這幾種方法盡管都不是檢測DNA合成的,但被用于替代[3H]thymidine摻入法。CFDASE法(C0051、C1031)基于細(xì)胞熒光示蹤的原理能檢測到單個(gè)的增殖細(xì)胞,但由于每增殖一次熒光減弱一半,在熒光顯微鏡下較難區(qū)分熒光減弱一半的細(xì)胞,檢測靈敏度不是很高...
來源:ZSCI基礎(chǔ)研究中如果加入動物實(shí)驗(yàn)部分則使得研究更加趨于完善,投稿時(shí)中稿率也相應(yīng)會增加。但將動物實(shí)驗(yàn)做好卻不是一件容易的事情。這篇文章主要講動物模型的構(gòu)建技術(shù),把骨科、糖尿病相關(guān)的動物模型構(gòu)建做了一個(gè)***的技術(shù)匯總,建議先碼后讀,文章內(nèi)容有部分做了簡化...
細(xì)胞的固定和通透(a)每孔加入150ul4%多聚甲醛細(xì)胞固定液,室溫培養(yǎng)30分鐘,棄固定液;(b)毎孔加入150ul2mg/ml甘氨酸,搖床孵育5分鐘,以中和過量的多聚甲醛;(c)棄甘氨酸溶液,每孔加入300ulPBS洗液,室溫清洗5分鐘;(d)每孔加入300...
該方法無需DNA變性,無需抗原修復(fù),無需抗原抗體反應(yīng),簡單、靈敏、快速、準(zhǔn)確,適合各種細(xì)胞系的細(xì)胞增殖檢測,尤其適用于各種細(xì)胞系的高通量篩選實(shí)驗(yàn),如在藥物篩選中檢測加藥后細(xì)胞增殖變化。EdU方法無需DNA變性,完全適用于各種顯微成像技術(shù),在10X,20X,40...
Jurkat細(xì)胞只用EdU標(biāo)記(左列),或在標(biāo)記EdU0min用10mM的DNA合成抑制劑羥基脲(Hydroxyurea)處理(右列),2小時(shí)后染色,然后通過流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測。從流式結(jié)果圖中可以看出,EdU標(biāo)記的細(xì)胞有較高比例的綠色熒光陽性細(xì)胞,...
本試劑盒小包裝C0085S如果用于培養(yǎng)的細(xì)胞(6孔板)的檢測,可以檢測50個(gè)樣品,每個(gè)樣品的反應(yīng)體系為500μl的Click反應(yīng)液;如果用于96孔板檢測,可以檢測500個(gè)樣品,每個(gè)樣品的檢測體系為50μl的Click反應(yīng)液;如果用于12孔、24孔、48孔或38...
該模型能夠幫助我們研究pirb基因在免疫系統(tǒng)和神經(jīng)系統(tǒng)的功能以及下游的調(diào)節(jié)機(jī)制。本發(fā)明的另一目的在于提供上述小鼠動物模型的構(gòu)建方法。本發(fā)明所采用的第一種技術(shù)方案是:pirb基因敲入的小鼠動物模型,包括確定pirb基因的待敲入的特異性靶位點(diǎn)grna1和grna2...
更準(zhǔn)確--無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免變性帶來的樣品損傷,確保細(xì)胞核邊緣清晰完整;更簡單--無需抗原抗體反應(yīng),基于小分子化學(xué)反應(yīng)的檢測方法,簡單高效,反應(yīng)單需要幾分鐘;更靈敏--無需抗體,檢測染料單為BrdU抗體的1/500,更容易擴(kuò)散,即...
特發(fā)性肺纖維化模型小鼠(右)相對于對照組小鼠肺部組織MASSON染色對比(4周)5.急性肺損傷模型急性肺損傷(acutelunginjury,ALI)是各種直接和間接致傷因素導(dǎo)致的肺泡上皮細(xì)胞及內(nèi)皮細(xì)胞損傷,造成彌漫性肺間質(zhì)及肺泡水腫,導(dǎo)致的急性低氧性呼吸功能...
EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒通過基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應(yīng),把熒光集團(tuán)標(biāo)記到新合成的含有EdU的DNA上面,這樣就可以進(jìn)行高效快速的檢測出DNA復(fù)制活性,廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長與發(fā)育、DNA損傷修復(fù)等方面的研究。傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)...
