乙酰輔酶A的提取1、細菌或培養(yǎng)細胞：先收集細菌或細胞到離心管內，離心后棄上清；按照細菌或細胞數量（104個）：試劑一體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1mL試劑一），超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次）；8000g4℃離心10min，取上清，置冰上待測。2、組織：按照組織質量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL試劑一），進行冰浴勻漿。8000g4℃離心10min，取上清，置冰上待測。測定步驟1、分光光度計預熱30min，用蒸餾水于340nm處調零。2、取920μL工作液和100μL樣本至1mL石英比色皿，混勻，立即記錄340nm處20s的吸光值A1和80s時的吸光值A2，計算ΔA=A2-A1上海普譽科貿有限公司致力于提供 左旋肉堿測定用，期待您的光臨！江西乳品用左旋肉堿測定用試劑維生素BT

GB29989食品安全國家標準嬰幼兒食品和乳品中左旋肉堿的測定

范圍本標準規(guī)定了嬰幼兒食品和乳品中左旋肉堿的測定方法。本標準適用于嬰幼兒食品和乳品中左旋肉堿的測定。

原理試樣經過水提取，用高氯酸沉淀蛋白質后過濾。濾液經堿皂化后使溶液中結合態(tài)的左旋肉堿游離出來。左旋肉堿與乙酰輔酶A在乙酰肉堿轉移酶的催化下反應生成乙酰肉堿和游離的輔酶A。游離的輔酶A和2-硝基苯甲酸反應生成黃色物質，其顏色深淺與游離的輔酶A含量成正比。因游離的輔酶A與左旋肉堿是等摩爾反應關系，可間接求出試樣中左旋肉堿含量。

試劑和材料注：除非另有說明，本方法所用試劑均為分析純，水為GB/T6682規(guī)定的三級水。

試劑 高氯酸(HClO4)。 氫氧化鈉(NaOH)。氫氧化鉀(KOH)。 2-硝基苯甲酸(C14H8N2O8S2)。 N-2-羥乙基哌嗪-N-2-乙烷磺酸(C8H18N2O4S)。 乙二胺四乙酸二鈉（C10H14N2Na2·2H2O）。 乙酰輔酶A（AcetylCoA）：在2℃~8℃保存。 乙酰肉堿轉移酶(CAT)：在2℃~8℃保存。 安徽GB29989用左旋肉堿測定用試劑乙酰輔酶A上海普譽科貿有限公司致力于提供 左旋肉堿測定用，價格實惠，有想法可以來我司咨詢！

GB 29989 嬰幼兒食品和乳品中左旋肉堿的測定

酶技術法

該方法也有不足,由于DTNB 還能與待測樣品中其他的硫醇類(-SH)物質起反應DTNB與CoASH不能完全反應,從而影響測定的準確度。因此為了消除-SH物質的干擾Marquis 在測定前將樣品置于90CpH85的環(huán)境中處理5min;也有人用H20，化樣品中含硫醇基的物質8(2)2-酮戊二酸脫酶(0GDH)法。JochenSchafer 和Heinz Reichmann(1989)對原方法進行改進,在測定游離輔酶A時用2-  戊二酸取代DTNB,在2-酮戊二酸脫酶(OGDH)催化下與COASH反應生產珀酷輔酶A和還原型輔酶I(NADH)NADH在340m 處有強吸收。與原方法相比，OCDH與 COASH反應的專一性更強，反應更加完全,且不受其他-SH 的影響。該方法靈敏度高至nmol級，肉堿回收率在103%~115%之間適合低肉堿含量的樣品。

