瘤技術制備抗熒光素單克隆抗體;制備腹水,經(jīng)50%硫酸銨粗提后,再經(jīng)陰離子交換樹脂DE52進一步純化單克隆抗體;采用氧化共沉淀法制備納米磁性粒子;乳液聚合法制備羧基磁性微球;用碳二亞胺將抗熒光素單...
免疫磁珠法分離細胞是基于細胞表面抗原能與連接有磁珠的特異性單抗相結合,在外加磁場中,通過抗體與磁珠相連的細胞被吸附而滯留在磁場中,無該種表面抗原的細胞由于不能與連接著磁珠的特異性單抗結合而沒有磁性,不在磁場中停留,從而使細胞得以分離。免疫磁珠應用分為正選法和負...
COIP實驗步驟第三步:免疫共沉淀根據(jù)不同的抗體結合方式,這里的免疫共沉淀步驟會稍有不同,但是本質(zhì)是一樣的,都是為了形成抗原-蛋白復合物。如果直接使用 Protein A/G 結合的 beads,先進行細胞裂解液/蛋白混合物與抗體的孵育,再加入 beads 將...
實驗優(yōu)化建立基于免疫磁分離技術對金黃色葡萄球菌的快速分離方法,為后續(xù)快速檢測提供基礎.利用金黃色葡萄球菌多抗制備的免疫磁珠對其捕獲.結合平板菌落計數(shù),考察包被磁珠時多抗加入量,免疫磁珠加入量及捕獲時間等因素對捕獲效率的影響.在單因素實驗基礎上進行正交實驗,并對...
從臍血中分離,培養(yǎng)血管內(nèi)皮祖細胞,研究內(nèi)皮祖細胞的生長特性和誘導分化條件.方法:應用MACS磁球抗體標記法純化臍血中的CD133+細胞,通過流式細胞儀,免疫細胞化學,免疫熒光等技術及形態(tài)學(光鏡,電鏡)觀察研究內(nèi)皮祖細胞;將細胞接種于添加(或未添加)VEGF,...
免疫磁珠分離成人骨髓中STRO-1^+陽性細胞,獲得同質(zhì)性骨髓基質(zhì)干細胞.方法:實驗于2004-06/2005-06在東南大學修復重建外科研究所實驗室完成.采集正常自愿獻髓者骨髓,淋巴細胞分離液體離心純化分離后利用免疫磁珠分離出STRO-1^+細胞,研究...
免疫磁珠法分離,并培養(yǎng)人腦膠質(zhì)瘤干細胞的方法.方法將術中取得的腦膠質(zhì)瘤標本,通過剪切,消化和吹打成單細胞懸液,篩網(wǎng)過濾,免疫磁珠分選試劑盒分選出CD133^+細胞,用神經(jīng)干細胞無血清培養(yǎng)法培養(yǎng)出具有單細胞克隆能力的細胞球,取第3代進行誘導分化,分化前后用免疫細...
免疫磁性細胞分選系統(tǒng)分離純化骨髓衍生肝干細胞亞群c-Kit^+lin^-。方法:實驗于2006—07/08在南方醫(yī)科大學實驗動物中心完成。6~8周齡的SPF級純系BALB,C雄性小鼠10只,體質(zhì)量18~20g。收集小鼠股骨骨髓細胞,利用免疫磁性細胞分選系統(tǒng),通...
免疫磁珠分離成人骨髓中STRO-1^+陽性細胞,獲得同質(zhì)性骨髓基質(zhì)干細胞.方法:實驗于2004-06/2005-06在東南大學修復重建外科研究所實驗室完成.采集正常自愿獻髓者骨髓,淋巴細胞分離液體離心純化分離后利用免疫磁珠分離出STRO-1^+細胞,研究...
小鼠脾臟CD8+T細胞的免疫磁珠負性分選方法,并對分選后所得細胞進行純度、活力及功能檢測.方法以免疫磁珠負性分選法從小鼠脾臟細胞中分離CD8+T細胞,流式細胞術檢測所得細胞的純度,臺盼藍檢測細胞活力并用ConA刺激檢測增殖能力.結果經(jīng)過流式細胞儀測定免疫磁珠負...
免疫磁珠(Immunomagneticbeads,IMB),是由載體微球和免疫配基結合而成的一種納米級材料.免疫磁珠分離技術是以高均一性的磁性微球為固相支持物,將免疫配基(如抗體,抗原等)通過功能基團結合到磁性載體上形成免疫磁性微球,利用特異性的免疫學反應,在...