雙波長檢測的原理:在特定波長下測定每一種物質都有其特定的波長,在此波長下,此物質能夠吸收多的光能量。如果選擇其它的波長段,就會造成檢測結果的不準確。因此,在測定檢測物時,我們選擇特定的波長進行檢測,稱為測量波長。一般來說在ELISA操作中出現的黃顏色溶液,在450nm波長下會有比較大的吸收值。但是每一種物質對光能量還存在一定的非特異性吸收,為了消除這種非特異性吸收,我們再選取一個參照波長,以消除這個不準確性。在參照波長下,檢測物光的吸收小。檢測波長和參照波長的吸光值之差可以消除非特異性吸收。在ELISA酶標儀中一般采用比較長作為參照波長,以消除非特異性吸收以及底部的指紋等其他干擾。所以在做現代ELISA實驗時,比較好能選擇雙波長進行讀數,可比較大限度的消除指紋、雜質及不透光的物質對酶標儀讀數帶來的誤差,以保證實驗數據的準確性。酶標儀在生殖保健領域中應用越來越比較廣,同時促進了生殖健康技術水平提高。江蘇雙檢測模式酶標儀試用
酶標儀在血液檢驗上的應用:丙氨酸氨基轉移酶(ALT)的測定,是對獻血者不可缺少的篩查項目之一。方法上有速率法和賴氏法等。若采用賴氏試管法,費工、費時,不但從方法上得不到統(tǒng)一,而且不利于計算機對原始數據的網絡化管理。若采用微板酶標儀定量(U/L)方法,利用酶標儀與計算機接口,聯接血站局域網絡,這就同其他酶法檢測項目一樣,實現了實驗室原始數據的計算機管理[3]。采用試管法檢測Rh血型,操作繁鎖,肉眼判讀結果缺乏客觀性。故將平底微板法與酶標儀掃描,電腦自動判讀打印技術相結合,用TCEAN全自動加樣分析系統(tǒng)完成。經常規(guī)13032份標本的檢測,符合率達100%[4]。利用酶標儀法檢測Rh血型具有較好的重復性、準確性,操作簡便快速、判讀結果客觀可靠,也易于原始結果的保存,提高自動化程度,能的篩選獻血者,有利于實驗室的標準化管理,也有利于血站稀有血型庫的建立。北京酶標儀質保酶標儀比較廣用于醫(yī)院、血站、防疫站、生物制品等部門。
光柵式酶標儀雖然才出現短短十余年,但是發(fā)展非常迅猛,已經是主流的酶標儀.它采用光柵進行分光,光源發(fā)出的全波譜光線經過光柵后,通過光柵上面分布的一系列狹縫的分光,就可以獲得任意波長的光,波長連續(xù)可調,一般遞增量為1nm,同時具有帶寬可選的功能。光柵式酶標儀使用方便靈活,可以通過軟件選擇任意波長的光,而且可以進行全波長的掃描,通過全波長掃描可以獲得未知樣品的吸收峰,從而可以達到檢測未知樣品的目的,在實驗室中很受歡迎,可以進行更多實驗的檢測,因此在國內的普及程度很高。
酶標儀的工作原理:使抗原或抗體結合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性。使抗原或抗體與某種酶連接成酶標抗原或抗體,這種酶標抗原或抗體既保留其免疫活性,又保留酶的活性。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與其他物質分開,結合在固相載體上的酶量與標本中受檢物質的量成一定的比例。加入酶反應的底物后,底物被酶催化變?yōu)橛猩a物,產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據顏色反應的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化頻率很高,故可極大地放大反應效果,從而使測定方法達到很高的敏感度。
酶標儀雙波長檢測是指用兩個波長測量吸光度,結果為一次的測量結果減去第二次測量的結果。
波長100-400nm稱為紫外光,400-780nm之間的光稱為可見光,大于780nm稱為紅外光。江蘇雙檢測模式酶標儀試用
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