上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司成立于2019年，依托于集團公司泉心泉意深厚的資源和超過400家國內客戶群體，生命科學領域一站式供應鏈體系，以及高風險生物危險材料進出口平臺的優(yōu)勢，曼博生物嚴格篩選國際創(chuàng)新且經過同行驗證過的產品和技術，引入中國市場，開發(fā)、孵育和推廣，致力于將全球創(chuàng)新產品和前沿技術帶入中國，集中在為細胞/基因領域、/免疫，抗體藥物研發(fā)客戶提供小眾創(chuàng)新產品，包括從Researchgrade到cGMP等級的無動物源培養(yǎng)基質，轉染試劑、病毒轉導試劑、基因編輯工具等產品和定制服務，支持ATMP（AdvanceTherapyMedicinalProducts）藥物研發(fā)從R&D到Clinicaltrial以及后期商業(yè)化的無縫轉化。

上海曼博生物是Polysciences官方授權du jia代理商，更多關于轉染試劑相關問題，歡迎咨詢上海曼博生物！Polysciences 是一家化學品制造公司，產品廣泛應用于各個科研領域。公司成立于1961年，起初為電子顯微鏡提供納米級樣本制備方案，幫助科學家揭示未知領域。 哪家有GMP等級的PEI轉染試劑？cGMP級PEI轉染試劑配置方法

1.對于某些類型的細胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS細胞，在轉染前兩天鋪板可顯著提高轉入基因的表達水平。如果選擇轉染前兩天鋪板，可適當降低鋪板密度，以確保轉染時細胞的匯合度仍為70~80%。2.對于接觸抑制敏感的細胞，可適當降低鋪板密度。3.即使在有蛋白（如10%的血清）存在的情況下，DNA-PEI復合物仍能轉染細胞，但是DNA-PEI復合物必須在無蛋白存在的條件下形成。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達到*轉染效率。其他的無蛋白培養(yǎng)基則需測試與線性PEI轉染試劑的兼容性。4.對大多數(shù)細胞來而言，每1μgDNA使用3.0μLEndoFectinTM試劑都能獲得較高轉染效率。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1~4μL體積線性PEI轉染試劑進行優(yōu)化。cGMP級PEI轉染試劑好用么PEI轉染對復合物孵化的時間是有要求的，一般建議5~20分鐘之間。

對于某些類型的細胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS細胞，在轉染前兩天鋪板可顯著提高轉入基因的表達水平。如果選擇轉染前兩天鋪板，可適當降低鋪板密度，以確保轉染時細胞的匯合度仍為70~80%。2.對于接觸抑制敏感的細胞，可適當降低鋪板密度。3.即使在有蛋白（如10%的血清）存在的情況下，DNA-PEI復合物仍能轉染細胞，但是DNA-PEI復合物必須在無蛋白存在的條件下形成。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達到*轉染效率。其他的無蛋白培養(yǎng)基則需測試與線性PEI轉染試劑的兼容性。Polysciences 是一家化學品制造公司，產品廣泛應用于各個科研領域。公司成立于1961年，起初為電子顯微鏡提供納米級樣本制備方案，幫助科學家揭示未知領域。

瞬時轉染方法：1.接種細胞：轉染前一晚，用膠原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數(shù)（不建議用胰酶）。調整細胞濃度，將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿，每個孔置入的細胞量應能使轉染時細胞匯合度達到70~80%。2.準備DNA-PEI復合物：DNA、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉染試劑。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管，一邊將稀釋的線性PEI轉染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）。充分混勻后，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物。當溶液體積較大時，請用圓底聚丙烯管，例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉染細胞：直接向每個孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無血清條件下轉染時，去除生長培養(yǎng)基，替換成無血清培養(yǎng)基，然后滴DNA-PEI復合物。轉染1.5h后，添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基。4.孵育細胞和分析結果：在CO2培養(yǎng)箱中37℃下孵育細胞至可以分析檢測。轉染后5h即可檢測到轉入基因的表達。請自行確定適合檢測時間。PEI轉染試劑主要成分是什么呢？

