COIP常見問題及對策
1：如何提高抗體與磁珠結(jié)合效率?
磁珠與抗體的結(jié)合效率與抗體的種屬來源及所屬亞型有關(guān)，請確 認(rèn)抗體的類型與 Protein A/G 配基的親和效率。如抗體所屬亞型與 Protein A/G的親和度較低，可以通過增加抗體與磁珠的孵育時間（ 30～120min）、提高結(jié)合緩沖液的pH值（8～9）及降低離子強度（ 25～100mM NaCl）等方法提高親和效率。
2：如何提高磁珠在免疫沉淀反應(yīng)中的特異性?
可以先將抗體與樣品進行孵育，形成抗體-抗原復(fù)合物，再用 Protein A/G磁珠捕獲復(fù)合物。這種方法可以提高抗體與抗原的結(jié)合效 率，并降低磁珠與樣品接觸的時間，從而提高沉淀產(chǎn)物的特異性。對 于蛋白質(zhì)/核酸共沉淀或染色質(zhì)免疫共沉淀也推薦使用此法。 免疫磁珠法分離膽囊CancerCD133陽性細(xì)胞及其生物學(xué)特性鑒定。江蘇protein A/G COIP免疫磁珠供應(yīng)商
免疫磁珠法(MACS)：免疫磁珠法是2O世紀(jì)80年代出現(xiàn)的技術(shù)方法。1983年Ugelstad提出將免疫磁珠用于細(xì)胞分選，1990年，Mihenyi建立了MACS。這一方法的**是在磁珠表面包被具免疫反應(yīng)性的抗體進行抗原抗體反應(yīng)，在細(xì)胞表面形成玫瑰花結(jié)，這些結(jié)合了磁珠的細(xì)胞一旦置于強大的磁場下，就會與其他未被結(jié)合的細(xì)胞分群，具***順磁場的磁珠脫離磁場后立即消失磁性，這樣就可以篩選或去除所標(biāo)記的細(xì)胞，從而達到陽性或陰性選擇細(xì)胞的目的。這一技術(shù)已經(jīng)***運用于細(xì)胞及分子生物學(xué)，分離基因、靶細(xì)胞及造血干細(xì)胞等。其分離效果得到了免疫熒光、PCR、FISH及FACS等方法的確認(rèn)。免疫磁珠可以有效地分選細(xì)胞，從而決定了這一方法在神經(jīng)干細(xì)胞分選中應(yīng)用的技術(shù)可行性。上海蛋白質(zhì)免疫共沉淀免疫磁珠送貨上門BEENbio ProteinA/G Co-IP&CHIP磁珠 蛋白相互作用。
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COIP 磁珠緩沖液匯總
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細(xì)胞裂解液
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正常RIPA 細(xì)胞裂解緩沖液(一般是公司購買)
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結(jié)合緩沖液binding buffer
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用RIPA 細(xì)胞裂解緩沖液代替
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洗滌緩沖液Washing buffer
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PBST(1*PBS + 1% Triton X-100)
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洗脫緩沖液Elution buffer
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直接加入1*蛋白loading buffer, 98oC 5 min后棄去磁珠后，收集上清液檢測。
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從白血病KG1a細(xì)胞中分選CD34+CD38-干細(xì)胞并研究其生物學(xué)特性.方法免疫磁珠法分選CD34+CD38-細(xì)胞,流式細(xì)胞術(shù)分析細(xì)胞表面膜抗原,細(xì)胞周期,甲基纖維素培養(yǎng)體系觀察其克隆性;以HL60,K562,CD34+CD38+細(xì)胞為對照,甲基偶氮唑藍法檢測柔紅霉素對CD34+CD38-細(xì)胞的抑制作用;BALB/c裸鼠皮下接種,觀察體內(nèi)成瘤能力.結(jié)果分選的CD34+CD38-細(xì)胞純度達95%以上,(69.03±3.25)%處于G0期,克隆形成率為(38.64±2.68)%,明顯抵抗柔紅霉素;不同濃度柔紅霉素作用后,CD34+CD38-,CD34+CD38+,HL60,K562細(xì)胞的活性差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F=961.136,P=0.000);CD34+CD38-在裸鼠皮下成瘤率***高于CD34+CD38+細(xì)胞(P〈0.05).結(jié)論免疫磁珠法分選白血病干細(xì)胞簡單易行,分選的細(xì)胞符合白血病干細(xì)胞生物學(xué)特性.BEENbio Anti Flag Co-IP&CHIP磁珠廠家直銷。
檢測EPCAM、MUC16兩種抗原在上皮性卵巢*循環(huán)腫瘤細(xì)胞中表達的相關(guān)性。方法分別用羧基磁珠制備EPCAM、MUC16兩種免疫磁珠,分3組:EPCAM免疫磁珠檢測組、MUC16免疫磁珠檢測組、2種磁珠均等混合檢測組。對來源于同一患者的等體積外周血樣本進行循環(huán)腫瘤細(xì)胞檢測,HE染色后鑒定檢測值。結(jié)果EPCAM免疫磁珠、MUC16免疫磁珠、EPCAM+MUC16免疫磁珠對同體積、同來源樣本檢測值分別為22±11、14±6、28±12個腫瘤細(xì)胞(P0.05),說明檢測效率有統(tǒng)計學(xué)差異。結(jié)論MUC16與EPCAM在上皮性卵巢*循環(huán)腫瘤細(xì)胞中**表達且存在差異,因此增加MUC16這一***標(biāo)志物可有效提高上皮性卵巢*CTCs檢出數(shù)量。用免疫磁珠法檢測抗白念珠*烯醇化酶抗體。安徽protein A/G COIP免疫磁珠性能