該產(chǎn)品是采用成像檢測方法對貼壁細(xì)胞進(jìn)行檢測,適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細(xì)胞可在孵育EdU后進(jìn)行細(xì)胞涂片處理,固定后再采用貼壁細(xì)胞的染色流程進(jìn)行檢測。也可以應(yīng)用于流式細(xì)胞儀檢測。能夠在細(xì)胞增殖時(shí)期代替胸腺嘧啶(T)摻入正在復(fù)制的DNA分子中,通...
EdU(5-溴-2-脫氧尿嘧啶)試劑盒是一種嘧啶類似物,可以在DNA合成期整合入DNA雙鏈。通過以上原理圖的對比,大家不難發(fā)現(xiàn),EdU法檢測細(xì)胞增殖,無須抗體,無變性步驟,保持細(xì)胞形態(tài)和DNA完整性,是一種簡單,可靠,省事的創(chuàng)新方法。但是,現(xiàn)在依然有很多研究者...
即為本發(fā)明構(gòu)建的一種pirb基因敲入的小鼠動物模型。本發(fā)明所采用第二種技術(shù)方案的特點(diǎn)還在于,步驟1中得到grna1和grna2后分別與trancrrna在25℃孵育10min形成二級結(jié)構(gòu)。步驟3中g(shù)rna1、grna2的濃度均為2~10pmol/ul,cas9...
細(xì)胞增殖是生活細(xì)胞的重要生理功能之一,是生物體的重要生命特征。細(xì)胞的增殖是生物體生長、發(fā)育、繁殖以及遺傳的基礎(chǔ)。方式:真核生物的分裂依據(jù)過程不同有三種方式,有有絲分裂,無絲分裂,減數(shù)分裂。其中有絲分裂是人、動物、植物、等一切真核生物中的一種為普遍的分裂方式,是...
以及酶或熒光偶聯(lián)二抗,檢測單細(xì)胞水平的DNA合成(BrdUbased)。前者通過免疫熒光檢測,后者通過熒光顯微鏡檢測。優(yōu)點(diǎn)是:使用核酸酶變性DNA,在不傷害細(xì)胞完整性的情況下使抗體結(jié)合BrdU。體內(nèi)外均可進(jìn)行標(biāo)記,且可同時(shí)使用其他標(biāo)記進(jìn)行檢測,操作安全簡便。適...
其可與dna鏈交叉連接,顯示出細(xì)胞毒作用。溶解后在體內(nèi)無需載體轉(zhuǎn)運(yùn),即可通過帶電的細(xì)胞膜。由于細(xì)胞內(nèi)氯離子濃度低(4mmol/l),氯離子為水所取代,電荷呈陽性,具有類似烷化劑雙功能基團(tuán)的作用,可與細(xì)胞核內(nèi)dna的堿基結(jié)合,形成三種形式的交聯(lián),造成dna損傷,...
有助于更地認(rèn)識疾病的本質(zhì)臨床研究未免帶有一定的局限性。已知很多病身體除人以外也能引起多種動物,其表現(xiàn)可能各有特點(diǎn)。通過對人畜共患病的比較研究,可以充分認(rèn)識同一病原體(或病因)對不同機(jī)體帶來的各種損害。因此從某種意義上說,可以使研究工作升畢到立體的水平來揭示某種...
該產(chǎn)品是采用成像檢測方法對貼壁細(xì)胞進(jìn)行檢測,適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細(xì)胞可在孵育EdU后進(jìn)行細(xì)胞涂片處理,固定后再采用貼壁細(xì)胞的染色流程進(jìn)行檢測。也可以應(yīng)用于流式細(xì)胞儀檢測。能夠在細(xì)胞增殖時(shí)期代替胸腺嘧啶(T)摻入正在復(fù)制的DNA分子中,通...
本能發(fā)明的另一目的是公開了如上所述的方法制備的鼠慢性背根神經(jīng)壓迫模型的用途是將該模型用于腰椎間盤突出***方法研究和/或影像學(xué)檢測研究。進(jìn)一步地,該模型用于與磁性相關(guān)的***和/或檢測方面的研究,比如經(jīng)顱磁刺激和核磁共振。本發(fā)明利用壓迫元件插入腰椎椎間孔,模擬...
pcrmix:反應(yīng)條件:pcr擴(kuò)增產(chǎn)物的電泳鑒定結(jié)果如圖3所示,從圖3中可以看出,6、8、9號為pirb基因敲入小鼠在、,wt小鼠pcr產(chǎn)物沒有這兩個(gè)擴(kuò)增產(chǎn)物。(c)短鏈pcr反應(yīng),引物如下:primers(℃):forwardprimer(f4):5’-aa...
