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黑龍江維生素BT測定用左旋肉堿測定用試劑乙酰肉堿轉(zhuǎn)移酶

來源: 發(fā)布時間:2023-10-16

嬰幼兒食品和乳品中左旋肉堿的測定

配制標準溶液配制濃度為80g/mL的左旋肉堿標準儲備液:將左旋肉堿標準品在(102±2)℃的烘箱中烘干2h后冷卻至室溫,稱取20mg(精確至0.1mg)放入小燒杯中,用三級水溶解放入250mL容量瓶中并定容搖勻。配制左旋肉堿標準工作液:分別吸取0.5mL、1mL、2mL、3mL、5mL的標準儲備液放入25mL的容量瓶中,用三級水定容混勻。注意現(xiàn)用現(xiàn)配。1.3儀器和設(shè)備分析天平(型號:AL207-IC):購于梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司,感量為0.1mg;pH計(型號:PB-10):購于賽多利儀器(北京)有限公司,精度為0.01;離心機:轉(zhuǎn)速≥1500r/min;恒溫水浴鍋:溫度可控制在(40±2)℃;分光光度計(型號:TU-1901)。 上海普譽科貿(mào)有限公司致力于提供 左旋肉堿測定用,價格實惠,有想法的可以來電咨詢!黑龍江維生素BT測定用左旋肉堿測定用試劑乙酰肉堿轉(zhuǎn)移酶

    乙酰輔酶A 嬰幼兒食品和乳品中左旋肉堿測定用試劑

乙酰輔酶AAcetyl-CoenzymeA50mg/瓶;200mg/瓶現(xiàn)貨供應(yīng)ductDescriptionFormula:C23H35N7O17P3SLi3Molecularweight:acetyl-CoA:Mr=°C;nodecompositiondetectablewithin6monthsSolution:50mg/mlinphosphatebuffer,pH7,isstablefor3weeksat-15to-25°(enzymaticandabsorbance),2%Li

乙酰肉堿轉(zhuǎn)移酶5mg/瓶現(xiàn)貨供應(yīng)CarnitineAcetyltransferasefrompigeonbreastmuscleProductDescriptionAcetyl-CoA:°CwithCoAandacetyl-D。 上海PUYU左旋肉堿測定用試劑乙酰輔酶A三鋰鹽上海普譽科貿(mào)有限公司是一家專業(yè)提供 左旋肉堿測定用的公司,價格實惠,有需求可以來電咨詢!

GB29989


乙酰肉堿轉(zhuǎn)移酶(CAT)溶液:吸取100μL乙酰肉堿轉(zhuǎn)移酶懸浮液,經(jīng)1500r/min離心10min,棄去上層清液,沉淀用2mL水溶解。臨用時配制。

標準品左旋肉堿標準品(C7H15NO3):純度≥98%。

標準溶液配制

左旋肉堿標準儲備液(80μg/mL):準確稱取20mg(精確0.0001g)于102℃±2℃烘箱中烘2h的左旋肉堿,用水定容至250mL容量瓶中。此液置于4℃冰箱中可保存1個月。

左旋肉堿標準工作液:分別吸取左旋肉堿標準儲備液0.5mL、1mL、2mL、3mL、5mL于25mL容量瓶中,用水定容至刻度,混勻。此溶液***于當天使用。

儀器和設(shè)備 分析天平:感量0.1mg。 pH計:精度0.01。 離心機:轉(zhuǎn)速≥1500r/min。 恒溫水浴鍋:溫度可控制在40℃±2℃。 分光光度計。

