1試驗方法——《食品安全國家標準嬰幼兒食品和乳品中左旋肉堿的測定》(GB29989—2013)1.1原理概述將樣品中的蛋白質(zhì)用高氯酸溶液沉淀,過濾后的濾液用氫氧化鉀溶液皂化,使左旋肉堿游離。在乙酰肉堿轉移酶的催化作用下,游離的左旋肉堿和乙酰輔酶A反應生成乙酰肉堿和游離的輔酶A。輔酶A和顯色劑發(fā)生顯色反應,可從工作曲線上查得相應的質(zhì)量濃度,據(jù)此計算樣品中左旋肉堿的含量。1.2試驗用品1.2.1試劑和標準品13%的高氯酸溶液(HClO4);4mol/L的氫氧化鉀溶液(KOH);10mol/L的氫氧化鈉溶液(NaOH);2-硝基苯甲酸;N-2-羥乙基哌嗪-2-乙烷磺酸;乙二胺四乙酸二鈉;乙酰輔酶A(CoA);乙酰肉堿轉移酶(CAT)。其中,乙酰輔酶A(CoA)和乙酰肉堿轉移酶(CAT)需要在2~8℃的環(huán)境中保存。試驗用水均為三級水,所用試劑均為分析純。左旋肉堿標準品(C7H15NO3):純度≥98%。上海普譽科貿(mào)有限公司是一家專業(yè)提供 左旋肉堿測定用的公司,歡迎您的來電!江蘇普譽公司左旋肉堿測定用試劑乙酰輔酶A三鋰鹽
GB 29989 嬰幼兒食品和乳品中左旋肉堿的測定
酶技術法酶技術法是目前測定左旋肉堿較為常用的方法,主要包括酶技術的分光光度法、放射酶法、自動分析儀法、熒光光度法、酶循環(huán)法等。1.1(1)酶顯色法。酶顯色法也被稱為2-基甲酸(DTNB)法,是目前測定左旋肉堿較為常用的方法。該方法**開始是由Marquis和Fritz于1964年建立,檢測了小鼠組織中的游離肉堿后經(jīng)進一步完善成為現(xiàn)在的方法。該方法的機理為:左旋肉堿與乙酷輔酶A(乙酷COA)在乙肉堿轉移酶(CAT)的催化下反應生成乙酷肉堿和游離輔酶A(COASH。COASH和2-硝基苯甲酸(DTNB)反應生成黃色物質(zhì)其顏色深淺與COASH的含量成正比。因COASH與左旋肉堿是等摩爾反應關系,通過分光光度法測定COASH生成量即可間接測定左旋肉堿的含量。該方法操作經(jīng)濟、快捷,且該方法中催化全CAT酶對于左旋肉堿和乙酷輔酶A之間的反應具有專一性,從而可以排除右旋肉堿的干擾,故靈√下高檢出限為0.6mg/100g重復性和回收率較收率在96.2%~104.7%之間口。而且與化學法(通過比色法測定肉堿和澳酚藍反應生成的有色物質(zhì)來測定肉堿)相比,此法不受樣品中所含季胺類物質(zhì)的影響。國家標準《GB29989嬰幼兒食品和乳品中左旋肉堿的測定》中使用的便是此方法。 浙江維生素BT測定用左旋肉堿測定用試劑硝基苯甲酸上海普譽科貿(mào)有限公司致力于提供 左旋肉堿測定用,有想法可以來我司咨詢!
乙酰輔酶A用于使用放射性同位素測定細胞提取物中的CAT酶活性。細胞提取物中的CAT酶活性催化乙?;鶑囊阴]o酶A轉移到氯霉素。已經(jīng)開發(fā)了許多測定來測量細胞提取物中的CAT活性。乙酰輔酶A也已用于測定檸檬酸合酶活性。生化/生理作用乙酰輔酶A(Ac-CoA)是糖酵解的**終產(chǎn)物,參與Ac-CoA途徑,這是碳化合物的代謝途徑。Ac-CoA在膽固醇合成中十分重要。它還參與脂肪酸的生物合成和多胺(如精胺和亞精胺)的分解代謝。低水平的Ac-CoA導致神經(jīng)膠質(zhì)細胞和神經(jīng)元功能的喪失。酮體和甘油三酯在水解時產(chǎn)生Ac-CoA,這間接導致組蛋白乙?;黾印V苽湔f明工作溶液:比較好溶劑:具有弱酸性pH(4至5)的水或水溶液。儲存條件(工作溶液):-15至-25°C50mg/ml磷酸鹽緩沖液,pH7,在-15至-25℃下,可穩(wěn)定保存3周。未凍存的溶液應立即使用。
采用分光光度法測定嬰幼兒奶粉中左旋肉堿的含量.通過對嬰幼兒奶粉中左旋肉堿的測定進行不確定度的評估,表達出了合成標準不確定度和擴展不確定度,為評價左旋肉堿測定結果的準確和可靠性提供技術依據(jù).
