酶法提取是指可溶性膠原和酸溶性膠原被提取后,需用一些蛋白酶,如膠原酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶和胰凝乳蛋白酶等水解,得到不同的酶促溶性膠原蛋白。所使用的蛋白酶主要分3種:動(dòng)物蛋白酶(如胰蛋白酶,胃蛋白酶),植物蛋白酶(如木瓜蛋白酶,菠蘿蛋白酶),微生物蛋白酶(如堿性蛋白酶,中性蛋白酶)。在對酶法水解膠原蛋白的研究中,以堿性蛋白酶應(yīng)用較多。將膠原進(jìn)行限制性降解,即將末端肽切割下來,由于膠原肽鏈間的共價(jià)鍵都是通過分子末端肽里的賴氨酸或羥賴氨酸的相互作用形成的,末端肽被切下后,含三螺旋結(jié)構(gòu)的主體部分可溶于稀有機(jī)酸而被提取出來。用酶處理,可以水解掉膠原纖維蛋白的末端肽,提高膠原蛋白的產(chǎn)率;而且還不會破壞膠原蛋白的三股螺旋結(jié)構(gòu),保持其特性。影響酶提取的因素有很多,如酶濃度、酶與底物的比例、酶解時(shí)間、酶解溫度、pH值以及料液比等。在實(shí)際操作中,大多數(shù)采用酶復(fù)合法提取膠原蛋白,較多的是使用胃蛋白酶提取,有機(jī)酸多為乙酸。膠原三肽的分子量極小。河南海參膠原蛋白原料廠家
酸法處理時(shí),反應(yīng)強(qiáng)烈,水解徹底,多生成氨基酸混合物,而且使用酸提取時(shí),根據(jù)酸濃度、水解溫度、水解時(shí)間等條件的不同,可以得到分子量不均的膠原水解物。但是在即使中等濃度酸徹底水解過程中色氨酸也會全部被破壞,絲氨酸和酪氨酸也會部分被破壞,且設(shè)備腐蝕嚴(yán)重。因此,酸法溶出生物醫(yī)用膠原要準(zhǔn)確控制酸度、溫度、時(shí)間等影響因素。由于各種不足,酸法很少單獨(dú)使用,一般和酶法配合。比如以豬皮為原料,在檸檬酸()和胃蛋白酶協(xié)同下提取膠原蛋白。在處理后的豬皮中加()處理一段時(shí)間,然后再用NaCL鹽析,現(xiàn)在提取率為,提取物保持了完整三股螺旋結(jié)構(gòu)的I型膠原蛋白。還有人以雛雞胸軟骨為原材料,在,在4℃,20000r條件下離心20min,現(xiàn)在應(yīng)用DEAE-SephadexA-50進(jìn)行離子交換層析,之后透析,再用NaCL鹽析,現(xiàn)在得到純化的膠原蛋白Ⅱ型。河南復(fù)合膠原蛋白肽活性膠原蛋白能直接滲入肌膚底層,且與周圍組織的親和性好。
在實(shí)際提取過程中,不同提取方法之間往往相互結(jié)合,可以得到較好的提取效果。采用超高壓處理系統(tǒng)對原料給予高壓處理一段時(shí)間,使其組織結(jié)構(gòu)和膠原蛋白的三股螺旋結(jié)構(gòu)發(fā)生松弛、變性,便于分離提取。熱水提取法是將原料經(jīng)過除雜蛋白等前處理之后,在一定條件下直接用熱水浸提已經(jīng)變性了的膠原蛋白或膠原蛋白水解物,使用的溫度有100℃沸水浴、60-70℃、40-45℃。膠原蛋白的提取一般有三種方法:一是高壓輔助的物理方法;二是用溶劑預(yù)處理結(jié)合低溫或熱水抽提的化學(xué)方法,根據(jù)溶劑的不同,可分為熱水浸提法、酸法、堿法、鹽法;三是用酶的生物化學(xué)法。一般來說,高壓輔助和熱水抽提針對明膠的提取,而低溫抽提和酶法針對膠原的提取,但其基本原理都是根據(jù)膠原蛋白的特性改變蛋白質(zhì)所在的外界環(huán)境,把膠原蛋白從其他蛋白質(zhì)中分離出來。