方法：1．細胞分盤：通過胰酶消化收集細胞，用適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基以4×105至8×105細胞/cm2的密度平鋪細胞于60mm組織培養(yǎng)皿上（根據(jù)實驗需要選擇培養(yǎng)皿，使細胞貼壁后所占總面積達到培養(yǎng)皿面積的70-90％）。根據(jù)細胞貼壁情況于含5％CO2的37℃溫箱中孵育8-24h,當細胞貼壁完全后即可開始轉染。轉染前換入2mL預熱的無血清培養(yǎng)基。2.制備PEI-DNA混合物：以60mm組織培養(yǎng)皿用420μL反應總體積為例。準備兩支1.5mL離心管，一管將質粒DNA（總量2-8μg為佳）加入240μLHBS中，混勻。另一管中則用HBS將100μM的PEI儲存液稀釋成10μM，充分混合。然后取180μL10μMPEI溶液加入含有DNA的HBS中，充分混勻后室溫靜置20-30min。將這420μL的PEI-DNA混合液逐滴加入上述單層細胞的細胞培養(yǎng)基中，輕輕搖動平皿混勻，置于含5％～7％CO2的37℃溫箱孵育。注：每次用100μM的PEI儲存液前都需要先將其充分混勻，保證所取的濃度一致。3.培養(yǎng)6-10h后更換為37℃預熱的含有血清的培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)，16h左右可以觀測到報告基因的表達。更多關于PEI轉染試劑相關產品問題，歡迎咨詢上海曼博生物！用PEI轉染試劑時出現(xiàn)沉淀是什么原因？線性PEI轉染試劑蛋白產量

有誰用過40K的PEI轉染試劑嗎？cGMP級PEI轉染試劑配置方法

瞬時轉染方法1.接種細胞：轉染前一晚，用膠原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數(shù)（不建議用胰酶）。調整細胞濃度，將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿，每個孔置入的細胞量應能使轉染時細胞匯合度達到70~80%。2.準備DNA-PEI復合物：DNA、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉染試劑。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管，一邊將稀釋的線性PEI轉染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）。充分混勻后，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物。當溶液體積較大時，請用圓底聚丙烯管，例如NEST5mL/14mL離心管。更多關于PEI轉染試劑相關的產品信息，歡迎咨詢上海曼博生物！cGMP級PEI轉染試劑配置方法

上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司發(fā)展規(guī)模團隊不斷壯大，現(xiàn)有一支專業(yè)技術團隊，各種專業(yè)設備齊全。專業(yè)的團隊大多數(shù)員工都有多年工作經驗，熟悉行業(yè)專業(yè)知識技能，致力于發(fā)展PL Bioscienc,Quan-Lab,Polysciences,Sirion Biote,CN-Bio,Dharmacon,Horizon,Pfenex,Visual Prote的品牌。公司以用心服務為重點價值，希望通過我們的專業(yè)水平和不懈努力，將生物醫(yī)藥科技（人體干細胞、基因診斷與zhiliao技術開發(fā)和應用除外）領域內的技術開發(fā)、自有技術轉讓，并提供相關的技術咨詢和技術服務；計算機軟件的開發(fā)、設計、制作（音像制品、電子出版物除外）、銷售自產產品；實驗室試劑及耗材（藥品、危險品除外）、化工原料及產品（除危險化學品、監(jiān)控化學品、煙花爆竹、民用baozha物、易制毒化學品）、儀器儀表、機械設備、電子設備、塑料制品、玻璃制品、辦公用品、電子產品的批發(fā)、進出口、傭金代理（拍賣除外）?！疽婪毥浥鷾实捻椖?，經相關部門批準后方可開展經營活動】等業(yè)務進行到底。誠實、守信是對企業(yè)的經營要求，也是我們做人的基本準則。公司致力于打造***的血小板裂解液，WB自動孵育系統(tǒng)，微流控器官芯片，藍牙無線標簽機。