GB 29989 嬰幼兒食品和乳品中左旋肉堿的測定

酶技術(shù)法酶技術(shù)法是目前測定左旋肉堿較為常用的方法,主要包括酶技術(shù)的分光光度法、放射酶法、自動分析儀法、熒光光度法、酶循環(huán)法等。1.1(1)酶顯色法。酶顯色法也被稱為2-基甲酸(DTNB)法,是目前測定左旋肉堿較為常用的方法。該方法**開始是由Marquis和Fritz于1964年建立,檢測了小鼠組織中的游離肉堿后經(jīng)進一步完善成為現(xiàn)在的方法。該方法的機理為:左旋肉堿與乙酷輔酶A(乙酷COA)在乙肉堿轉(zhuǎn)移酶(CAT)的催化下反應(yīng)生成乙酷肉堿和游離輔酶A(COASH。COASH和2-硝基苯甲酸(DTNB)反應(yīng)生成黃色物質(zhì)其顏色深淺與COASH的含量成正比。因COASH與左旋肉堿是等摩爾反應(yīng)關(guān)系,通過分光光度法測定COASH生成量即可間接測定左旋肉堿的含量。該方法操作經(jīng)濟、快捷,且該方法中催化全CAT酶對于左旋肉堿和乙酷輔酶A之間的反應(yīng)具有專一性,從而可以排除右旋肉堿的干擾,故靈√下高檢出限為0.6mg/100g重復(fù)性和回收率較收率在96.2%~104.7%之間口。而且與化學法(通過比色法測定肉堿和澳酚藍反應(yīng)生成的有色物質(zhì)來測定肉堿)相比,此法不受樣品中所含季胺類物質(zhì)的影響。國家標準《GB29989嬰幼兒食品和乳品中左旋肉堿的測定》中使用的便是此方法。 上海普譽科貿(mào)有限公司為您提供 左旋肉堿測定用。

GB29989 食品安全國家標準嬰幼兒食品和乳品中左旋肉堿的測定

試劑配制

高氯酸溶液(13%):13mL高氯酸稀釋至100mL。

氫氧化鈉溶液(10mol/L):稱取40g氫氧化鈉用水溶解,冷卻后稀釋至100mL。3.2.3氫氧化鉀溶液(4.0mol/L):稱取22.4g氫氧化鉀用水溶解,冷卻后稀釋至100mL。

顯色儲備液:分別稱取50mg2-硝基苯甲酸、5.96gN-2-羥乙基哌嗪-N-2-乙烷磺酸、185mg乙二胺四乙酸二鈉溶于30mL去離子水中,用10mol/LNaOH溶液調(diào)pH至7.4~7.6,然后用水定容至50mL。此液置于4℃冰箱中可保存3個月。

顯色工作液:吸取5.0mL顯色儲備液用水定容至25mL。

乙酰輔酶A(AcetylCoA)溶液:稱取20.0mg乙酰輔酶A溶于2.0mL水中。臨用時配制。 上海普譽科貿(mào)有限公司是一家專業(yè)提供 左旋肉堿測定用的公司,有需求可以來電咨詢!江蘇GB29989用左旋肉堿測定用試劑乙酰輔酶A

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GB 29989 嬰幼兒食品和乳品中左旋肉堿的測定

標準曲線的繪制吸取左旋肉堿標準工作液2.0mL于1cm比色皿中,加入0.8mL顯色工作液和100μL乙酰輔酶A溶液,蓋上比色皿蓋,混合均勻后放入分光光度計中,分光光度計的波長調(diào)為412nm,5min后歸零。迅速加入100μL乙酰肉堿轉(zhuǎn)移酶溶液,混合均勻后放入分光光度計中,反應(yīng)10min后記錄吸光值。以左旋肉堿標準工作液的濃度為橫坐標,以吸光值為縱坐標,制作標準曲線。

試樣測定取2.0mL試樣處理液按上述的步驟測定其吸光值。在標準曲線上查得試樣待測液的濃度。

分析結(jié)果的表述試樣中的左旋肉堿的含量X,以質(zhì)量分數(shù)mg/100g表示7精密度在重復(fù)性條件下獲得的兩次**測定結(jié)果的***差值不應(yīng)超過算術(shù)平均值的10%。

其他方法檢出限0.6mg/100g,定量限為2mg/100g。 黑龍江維生素BT測定用左旋肉堿測定用試劑乙酰肉堿轉(zhuǎn)移酶