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將樣品或標(biāo)準(zhǔn)品加入孔中并孵育,如果其中存在HEV IgM抗體,這些抗體就會(huì)與HEV 的多肽抗原結(jié)合,并固定在上面,洗板除去其它非特異性抗體和樣品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP(辣根過(guò)氧化物酶)酶結(jié)合物,經(jīng)第二次孵育后,酶結(jié)合物就會(huì)與***次孵育結(jié)合上的HEV IgM抗體相結(jié)合,洗板除去未結(jié)合的酶結(jié)合物,加入TMB底物溶液,在第三次孵育時(shí)會(huì)發(fā)生酶-底物反應(yīng),只有那些含有HEV IgM抗體和酶結(jié)合物所形成的復(fù)合物的孔才會(huì)發(fā)生顏色變化,加入硫酸溶液終止酶和底物間的反應(yīng),并在波長(zhǎng): 450nm處測(cè)量O.D.值,按照本HEV IgM抗體elisa試劑盒的測(cè)試標(biāo)準(zhǔn), O.D.值大于或等于Cut-Off值的樣品被認(rèn)為是初試陽(yáng)性。不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。浙江有什么ELISA試劑盒代理價(jià)格
ELISA試劑盒的線性范圍是指在檢測(cè)過(guò)程中,目標(biāo)物質(zhì)濃度與檢測(cè)信號(hào)之間呈線性關(guān)系的范圍。這個(gè)范圍對(duì)于準(zhǔn)確測(cè)量目標(biāo)物質(zhì)的濃度非常重要。不同的ELISA試劑盒針對(duì)不同的目標(biāo)物質(zhì)具有不同的線性范圍。例如,某一檢測(cè)特定蛋白質(zhì)的試劑盒,其線性范圍可能是10 - 1000 pg/mL。在這個(gè)范圍內(nèi),可以根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線準(zhǔn)確地計(jì)算出樣本中蛋白質(zhì)的濃度。如果樣本中的目標(biāo)物質(zhì)濃度超出線性范圍,就可能導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果不準(zhǔn)確。因此,在使用試劑盒之前,需要了解其線性范圍,并根據(jù)樣本的預(yù)期濃度選擇合適的試劑盒或者對(duì)樣本進(jìn)行適當(dāng)?shù)南♂尰驖饪s處理。吉林認(rèn)可ELISA試劑盒廠家價(jià)格蘇州Novateinbio ELISA試劑盒特惠活動(dòng)。
操作方法:雙抗體夾心法1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃ 過(guò)夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡(jiǎn)稱(chēng)洗滌,下同)。2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育1小時(shí)。然后洗滌。(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔)。3. 加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小時(shí),洗滌。4. 加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。5. 終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。6. 結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽(yáng)性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽(yáng)性。
免疫測(cè)定技術(shù)的基礎(chǔ)在于抗原抗體之間的特異結(jié)合反應(yīng),所以任何**的診斷試劑離不開(kāi)**的原料,如抗原抗體,酶等。以前用于免疫測(cè)定的抗原通常為各種純化抗原,而抗體則為純化抗原免疫動(dòng)物后獲得的多克隆抗體和使用雜交瘤技術(shù)得到的單克隆抗體,而抗原或抗體的標(biāo)記物如酶標(biāo)結(jié)合物則通過(guò)各種化學(xué)合成方法制備。近年來(lái),隨著分子生物學(xué)的發(fā)展,使用基因工程方法制備各種特殊的抗原或抗體及其酶結(jié)合物等免疫測(cè)定試劑幾成為現(xiàn)實(shí)的新一代試劑,各種新型使用的測(cè)定方法也不斷出現(xiàn)。上海伊麗薩生物科技代理的進(jìn)口ELISA試劑盒,科研的得力助手。
ELISA試劑盒的線性范圍是指在一定的吸光度范圍內(nèi),樣本中目標(biāo)物質(zhì)濃度與檢測(cè)信號(hào)(如吸光度)呈線性關(guān)系的范圍。這個(gè)范圍對(duì)于準(zhǔn)確檢測(cè)目標(biāo)物質(zhì)的濃度至關(guān)重要。不同的ELISA試劑盒具有不同的線性范圍,例如,某一特定蛋白檢測(cè)的ELISA試劑盒,其線性范圍可能是10 - 1000ng/mL。在這個(gè)范圍內(nèi),可以根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線準(zhǔn)確計(jì)算出樣本中目標(biāo)蛋白的濃度。如果樣本中的目標(biāo)物質(zhì)濃度超出線性范圍,可能會(huì)導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果不準(zhǔn)確,要么是信號(hào)飽和無(wú)法準(zhǔn)確測(cè)量高濃度,要么是信號(hào)太弱無(wú)法準(zhǔn)確測(cè)量低濃度。因此,在使用ELISA試劑盒時(shí),了解其線性范圍并確保樣本濃度在此范圍內(nèi)是非常重要的。青島Novateinbio ELISA試劑盒特惠活動(dòng)。Novateinbio ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)價(jià)值
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在自身免疫性疾病的診斷中,ELISA試劑盒同樣具有重要意義。例如類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎,患者體內(nèi)會(huì)產(chǎn)生針對(duì)自身關(guān)節(jié)組織的抗體,如類(lèi)風(fēng)濕因子(RF)。ELISA試劑盒可用于檢測(cè)血清中的RF水平。微孔板上固定有抗RF抗體,患者樣本中的RF與之結(jié)合,再通過(guò)后續(xù)的酶標(biāo)記和底物反應(yīng)步驟進(jìn)行檢測(cè)。系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)也是一種常見(jiàn)的自身免疫性疾病,可通過(guò)ELISA試劑盒檢測(cè)抗核抗體(ANA)等相關(guān)自身抗體。這些檢測(cè)有助于醫(yī)生準(zhǔn)確診斷自身免疫性疾病,評(píng)估疾病的活動(dòng)程度,為制定個(gè)性化的治療方案提供依據(jù)。浙江有什么ELISA試劑盒代理價(jià)格