Ⅺ型膠原是異三聚體,其組成為α1(Ⅺ)α2(Ⅺ)α3(Ⅺ),Ⅺ型膠原是軟骨的微量成分,在軟骨膠原纖維的形成和軟骨基質(zhì)的組成中起著重要作用,且常與Ⅱ型膠原共存。陸生生物的軟骨組織較水生生物含量高的多,所以Ⅱ型膠原的研究的對象大多是陸生生物,雖然在1984年已經(jīng)從鯊魚的軟骨中分離出來Ⅱ型膠原,但是從水產(chǎn)動物提?、蛐湍z原的研究并不多。ⅩⅧ型膠原發(fā)現(xiàn)的相對較晚,同源性較高,還有不同的亞類,主要存在于肺、肝臟和腎臟等組織中。屬于被稱之為multi-plexin的特殊膠原亞族,含有其他膠原所沒有的C末端非三螺旋區(qū)(non-triple-heli-cal regions,NC1),這一特殊結(jié)構(gòu)使其與其他只由三螺旋結(jié)構(gòu)組成的膠原相比擁有更好的靈活性。ⅩⅧ型膠原的研究主要集中在醫(yī)學(xué)和分子生物學(xué)領(lǐng)域,如胚胎中的轉(zhuǎn)錄表達。羥脯氨酸殘基可通過形成分子內(nèi)氫鍵穩(wěn)定膠原蛋白分子。湖北膠原蛋白肽口服液
膠原蛋白是生物高分子,動物結(jié)締組織中的主要成分,也是哺乳動物體內(nèi)含量**多、分布**廣的功能性蛋白,占蛋白質(zhì)總量的25%~30%,某些生物體甚至高達80%以上。
畜禽源動物組織是人們獲取天然膠原蛋白及其膠原肽的主要途徑,但由于相關(guān)畜類疾病和某些宗教信仰限制了人們對陸生哺乳動物膠原蛋白及其制品的使用,現(xiàn)今正在逐步轉(zhuǎn)向海洋生物中開發(fā)白。歐洲食品安全局(EFSA)已證實了即使是動物骨骼來源的膠原蛋白也不存在***瘋牛病和其它相關(guān)疾病的可能。 北京大豆膠原蛋白口服液而魚皮和魚骨所含的Ⅰ型膠原蛋白是其主要膠原蛋白。
有人以豬骨為原料,用蛋白酶的酶解反應(yīng)代替?zhèn)鹘y(tǒng)制膠工藝,對骨膠原的酶解反應(yīng)與酶法制膠工藝進行了試驗研究。結(jié)果表明:以胃蛋白酶對骨膠原的提取率比較高(),其次是胰蛋白酶(),接下來是中性蛋白酶(),現(xiàn)在是堿性蛋白酶()。并且通過單因素和正交試驗對胃蛋白酶酶解反應(yīng)中各主要影響因素進行了優(yōu)化。試驗結(jié)果表明,胃蛋白酶提取的比較好條件是,胃蛋白酶的濃度是1%,在,然后在濃度為10%(w/v)的NaCL溶液中鹽析24h,現(xiàn)在骨膠原的回收率為,骨膠原的提取率為。還有人用胃蛋白酶提取豬皮膠原蛋白,分別在水解0、2、6、10、14、18、22、26h時對四種不同胃蛋白酶用量(分別為1%、2%、、3%)的試樣取樣檢測,采用一階HILL方程模擬胃蛋白酶提取豬皮膠原蛋白的進程以及胃蛋白酶水解速率的衰減過程,現(xiàn)在得出2%的胃蛋白酶用量和6-7h的水解時間提取率比較大。還有人用以新鮮豬皮為原料,在50-52℃的條件下用胰酶進行水解,在酶用量為5000:1~10000:1,pH值為9,反應(yīng)2-3h,原料:水為1:2的條件下酶解。結(jié)果表明:總蛋白質(zhì)的提取率≥80%。
酸法處理時,反應(yīng)強烈,水解徹底,多生成氨基酸混合物,而且使用酸提取時,根據(jù)酸濃度、水解溫度、水解時間等條件的不同,可以得到分子量不均的膠原水解物。但是在即使中等濃度酸徹底水解過程中色氨酸也會全部被破壞,絲氨酸和酪氨酸也會部分被破壞,且設(shè)備腐蝕嚴重。因此,酸法溶出生物醫(yī)用膠原要準確控制酸度、溫度、時間等影響因素。由于各種不足,酸法很少單獨使用,一般和酶法配合。比如以豬皮為原料,在檸檬酸()和胃蛋白酶協(xié)同下提取膠原蛋白。在處理后的豬皮中加()處理一段時間,然后再用NaCL鹽析,現(xiàn)在提取率為,提取物保持了完整三股螺旋結(jié)構(gòu)的I型膠原蛋白。還有人以雛雞胸軟骨為原材料,在,在4℃,20000r條件下離心20min,現(xiàn)在應(yīng)用DEAE-SephadexA-50進行離子交換層析,之后透析,再用NaCL鹽析,現(xiàn)在得到純化的膠原蛋白Ⅱ型。采用酶法提取膠原蛋白及其多肽的研究主要是從動物皮及其加工副產(chǎn)物中。
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膠原蛋白與膠原肽均具有保濕的作用。湖北膠原蛋白肽口服液
酶法提取是指可溶性膠原和酸溶性膠原被提取后,需用一些蛋白酶,如膠原酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶和胰凝乳蛋白酶等水解,得到不同的酶促溶性膠原蛋白。所使用的蛋白酶主要分3種:動物蛋白酶(如胰蛋白酶,胃蛋白酶),植物蛋白酶(如木瓜蛋白酶,菠蘿蛋白酶),微生物蛋白酶(如堿性蛋白酶,中性蛋白酶)。在對酶法水解膠原蛋白的研究中,以堿性蛋白酶應(yīng)用較多。將膠原進行限制性降解,即將末端肽切割下來,由于膠原肽鏈間的共價鍵都是通過分子末端肽里的賴氨酸或羥賴氨酸的相互作用形成的,末端肽被切下后,含三螺旋結(jié)構(gòu)的主體部分可溶于稀有機酸而被提取出來。用酶處理,可以水解掉膠原纖維蛋白的末端肽,提高膠原蛋白的產(chǎn)率;而且還不會破壞膠原蛋白的三股螺旋結(jié)構(gòu),保持其特性。影響酶提取的因素有很多,如酶濃度、酶與底物的比例、酶解時間、酶解溫度、pH值以及料液比等。在實際操作中,大多數(shù)采用酶復(fù)合法提取膠原蛋白,較多的是使用胃蛋白酶提取,有機酸多為乙酸。湖北膠原蛋白肽口服液
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