納米顆粒遞送藥物并發(fā)揮功能的能力在很大程度上取決于它們被細胞攝取的機制。以蒲公英湯劑體為例，研究發(fā)現(xiàn)親溶酶體物質能***抑制蒲公英湯劑體進入細胞；巨胞飲抑制劑細胞松弛素D和阿米洛利能***降低蒲公英湯劑體的胞內攝入，且呈現(xiàn)劑量依賴性，敲減Rac1和PAK1也有效地抑制其進入細胞。這些結果提示蒲公英湯劑體通過內吞進入A549細胞且主要由巨胞飲介導26。同理，RNA轉染試劑在某些情況下也可能利用巨胞飲途徑進入細胞。電穿孔轉染中的內吞途徑電穿孔轉染是一種用于基因遞送的技術，在研究其機制時發(fā)現(xiàn)，用冰冷介質處理或在電穿孔轉染前使用內吞抑制劑處理三種不同的人類細胞系（HEK293、HCT116和HT29）。結果表明，用冰冷介質、氯丙嗪或染料木黃酮處理會***降低所有三種細胞系的電穿孔轉染效率，但阿米洛利處理對電穿孔轉染效率影響不***。對于用小干擾RNA（siRNA）處理的細胞，只有敲低網(wǎng)格蛋白重鏈（CLTC）會導致所有三種細胞系的電穿孔轉染效率降低。這些數(shù)據(jù)表明，網(wǎng)格蛋白介導的內吞作用在電穿孔轉染中起著重要作用27。轉染是將外源核酸送入細胞的過程，其目的是使外源基因編碼的蛋白能夠在細胞中表達。江蘇懸浮細胞轉染試劑

    核細胞、關節(jié)軟骨細胞、間充質干細胞（MSCs）：選擇兩種合成轉染試劑（陽離子脂質商業(yè)試劑LipofectamineRNAiMAX和聚乙烯亞胺（PEI））以及兩種天然衍生轉染試劑（多糖殼聚糖（98%脫乙?；┖屯该髻|酸（20%酰胺化）），用于將siRNA遞送到包括髓核細胞、關節(jié)軟骨細胞和間充質干細胞在內的原代間充質細胞中。以甘油醛-3-磷酸脫氫酶（***DH）作為內源性模型基因，在轉染后第3天和第6天評估由20nM或200nMsiRNA引起的沉默程度。除了沉默效率外，還評估了細胞毒性、DNA含量變化和細胞分化潛能等非特異性影響。在四種轉染試劑中，基于商業(yè)脂質體的試劑在20nMsiRNA時是**有效的siRNA遞送試劑，其次是殼聚糖。使用陽離子脂質體、殼聚糖和PEI轉染顯示出不同程度的活力和DNA含量下降，這取決于所評估的siRNA劑量和細胞類型，但與***DH敲低無關。一些對DNA含量的影響并不伴隨著活力的相應變化。然而，細胞周期抑制或進展的標記基因（如p21和PCNA）的表達變化不能解釋DNA含量的變化。有趣的是，發(fā)現(xiàn)了***DH活性的非特異性上調，這***于軟骨細胞15。肝*細胞HepG2和：比較兩種人類細胞模型中兩種轉染劑，即基于脂質體的Lipofectamine?RNAiMAX和基于聚合物的GenMute?。 合肥轉染試劑指導南京星葉生物正是利用將核酸封裝在納米級脂質體囊泡中的技術，開發(fā)出了Gemate系列轉染試劑。

魚精蛋白作為RNA遞送穩(wěn)定劑具有重要作用，其具體作用機制主要包括以下幾個方面：一、保護RNA免受降解魚精蛋白是一種天然陽離子肽混合物，由于其帶正電荷的特性，可以與帶負電荷的RNA通過相反電荷驅動耦合23。在生物系統(tǒng)中，RNA很容易被RNase降解，而魚精蛋白可以與RNA復合，形成穩(wěn)定的復合物，從而保護RNA免受降解1213。例如，通過將單鏈RNA（ssRNA）與帶正電荷的蛋白魚精蛋白復合，可以穩(wěn)定陰離子RNA1213。二、增強細胞穿透性魚精蛋白不僅可以保護RNA，還能增強RNA的穿透細胞的能力。魚精蛋白-RNA復合物的形成具有雙重功能，一方面保護RNA不被降解，另一方面增強其穿透進入細胞的能力23。這種增強的細胞穿透性可能是由于魚精蛋白的陽離子性質，使其能夠與細胞膜相互作用，促進RNA的進入細胞2。

