GB 29989 嬰幼兒食品和乳品中左旋肉堿的測定

熒光光度法

MitsuoMaehara等14(1988)采用一種簡單的熒光法對(duì)血清中游離肉堿進(jìn)行測定,測定原理與分光光度法基本類似。肉堿與乙酷CoA在CAT的催化下反應(yīng)生成乙酷肉堿和COASH，COASH與BIPM耦合生產(chǎn)強(qiáng)熒光物質(zhì)COA-BIPM光強(qiáng)度與肉堿的含量成正比。通過測定熒光強(qiáng)度,可以得知血清中的肉堿含量。該方法的批內(nèi)和批間變異系數(shù)(C分別為5.2%和2.6%,肉堿回收率在98%~113%之間與顯色法的測定結(jié)果相比具有良好的相關(guān)性(相關(guān)系數(shù)r>0.90)。該方法靈敏度較高,比較低檢測限為10pmol/L。KojiroMatsumoto等[15](1990)開發(fā)了光流動(dòng)注射法對(duì)丙戊酸***的患者血清中的肉堿進(jìn)行測定。該方法使用了肉堿脫氫酶(CDH)和硫辛酷胺脫氫酶(DS)兩種固定化酶催化兩步反應(yīng)***是肉堿和氧化型輔酶I(NAD+)在CDH的催化下反應(yīng)生成還原型輔酶I(NADH)第二步是NADH和刃天青(C12H7NO4)在DS的催化下反應(yīng)生成物質(zhì)試靈(C12H7NO3)試鹵靈的熒光強(qiáng)度與肉堿的含量成正比。用該方法檢測肉堿時(shí),肉堿的標(biāo)準(zhǔn)曲線在0.1~1.0nmol范圍內(nèi)線性測的激發(fā)光波長和發(fā)光波長分別為560nm和580nm。 上海普譽(yù)科貿(mào)有限公司為您提供 左旋肉堿測定用，歡迎您的來電！陜西實(shí)驗(yàn)室用左旋肉堿測定用試劑HEPES

250083 5,5'-二硫代雙(2-硝基苯甲酸)5,5′-Dithiobis(2-nitrobenzoicacid) 69-78-3  99%5g/25g

250022 N-2-羥乙基哌嗪-N-2-乙烷磺酸HEPES  7365-45-9  >99.0%  25G/100g

280033 乙酰輔酶AAcetylCoenzymeA(Acetyl-CoA)Tri-Li 20mg，50mg，200mg

Formula:C23H35N7O17P3SLi3

Molecularweight:acetyl-CoA:Mr=809.6,acetyl-CoA-Li3:Mr=827.4

QualityPurity:85%acetyl-CoA(enzymaticandabsorbance),2%Li

230057乙酰肉堿轉(zhuǎn)移酶5mg/1ml

 Specificactivity:approx.80U/mgat 25°CwithCoAandacetyl-D,L-carnitineasthesubstratesContentsSuspensionin2.9Mammoniumsulfatesolution,50mMK-phosphate,1mMEDTA,pHapproximay7.5 西安肉堿測定用左旋肉堿測定用試劑左旋肉堿左旋肉堿測定用，就選上海普譽(yù)科貿(mào)有限公司，有需要可以聯(lián)系我司哦！

CarnitineAcetyltransferasefrompigeonbreastmuscleProductDescriptionAcetyl-CoA:carnitineO-acetyltransferaseEC2.3.1.7Specificactivity:approx.80U/mgat25°CwithCoAandacetyl-D,L-carnitineasthesubstratesContentsSuspensionin2.9Mammoniumsulfatesolution,50mMK-phosphate,1mMEDTA,pHapproximay7.5QualityContaminants:<0.01%acetyl-CoA-deacylase上海普譽(yù)科貿(mào)有限公司

介紹：酶活定義：在pH8.0，溫度為25°C的條件下，一單位酶每分鐘可將1.0μmole的乙酰-L-左旋肉堿和輔酶A轉(zhuǎn)化為L-左旋肉堿和乙酰輔酶A。來源：鴿子胸肌儲(chǔ)存條件：2-8℃