免疫磁珠純化人呼吸道合胞病毒F蛋白方法的建立。江蘇protein A/G COIP免疫磁珠供應(yīng)商
產(chǎn)品價格
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產(chǎn)品貨號
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規(guī)格
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價格
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BEENbio-PR004-0.4
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0.4 mL
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1150 RMB
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BEENbio -PR004-1
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1 mL
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1780 RMB
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BEENbio -PR004-5
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5 mL
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6825 RMB
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產(chǎn)品描述
BEENbio Anti Myc COIP磁珠在大小為2um的納米磁珠上供價結(jié)合了大量的小鼠Anti Myc 單克隆抗體，與傳統(tǒng)的Anti Myc COIP瓊脂糖凝膠比較，抗體結(jié)合能力相同，背景更低，由于采用磁性分離，使得每次COIP可以節(jié)省40%的時間。
產(chǎn)品特性
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項目
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特性
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抗體亞型
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鼠源IgG1
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抗體純化方法
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Protein A 純化制備
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適用范圍
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免疫共沉淀（IP），Myc tag蛋白純化
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推薦使用體積
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COIP: 500μl 細(xì)胞裂解液 使用 10μL磁珠
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融合蛋白結(jié)合容量
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大于1.1 mg Myc tagged protein/mL 磁珠
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儲存條件
4oC長期穩(wěn)定
使用說明
磁珠的準(zhǔn)備
重懸Anti Myc 免疫磁珠，取10 μL加入到500 μL TBS，洗滌3次，分離磁珠，棄上清。
樣品的結(jié)合（binding）
在上述沉淀中加入500 μL細(xì)胞裂解液，室溫緩慢孵育2小時或者4°C條件下過夜，分離磁珠，棄上清。
注意：結(jié)合過程中，磁珠可能會出現(xiàn)聚團或呈片狀，屬于正?，F(xiàn)象，不會影響實驗結(jié)果。
洗滌（washing）：0.5 mL TBS緩沖液洗滌四次，每次5min，分離磁珠，棄上清。
洗脫（elution）:上述所得沉淀中加 入50 μL 1×蛋白上樣緩沖液，煮沸5 min，冷卻后分離磁珠，吸取上清液，進行SDS-PAGE檢測。
江蘇protein A/G COIP免疫磁珠供應(yīng)商
上海普平生物科技有限公司是一家上海普平生物科技有限公司上海普平生物科技有限公司上海普平生物科技有限公司從事生物科技領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開發(fā)、技術(shù)咨詢、技術(shù)轉(zhuǎn)讓；實驗室設(shè)備、化工原料及產(chǎn)品的銷售；計算機軟件開發(fā)；計算機網(wǎng)絡(luò)工程；從事貨物及技術(shù)進出口業(yè)務(wù)。 的公司，是一家集研發(fā)、設(shè)計、生產(chǎn)和銷售為一體的專業(yè)化公司。普平生物擁有一支經(jīng)驗豐富、技術(shù)創(chuàng)新的專業(yè)研發(fā)團隊，以高度的專注和執(zhí)著為客戶提供科研試劑、耗材、儀器，納米脂質(zhì)體，細(xì)胞、分子、蛋白實驗，科研項目。普平生物繼續(xù)堅定不移地走高質(zhì)量發(fā)展道路，既要實現(xiàn)基本面穩(wěn)定增長，又要聚焦關(guān)鍵領(lǐng)域，實現(xiàn)轉(zhuǎn)型再突破。普平生物始終關(guān)注化工市場，以敏銳的市場洞察力，實現(xiàn)與客戶的成長共贏。