RNA電穿孔高效轉染原代淋巴細胞：使用體外轉錄的mRNA通過電穿孔可以實現(xiàn)高基因轉染效率和低轉染相關毒性。例如，在用GFP或mCD62L轉染的受激原代人和鼠T淋巴細胞中觀察到90％以上的轉基因表達和80％以上的活細胞。GFPRNA對未刺激的人PBMC或鼠脾細胞進行電穿孔，分別產生95％和56％的GFP?細胞。此外，基因表達迅速且持久，對經(jīng)過RNA電穿孔的T淋巴細胞未觀察到不良影響7。五、優(yōu)化共轉染方法整合共轉染和平行共轉染：研究不同的共轉染和連續(xù)轉染方法，特別是體外轉錄信使RNA（IVTmRNA）。對于在納米載體形成之前預混合的IVTmRNAs（整合共轉染）和同時用單獨形成的納米載體轉染細胞（平行共轉染），分析決定共轉染效率的定量參數(shù)。同時遞送siRNA和mRNA也表明整合方法的比較高共轉染效率，但由于兩個**運營實體的峰值輸出在動力學上不同，連續(xù)交付的效率比較高?；瘜W轉染的效率可能取決于幾個因素，如使用的試劑類型、靶細胞的來源和性質，以及選擇的DNA與試劑比例。

開發(fā)新型動物搖籃可以實現(xiàn)小動物的多重成像，提高成像效率。開發(fā)新型動物搖籃的小動物多重成像方式：采集和評估高通量多鼠成像：KimHunnyun、ImGeunHo和YoonYeup開發(fā)了一種可以修改和調整以適應多種成像模型的新型動物搖籃4。與以往只能成像一只小鼠的搖籃不同，這個新的搖籃可以同時成像四只小鼠，還可以獲取具有PET/MRI和PET/CT圖像的高吞吐量多鼠成像的融合圖像。通過將PET動態(tài)成像技術應用于高吞吐量MMI方法，還可以同時獲取動態(tài)腦圖像。七、紅外成像技術在畜牧業(yè)中的應用紅外成像技術在畜牧業(yè)中具有廣泛的應用前景。Infraredimaginganewnon-invasivemachinelearningtechnologyforanimalhusbandry：ManaseeChoudhury、TulikaSaikia和SantanuBanik介紹了紅外成像技術在畜牧業(yè)中的應用5。紅外熱成像技術因其非侵入性、易于自動化和高靈敏度等特點，在動物疾病檢測和緩解方面的應用越來越***。該技術可以確認***動物身體部位溫度的升高，還可用于檢測排卵、雄性生育力、應激水平、肉質、種群規(guī)模等。由于其易于操作，可以作為疾病診斷的**篩查工具，但仍需要進一步研究以獲得更準確的診斷結果。影響物理轉染或機械轉染效率的因素在很大程度上取決于這些方法的基本原理。浙江武漢轉染試劑

由于CRISPR/Cas的發(fā)現(xiàn)，基因組編輯領域經(jīng)歷了一場變革。江蘇懸浮細胞轉染試劑

考慮細胞毒性低細胞毒性的轉染試劑對于保持細胞的活性和正常生理功能至關重要。評估細胞活力：可以通過檢測細胞的存活率、增殖能力等指標來評估轉染試劑的細胞毒性。在研究不同轉染試劑對C2C12細胞的轉染效率時，通過優(yōu)化DNA:轉染劑比例和細胞密度，使所有試劑在達到較高轉染效率的同時，對細胞生長和活力的影響有限6。在比較不同轉染試劑遞送siRNA的攝取、敲低效率和毒性情況的研究中，新開發(fā)的CALNPRNAi轉染試劑轉染效率***高于傳統(tǒng)轉染試劑，同時毒性比較低7。選擇溫和的試劑：一些轉染試劑可能對細胞的毒性較小，例如基于脂質的轉染試劑通常比基于病毒的轉染試劑更溫和。在顱內遞送合成mRNA的研究中，使用常用的轉染試劑將合成mRNA遞送至小鼠大腦，結果表明該模型中合成mRNA可以成功遞送至大腦，且沒有可測量的毒性8。江蘇懸浮細胞轉染試劑