方法:使用兩種已知濃度的質(zhì)控乳膠珠溶液,1份濃度為(35±5)×106/ml,另1份濃度為(18.0±2.5)×106/ml,評(píng)價(jià)4種計(jì)數(shù)方法的準(zhǔn)確性和精確性,并比較4種方法計(jì)數(shù)精液的結(jié)果。結(jié)果:計(jì)數(shù)乳膠珠時(shí),CellVU計(jì)數(shù)池的結(jié)果**接近已知濃度,分別為(39.70±4.76)、(19.09±2.02)×106/ml,變異系數(shù)(CV)值分別為12.80%和10.58%;血細(xì)胞計(jì)數(shù)池和Makler計(jì)數(shù)池結(jié)果均高于已知濃度,前者為(44.84±4.86)×106/ml、(21.04±1.87)×106/ml,CV值分別為10.81%和8.89%,后者為(52.36±7.78)×106/ml、(24.54±3.67)×106/ml,CV值分別為14.86%和14.96%;CASA系統(tǒng)結(jié)果低于已知濃度,為(28.53±2.06)、(14.62±0.95)×106/ml,但CV值比較低,分別為7.22%和6.50%。計(jì)數(shù)精液時(shí),CellVU計(jì)數(shù)池與CASA系統(tǒng)結(jié)果差異無(wú)***性(P=0.71),分別為(45.28±34.52)、(41.96±31.93)×106/ml,血細(xì)胞計(jì)數(shù)池和Makler計(jì)數(shù)池結(jié)果差異無(wú)***性(P=0.14),分別為(76.98±59.90)、(63.89±53.84)×106/ml,CellVU計(jì)數(shù)池、CASA系統(tǒng)與血細(xì)胞計(jì)數(shù)池、Makler計(jì)數(shù)池結(jié)果間差異***(P<0.05或P<0.01)。結(jié)論:計(jì)數(shù)精液時(shí),CASA系統(tǒng)與CellVU計(jì)數(shù)結(jié)果差異無(wú)***性。各實(shí)驗(yàn)室可選擇合適的手工或CASA計(jì)數(shù)方法。精子分析儀因其高效、J準(zhǔn)的特點(diǎn),已經(jīng)在眾多醫(yī)療機(jī)構(gòu)中廣泛應(yīng)用,深受患者信賴(lài)。上海前向運(yùn)動(dòng)精子分析精確溫度控制
HamiltonThorneIVOS是一套整合了光學(xué)觀察系統(tǒng)的精子動(dòng)力分析儀。如今,IVOS已成為快速、準(zhǔn)確、穩(wěn)定可靠的進(jìn)行精子分析的代名詞。儀器特點(diǎn):新款內(nèi)建CDWriter!內(nèi)部整合光學(xué)系統(tǒng)自動(dòng)化,內(nèi)置樣品臺(tái)可用于多種樣品分析儀器操作簡(jiǎn)單提供滿(mǎn)足需求的分析結(jié)果實(shí)時(shí)質(zhì)量控制分析結(jié)果列表內(nèi)部整合的光學(xué)系統(tǒng)IVOS是***一套內(nèi)置光學(xué)系統(tǒng)的精子動(dòng)力分析儀。與其它同類(lèi)產(chǎn)品相比,IVOS并不采用顯微鏡持續(xù)照明方式,而是采用閃光拍攝方法。這種拍攝方法能夠消除由于精子運(yùn)動(dòng)而造成的位置模糊。通過(guò)60禎/秒的拍攝速度,能夠得到準(zhǔn)確可靠的精子速度和運(yùn)動(dòng)參數(shù)分析結(jié)果。IVOS可在以下三種模式下分析精子樣品:相差,明場(chǎng)和多波長(zhǎng)熒光模式。自動(dòng)化內(nèi)置加熱平臺(tái)作為整合光學(xué)系統(tǒng)的一部分,由計(jì)算機(jī)控制的IVOS樣品平臺(tái)可在分析時(shí)提供準(zhǔn)確的溫度控制和位置定位。樣品臺(tái)的溫度可在室溫到40°C范圍內(nèi)調(diào)節(jié),穩(wěn)定度為0.5°C。分析區(qū)域的選擇可選用自動(dòng)或手動(dòng)方式。樣品臺(tái)的溫度和位置可實(shí)時(shí)顯示在視頻窗口中。IVOS還允許用戶(hù)自己進(jìn)行分析室設(shè)定,控制分析樣品量。上海CASA精子分析BCFHamilton Thorne精子分析儀采用先進(jìn)的光學(xué)成像,能夠?qū)崟r(shí)分析精子的動(dòng)力學(xué)參數(shù),提供有效的精子質(zhì)量評(píng)估。