乙酰輔酶A（Acetyl-CoA）含量測定試劑盒說明書分光光度法25管/24樣正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定測定意義乙酰輔酶A***存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中。是生物體能源物質代謝過程中產生的一種重要的中間代謝產物。在體內能源物質代謝中是一個樞紐性的物質。糖、脂肪、蛋白質三大營養(yǎng)物質通過乙酰輔酶A匯聚成一條共同的代謝通路-三羧酸循環(huán)和氧化磷酸化，經過這條通路徹底氧化生成二氧化碳和水，釋放能量用于ATP合成。此外，乙酰輔酶A是合成脂肪酸，酮體，膽固醇及其衍生物等生理活性物質的前體物質。測定原理蘋果酸脫氫酶可催化蘋果酸和NAD生成草酰乙酸和NADH。檸檬酸合酶可催化乙酰輔酶A和草酰乙酸生成檸檬酸和輔酶A。利用蘋果酸脫氫酶和檸檬酸合酶的偶聯反應，乙酰輔酶A含量和NADH的生成速率成正比，340nm下吸光值的上升速率反應了乙酰輔酶A含量的高低。上海普譽科貿有限公司為您提供 左旋肉堿測定用服務，價格實惠，歡迎您的來電哦！

GB 29989 嬰幼兒食品和乳品中左旋肉堿的測定

酶技術法酶技術法是目前測定左旋肉堿較為常用的方法,主要包括酶技術的分光光度法、放射酶法、自動分析儀法、熒光光度法、酶循環(huán)法等。1.1(1)酶顯色法。酶顯色法也被稱為2-基甲酸(DTNB)法，是目前測定左旋肉堿較為常用的方法。該方法**開始是由Marquis和Fritz于1964年建立,檢測了小鼠組織中的游離肉堿后經進一步完善成為現在的方法。該方法的機理為:左旋肉堿與乙酷輔酶A(乙酷COA)在乙肉堿轉移酶(CAT)的催化下反應生成乙酷肉堿和游離輔酶A(COASH。COASH和2-硝基苯甲酸(DTNB)反應生成黃色物質其顏色深淺與COASH的含量成正比。因COASH與左旋肉堿是等摩爾反應關系,通過分光光度法測定COASH生成量即可間接測定左旋肉堿的含量。該方法操作經濟、快捷，且該方法中催化全CAT酶對于左旋肉堿和乙酷輔酶A之間的反應具有專一性,從而可以排除右旋肉堿的干擾,故靈√下高檢出限為0.6mg/100g重復性和回收率較收率在96.2%~104.7%之間口。而且與化學法(通過比色法測定肉堿和澳酚藍反應生成的有色物質來測定肉堿)相比,此法不受樣品中所含季胺類物質的影響。國家標準《GB29989嬰幼兒食品和乳品中左旋肉堿的測定》中使用的便是此方法。 上海普譽科貿有限公司致力于提供 左旋肉堿測定用，歡迎新老客戶來電！咸陽奶粉測定用左旋肉堿測定用試劑乙酰輔酶A

左旋肉堿測定用，就選上海普譽科貿有限公司，歡迎客戶來電！江西乳品用左旋肉堿測定用試劑維生素BT

乙酰輔酶A用于使用放射性同位素測定細胞提取物中的CAT酶活性。細胞提取物中的CAT酶活性催化乙酰基從乙酰輔酶A轉移到氯霉素。已經開發(fā)了許多測定來測量細胞提取物中的CAT活性。乙酰輔酶A也已用于測定檸檬酸合酶活性。生化/生理作用乙酰輔酶A（Ac-CoA）是糖酵解的**終產物，參與Ac-CoA途徑，這是碳化合物的代謝途徑。Ac-CoA在膽固醇合成中十分重要。它還參與脂肪酸的生物合成和多胺（如精胺和亞精胺）的分解代謝。低水平的Ac-CoA導致神經膠質細胞和神經元功能的喪失。酮體和甘油三酯在水解時產生Ac-CoA，這間接導致組蛋白乙?；黾?。制備說明工作溶液：比較好溶劑：具有弱酸性pH（4至5）的水或水溶液。儲存條件（工作溶液）：-15至-25°C50mg/ml磷酸鹽緩沖液，pH7，在-15至-25℃下，可穩(wěn)定保存3周。未凍存的溶液應立即使用。江西乳品用左旋肉堿測定用試劑維生素BT