用PBS沖洗沉淀物,然后用Diff-Quik染色液染色,在光學(xué)顯微鏡下進(jìn)行細(xì)胞分類,觀察計(jì)數(shù)計(jì)數(shù)中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞。5.2.4肺損傷后的組織病理觀察:取左肺4%多聚甲醛固定,然后將肺組織常規(guī)脫水,石蠟包埋,切片(厚度為5μm),HE染色。HE染色肺...
該產(chǎn)品是采用成像檢測方法對貼壁細(xì)胞進(jìn)行檢測,適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細(xì)胞可在孵育EdU后進(jìn)行細(xì)胞涂片處理,固定后再采用貼壁細(xì)胞的染色流程進(jìn)行檢測。也可以應(yīng)用于流式細(xì)胞儀檢測。能夠在細(xì)胞增殖時(shí)期代替胸腺嘧啶(T)摻入正在復(fù)制的DNA分子中,通...
上海東寰生物科技有限公司即核苷滲入法。以前常用的核苷滲入法是BrdU(胸腺嘧啶核苷酸類似物)法,但BrdU法的缺點(diǎn)是需要變性DNA后才能與抗體結(jié)合,導(dǎo)致了DNA雙鏈結(jié)構(gòu)的破壞,影響了其他染料的結(jié)合染色,導(dǎo)致染色彌散,準(zhǔn)確性降低等問題。EdU法作為新型的核苷滲入...
通過基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應(yīng),把熒光集團(tuán)標(biāo)記到新合成的含有EdU的DNA上面,這樣就可以進(jìn)行高效快速的檢測出DNA復(fù)制活性,廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長與發(fā)育、DNA損傷修復(fù)等方面的研究。EdU標(biāo)記(a)將細(xì)胞完全培養(yǎng)基中按照500:1的比例...
1、動物模型名稱:高脂飼料致高脂血癥大鼠模型2、實(shí)驗(yàn)動物種屬:SD大鼠3、實(shí)驗(yàn)動物性別:雄性4、實(shí)驗(yàn)動物年齡:成年5、實(shí)驗(yàn)動物體重:180~220g1、實(shí)驗(yàn)方法:大鼠給予高脂飼料喂養(yǎng)20天。分別于造模前和造模20天,測定血清中TC、TG、HDL-C、LDL-C...
快速—–無需過夜,省卻抗原抗體反應(yīng)。整個(gè)檢測過程只需 2.5 小時(shí),縮短實(shí)驗(yàn)周期。準(zhǔn)確—–標(biāo)記率高且無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免變性帶來的樣品損傷,確保細(xì)胞核邊緣清晰完。靈敏—–無需抗體,檢測染料為BrdU抗體的1/500,更容易擴(kuò)散,即使...
技術(shù)領(lǐng)域:本發(fā)明屬于遺傳學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域,具體涉及pirb基因敲入的小鼠動物模型,還涉及上述小鼠動物模型的構(gòu)建方法。背景技術(shù):鼠源成對免疫球蛋白樣受體b(pairedimmunoglobulin-likereceptorb,pirb),是人類免疫球蛋白樣受體b...
1、動物模型名稱:低鐵飼料聯(lián)合放血致缺鐵性貧血大鼠模型2、實(shí)驗(yàn)動物種屬:SD大鼠3、實(shí)驗(yàn)動物性別:雌性4、實(shí)驗(yàn)動物年齡:初斷乳5、實(shí)驗(yàn)動物體重:50~70g6、實(shí)驗(yàn)動物環(huán)境:SPF級1、實(shí)驗(yàn)方法:低鐵飼料聯(lián)合放血法誘導(dǎo)。SD大鼠每天給予低鐵飼料和超純水飼養(yǎng),并...
保存條件:-20℃保存,一年有效。BiotinAzide、DAB顯色液A和DAB顯色液B須避光保存。注意事項(xiàng):ClickAdditive配制成溶液后請注意適當(dāng)分裝。如果溶解后有白色物質(zhì)析出,請上下顛倒多次,待全部溶解后使用。如果該溶液顏色變成棕色,說明該組分的...
該產(chǎn)品是采用成像檢測方法對貼壁細(xì)胞進(jìn)行檢測,適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細(xì)胞可在孵育EdU后進(jìn)行細(xì)胞涂片處理,固定后再采用貼壁細(xì)胞的染色流程進(jìn)行檢測。也可以應(yīng)用于流式細(xì)胞儀檢測。建議染色完成后立即進(jìn)行熒光顯微鏡拍照觀察;如果條件限制,請于4°C...