精子計(jì)數(shù)是在顯微鏡下計(jì)算一次排出的精液中精子的數(shù)量將精子計(jì)數(shù)值乘以精液量就可得出一次**的量。精液液化后將樣本按一定比例稀釋和固定后,滴于血細(xì)胞計(jì)數(shù)板上,在顯微鏡下計(jì)數(shù)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)區(qū)內(nèi)的所有精子數(shù)并換算為每m1內(nèi)所含精子數(shù)。此外還可用電子細(xì)胞計(jì)數(shù)儀經(jīng)調(diào)整閾值設(shè)置后計(jì)數(shù)精子數(shù)量。將已經(jīng)液化的精液標(biāo)本均勻混合,用白細(xì)胞計(jì)數(shù)吸管吸精液至0.5刻度,再吸稀釋液至11刻度,振蕩三分鐘,然后置于血球計(jì)數(shù)板內(nèi),計(jì)數(shù)二大格(每格面積1平方毫米)之精子數(shù),在尾數(shù)后加5個(gè)“0”即得每毫升精液內(nèi)精子數(shù)。例如計(jì)數(shù)為1280個(gè),則每毫升精子應(yīng)為128,000,000。精液稀釋液之配制:重碳酸鈉5克、福爾馬林1毫升、蒸餾水加至100毫升。稀釋液內(nèi)重碳酸鈉有消化粘液的作用,福爾馬林有使精子制動(dòng)的作用。如精液之稠度過(guò)高而不易吸取時(shí),可以精液1毫升混勻于稀釋液19毫升內(nèi),稀釋后進(jìn)行計(jì)數(shù)。如精子的數(shù)目極少,亦可改為稀釋10倍計(jì)數(shù)。每次排精75%的精子是從附睪尾部所貯存的,還有25%是由輸精管道的其他部分來(lái)的,因此單憑一次排精的精子計(jì)數(shù)來(lái)衡量睪丸生精機(jī)能是不***的。只有在排精后間隔4-5天以后多次精液檢查,才能比較正確地從這些精子計(jì)數(shù)來(lái)反映睪丸的生精機(jī)能。
CASA,即計(jì)算機(jī)輔助精子分析,是一種利用技術(shù)手段對(duì)精子活力、濃度和形態(tài)進(jìn)行精確評(píng)估的方法。WHO第五版指南強(qiáng)調(diào),相比人工檢測(cè),CASA提供更準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)和精子動(dòng)力學(xué)參數(shù),如前向運(yùn)動(dòng)和超活化運(yùn)動(dòng),以及獲能精子特征參數(shù)。研究顯示,CASA檢測(cè)的精子參數(shù)與體內(nèi)外受精成功率和受孕時(shí)間有***關(guān)聯(lián)。使用CASA分析儀,通常通過(guò)相差顯微鏡識(shí)別活動(dòng)精子,適用于精子動(dòng)力學(xué)分析。但要確??煽拷Y(jié)果,操作者需注意標(biāo)本制備、幀頻率、精子濃度等因素。每份樣本至少需要分析200個(gè)活動(dòng)精子的運(yùn)動(dòng)軌跡,更多精子樣本有助于分類(lèi)和變異性的分析。國(guó)內(nèi)已有自主研發(fā)的精子分析儀,通常進(jìn)行兩次分析,每次至少200個(gè)精子,結(jié)果通過(guò)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析得出。CASA在評(píng)估精子濃度時(shí),需精確測(cè)量精子體積,確保**完全液化并充分混勻。計(jì)數(shù)板的精確性和計(jì)數(shù)一致性是關(guān)鍵,每次檢測(cè)需滿(mǎn)足5個(gè)視野和200條以上精子的比較低要求。對(duì)于高濃度**,可能需要稀釋以減少誤差。形態(tài)分析方面,CASA能夠定量評(píng)估精子頭部、中段和主段,尾部缺陷可通過(guò)活力評(píng)估。對(duì)于碎片過(guò)多或黏稠的**,可能需要洗滌以減少背景干擾。CASA中涉及一系列術(shù)語(yǔ),如VCL(曲線速度)、VSL(直線速度)等,它們反映了精子運(yùn)動(dòng)的不同特性。HAMILTON THORNE精子分析儀可分析參數(shù),擺動(dòng)性(WOB)?:實(shí)際的曲線路徑關(guān)于平均路徑的擺動(dòng)值。