乙酰輔酶A羧化酶acetyl-CoAcatboxyla-se 乙酰輔酶A羧化酶（AcetylCoAcarboxylase）催化乙酰輔酶A＋ATP＋HCO3-→丙二酰輔酶A+ADP＋Pi反應(yīng)的生物素酶。***存在于生物界。此反應(yīng)制約著脂肪酸合成第一階段的速度。本反應(yīng)由二個(gè)步驟組成，即利用ATP把CO2固定在酶所結(jié)合的生物素上和把CO2轉(zhuǎn)移給乙酰輔酶A的反應(yīng)。大腸桿菌或植物中的這種酶可以區(qū)分為催化這二個(gè)反應(yīng)的蛋白質(zhì)和結(jié)合生物素的蛋白質(zhì)，而動(dòng)物或酵母中的這種酶則不能分開，動(dòng)物的酶是一種變構(gòu)酶，原體不顯示活性，而聚合成纖維狀的多聚體則呈現(xiàn)活性。動(dòng)物由于營養(yǎng)條件、***條件的不同使脂肪酸的合成速度發(fā)生變化，在這種變化調(diào)節(jié)中此酶起著主要作用。即一方面酶量在變化，另一方面每一分子酶的催化力可為檸檬酸等所***的長鏈脂肪酸輔酶A等所阻抑（原體即多聚體的轉(zhuǎn)換）。上海普譽(yù)科貿(mào)有限公司是一家專業(yè)提供 左旋肉堿測定用的公司，價(jià)格實(shí)惠，有想法的可以來電咨詢！

GB 29989 嬰幼兒食品和乳品中左旋肉堿的測定

酶技術(shù)法酶技術(shù)法是目前測定左旋肉堿較為常用的方法,主要包括酶技術(shù)的分光光度法、放射酶法、自動(dòng)分析儀法、熒光光度法、酶循環(huán)法等。1.1(1)酶顯色法。酶顯色法也被稱為2-基甲酸(DTNB)法，是目前測定左旋肉堿較為常用的方法。該方法**開始是由Marquis和Fritz于1964年建立,檢測了小鼠組織中的游離肉堿后經(jīng)進(jìn)一步完善成為現(xiàn)在的方法。該方法的機(jī)理為:左旋肉堿與乙酷輔酶A(乙酷COA)在乙肉堿轉(zhuǎn)移酶(CAT)的催化下反應(yīng)生成乙酷肉堿和游離輔酶A(COASH。COASH和2-硝基苯甲酸(DTNB)反應(yīng)生成黃色物質(zhì)其顏色深淺與COASH的含量成正比。因COASH與左旋肉堿是等摩爾反應(yīng)關(guān)系,通過分光光度法測定COASH生成量即可間接測定左旋肉堿的含量。該方法操作經(jīng)濟(jì)、快捷，且該方法中催化全CAT酶對(duì)于左旋肉堿和乙酷輔酶A之間的反應(yīng)具有專一性,從而可以排除右旋肉堿的干擾,故靈√下高檢出限為0.6mg/100g重復(fù)性和回收率較收率在96.2%~104.7%之間口。而且與化學(xué)法(通過比色法測定肉堿和澳酚藍(lán)反應(yīng)生成的有色物質(zhì)來測定肉堿)相比,此法不受樣品中所含季胺類物質(zhì)的影響。國家標(biāo)準(zhǔn)《GB29989嬰幼兒食品和乳品中左旋肉堿的測定》中使用的便是此方法。 上海普譽(yù)科貿(mào)有限公司致力于提供 左旋肉堿測定用，歡迎新老客戶來電！江蘇GB29989用左旋肉堿測定用試劑左旋肉堿

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GB 29989 嬰幼兒食品和乳品中左旋肉堿的測定

酶技術(shù)法

該方法也有不足,由于DTNB 還能與待測樣品中其他的硫醇類(-SH)物質(zhì)起反應(yīng)DTNB與CoASH不能完全反應(yīng),從而影響測定的準(zhǔn)確度。因此為了消除-SH物質(zhì)的干擾Marquis 在測定前將樣品置于90CpH85的環(huán)境中處理5min;也有人用H20，化樣品中含硫醇基的物質(zhì)8(2)2-酮戊二酸脫酶(0GDH)法。JochenSchafer 和Heinz Reichmann(1989)對(duì)原方法進(jìn)行改進(jìn),在測定游離輔酶A時(shí)用2-  戊二酸取代DTNB,在2-酮戊二酸脫酶(OGDH)催化下與COASH反應(yīng)生產(chǎn)珀酷輔酶A和還原型輔酶I(NADH)NADH在340m 處有強(qiáng)吸收。與原方法相比，OCDH與 COASH反應(yīng)的專一性更強(qiáng)，反應(yīng)更加完全,且不受其他-SH 的影響。該方法靈敏度高至nmol級(jí)，肉堿回收率在103%~115%之間適合低肉堿含量的樣品。 陜西實(shí)驗(yàn)室用左旋肉堿測定用試劑HEPES

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