依據(jù)CNAS-CL07:2011《測量不確定度的要求》,JJF1059.1-2012《測量不確定度評定與表示》和GB29989-2013《食品安全國家標準嬰幼兒食品和乳品中左旋肉堿的測定》,建立嬰幼兒配方食品中左旋肉堿的測量不確定度的測量模型.根據(jù)模型分析并計算不確定度各個分量,結果的不確定度以及擴展不確定度.計算得到在嬰幼兒奶粉中左旋肉堿含量為11.2mg/100g時,擴展不確定度為1.21mg/100g,包含因子k為2. 上海普譽科貿(mào)有限公司致力于提供 左旋肉堿測定用,歡迎您的來電!
乙酰輔酶A(acetyl-CoA)是乙酰基的活化形式,參與各種乙?;磻?,也是糖類、脂肪、氨基酸氧化時的重要中間產(chǎn)物。組蛋白的乙?;饔靡蕾囉谥虚g代謝來提供乙酰輔酶A。然而,乙酰輔酶A也用于脂肪酸的從頭合成,在脂肪酸的從頭合成過程中,***個反應同時也是一個限速步驟,即通過乙酰輔酶A羧化酶的催化作用,乙酰輔酶A羧化形成丙二酰輔酶A。所以組蛋白的乙酰化及脂肪酸合成競爭利用了相同的乙酰輔酶A存儲庫。近日,來自圣約翰大學的研究人員AlesVancura等人發(fā)現(xiàn),乙酰輔酶A羧化酶能夠調(diào)節(jié)整體組蛋白的乙?;?,這表明中間代謝影響了組蛋白乙酰化及轉錄調(diào)控。相關研究成果于5月11日發(fā)表在TheJournalofBiologicalChemistry。在釀酒酵母,已經(jīng)發(fā)現(xiàn)乙酰輔酶A羧化酶由ACC1基因所編碼。在這項研究里,他們發(fā)現(xiàn),ACC1的衰減表達會導致批量的組蛋白的乙酰化作用增強,整體的增加了乙酰化的染色體組蛋白,改變了基因轉錄的調(diào)控。AlesVancura表示,該研究結果表明,Acc1p調(diào)節(jié)了乙酰輔酶A對組蛋白乙酰轉移酶的可用性,表明了中間代謝與表觀遺傳調(diào)控機制之間的潛在聯(lián)系。上海普譽科貿(mào)有限公司致力于提供 左旋肉堿測定用,歡迎您的來電哦!咸陽奶粉測定用左旋肉堿測定用試劑乙酰肉堿轉移酶
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2500835,5'-二硫代雙(2-硝基苯甲酸)5,5′-Dithiobis(2-nitrobenzoicacid)69-78-399%5g/25g250022N-2-羥乙基哌嗪-N-2-乙烷磺酸HEPES7365-45-9>99.0%25G/100g280033乙酰輔酶AAcetylCoenzymeA(Acetyl-CoA)Tri-Li20mg,50mg,200mgFormula:C23H35N7O17P3SLi3Molecularweight:acetyl-CoA:Mr=809.6,acetyl-CoA-Li3:Mr=827.4QualityPurity:85%acetyl-CoA(enzymaticandabsorbance),2%Li230057乙酰肉堿轉移酶5mg/1mlSpecificactivity:approx.80U/mgat25°CwithCoAandacetyl-D,L-carnitineasthesubstratesContentsSuspensionin2.9Mammoniumsulfatesolution,50mMK-phosphate,1mMEDTA,pHapproximay7.5江蘇普譽公司左旋肉堿測定用試劑乙酰輔酶A三鋰鹽