精子分析儀使用方法儀器的使用方法因型號(hào)、廠家差異不盡相同,操作人員上崗前必須經(jīng)過(guò)嚴(yán)格培訓(xùn),了解工作原理、操作規(guī)程、校正方法等,使用前必須仔細(xì)閱讀說(shuō)明書(shū)。一般儀器都會(huì)經(jīng)歷如下操作步驟[1]:開(kāi)機(jī)接通電源,打開(kāi)計(jì)算機(jī)輔助**分析系統(tǒng)。1.輸入患者信息及**理學(xué)檢查結(jié)果。2.加樣取液化的**1滴,滴入精子計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)池中,置顯微鏡操作平臺(tái)上,點(diǎn)擊“活動(dòng)顯示”菜單,調(diào)節(jié)好顯微鏡焦距,顯示器上即可顯示待測(cè)標(biāo)本的精子運(yùn)動(dòng)圖像。3.分析點(diǎn)擊“計(jì)算分析”菜單,系統(tǒng)進(jìn)入自動(dòng)分析狀態(tài),圖像顯示區(qū)出現(xiàn)精子分割圖像并進(jìn)行分析。4.打印報(bào)告分析結(jié)束后,可根據(jù)需要打印出分析結(jié)果。該設(shè)備還具備良好的售后服務(wù),Hamilton Thorne公司提供培訓(xùn)和技術(shù)支持,確保用戶(hù)能夠充分利用設(shè)備的功能。上海前向運(yùn)動(dòng)精子分析精確溫度控制
精子分析,直線速率(VSL)?:精子頭在開(kāi)始檢測(cè)時(shí)的位置與終止所處位置之間的直線運(yùn)動(dòng)的時(shí)均速率。上海前向運(yùn)動(dòng)精子分析精確溫度控制
醫(yī)生處置質(zhì)量是指診斷質(zhì)量?是以當(dāng)今醫(yī)學(xué)科學(xué)知識(shí)、技術(shù)為基礎(chǔ)依據(jù)癥狀來(lái)完成的。CASA系統(tǒng)可以為醫(yī)生提供優(yōu)于傳統(tǒng)精子分析的手段和快速準(zhǔn)確的分析結(jié)果[5]。CASA在醫(yī)生處置質(zhì)量方面的特點(diǎn)在于:①當(dāng)CASA系統(tǒng)的參數(shù)設(shè)定和樣品的處理方式(溫度、稀釋法、緩沖液)確定時(shí)?通過(guò)個(gè)體內(nèi)和個(gè)體間的比較?CASA的精子活力重復(fù)性明顯好于直觀評(píng)估[6]。②實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)資料是質(zhì)量的一部分?CASA系統(tǒng)所有數(shù)據(jù)都是直接在線獲得的?因此明顯優(yōu)于其他方法[6]?記錄傳遞到數(shù)據(jù)庫(kù)的過(guò)程無(wú)錯(cuò)誤發(fā)生?可清楚準(zhǔn)確地打印出結(jié)果。所有的數(shù)據(jù)可直接轉(zhuǎn)換到數(shù)據(jù)庫(kù)、能夠?qū)?**前和***后測(cè)定的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)比較[9]、質(zhì)量控制數(shù)據(jù)的采集與保存、每天的標(biāo)本測(cè)試記錄以及許多其他報(bào)告等等?如此大量數(shù)據(jù)的處理只有在計(jì)算機(jī)中才能完成。但是CASA系統(tǒng)的參數(shù)設(shè)定也許限制了其質(zhì)量?特別是在精子形態(tài)學(xué)檢查中?通過(guò)CASA系統(tǒng)對(duì)精子形態(tài)學(xué)特征進(jìn)行分析[7]?這些特征(細(xì)胞大小、形狀、光學(xué)密度、尾的存在以及其它)可由操作者選擇?這樣就會(huì)引起同一標(biāo)本在不同實(shí)驗(yàn)室或不同分析者測(cè)得的結(jié)果一致性較差[8]。就形態(tài)學(xué)分析而言?傳統(tǒng)方法的可變性遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于CASA分析。上海前向運(yùn)動(dòng)精子分析精確溫度控制