堿法提取即利用一定濃度的堿在一定的外界條件下提取膠原蛋白,堿處理法中常用的處理劑為石灰、氫氧化鈉、碳酸鈉等,用氫氧化鈉浸提時(shí)效果較好。一般的是把樣品勻漿后,用堿溶液多次溶脹后,再離心提取。但由于易引起蛋白質(zhì)變性,如膠原肽鍵水解,含羥基、疏基的氨基酸全部被破壞;所得產(chǎn)物等電點(diǎn)pH值較低,天冬酞胺和谷氨酞胺分別轉(zhuǎn)變?yōu)樘於彼岷凸劝彼?,得到的水解產(chǎn)物分子量較在酸性溶液中比低等問題,若比較嚴(yán)重的話,還會產(chǎn)生D、L-型氨基酸消旋混合物,若D型氨基酸含量高過L型氨基酸,則會抑制L-型氨基酸的吸收,有些D型氨基酸有毒,甚至有致ai、致畸和致突變的作用。而且堿法提取的含量較低,用氫氧化鈉從魷魚皮中提取堿溶性膠原蛋白,其得率只有3%(以濕基計(jì))。所以,若想提取結(jié)構(gòu)完整、使用安全的膠原蛋白,很少采用此方法。有關(guān)單獨(dú)采用堿法提取膠原蛋白的報(bào)道不多,一般是堿法提取和酸法提法結(jié)合使用。比如在4℃條件下,魚骨用,再用,用10%的異丙醇溶液去除脂肪,,現(xiàn)在得到無色無味的膠原蛋白,提取率為。膠原三肽是其水分含量增加,起到了保濕作用。
膠原蛋白亦可用于食品,早在十二世紀(jì)Bingen的,在相當(dāng)長的一段時(shí)間里,含膠原的一些產(chǎn)品被人們認(rèn)為對關(guān)節(jié)是很有益處的。因?yàn)樗哂羞m用于食品的一些屬性:食用級通常外觀為白色,口感柔和,味道清淡,易消化??梢越档脱视腿ズ湍懝檀?,并可以增高體內(nèi)某些缺乏的必需微量元素使之維持在一個(gè)相對的正常范圍之內(nèi),它是一種理想的降血脂食品。此外,有研究表明,膠原蛋白可以協(xié)助排除體內(nèi)的鋁,減少鋁在體內(nèi)的聚集,降低鋁質(zhì)對人體的危害,并一定程度上促進(jìn)指甲和頭發(fā)的生長。Ⅱ型膠原是關(guān)節(jié)軟骨中的主要蛋白,因而是潛在的自身抗原。口服后能誘導(dǎo)T細(xì)胞產(chǎn)生免疫耐受,從而抑制T細(xì)胞介導(dǎo)的自身免疫性疾病。膠原多肽是膠原或明膠經(jīng)蛋白酶等降解處理后制得的具有較高消化吸收性、分子量約為2000~30000的產(chǎn)物,不具有明膠的凝膠性能,市場上銷售的膠原多為膠原多肽。膠原蛋白肽不是普通的膠原蛋白粉。安徽大豆膠原蛋白原料廠家
膠原蛋白是一類蛋白質(zhì)家族,已至少發(fā)現(xiàn)了30余種膠原蛋白鏈的編碼基因。河南海參膠原蛋白原料廠家
膠原蛋白肽的功效與作用一、撫平細(xì)紋膠原蛋白肽可以重建肌膚的彈力纖維網(wǎng),撐起干癟的肌膚細(xì)胞,舒展、減淡細(xì)紋,提升肌膚的張力和彈性,使肌膚回復(fù)飽滿、水潤、富有彈性,令肌膚重現(xiàn)青春健康光彩。二、淡斑美白膠原蛋白肽可以通過改善肌膚細(xì)胞的生理環(huán)境,由內(nèi)到位的清理身體內(nèi)的殘存垃圾和污垢,令肌膚更加通透、白皙、光亮,從而有效擊退肌膚暗沉,勻凈膚色,長期使用還可以有效淡斑。三、補(bǔ)水鎖水通過補(bǔ)充肌膚真皮層的膠原蛋白肽,可以有效保持日常肌膚所需要的水分,在皮膚形成彈力網(wǎng),***新生細(xì)胞,使肌膚水嫩光澤,減少因肌膚缺水造成的毛孔粗大、皮膚粗糙等等現(xiàn)象。河南海參膠原蛋白原料廠家
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