GB 29989 嬰幼兒食品和乳品中左旋肉堿的測定

標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制吸取左旋肉堿標(biāo)準(zhǔn)工作液2.0mL于1cm比色皿中，加入0.8mL顯色工作液和100μL乙酰輔酶A溶液，蓋上比色皿蓋，混合均勻后放入分光光度計(jì)中，分光光度計(jì)的波長調(diào)為412nm，5min后歸零。迅速加入100μL乙酰肉堿轉(zhuǎn)移酶溶液，混合均勻后放入分光光度計(jì)中，反應(yīng)10min后記錄吸光值。以左旋肉堿標(biāo)準(zhǔn)工作液的濃度為橫坐標(biāo)，以吸光值為縱坐標(biāo)，制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。

試樣測定取2.0mL試樣處理液按上述的步驟測定其吸光值。在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得試樣待測液的濃度。

分析結(jié)果的表述試樣中的左旋肉堿的含量X，以質(zhì)量分?jǐn)?shù)mg/100g表示7精密度在重復(fù)性條件下獲得的兩次**測定結(jié)果的***差值不應(yīng)超過算術(shù)平均值的10%。

其他方法檢出限0.6mg/100g，定量限為2mg/100g。 上海普譽(yù)科貿(mào)有限公司是一家專業(yè)提供 左旋肉堿測定用的公司，有想法的不要錯過哦！黑龍江乳品用左旋肉堿測定用試劑乙酰輔酶A三鋰鹽

2500835,5'-二硫代雙(2-硝基苯甲酸)5,5′-Dithiobis(2-nitrobenzoicacid)69-78-399%5g/25g250022N-2-羥乙基哌嗪-N-2-乙烷磺酸HEPES7365-45-9>99.0%25G/100g280033乙酰輔酶AAcetylCoenzymeA(Acetyl-CoA)Tri-Li20mg，50mg，200mgFormula:C23H35N7O17P3SLi3Molecularweight:acetyl-CoA:Mr=809.6,acetyl-CoA-Li3:Mr=827.4QualityPurity:85%acetyl-CoA(enzymaticandabsorbance),2%Li230057乙酰肉堿轉(zhuǎn)移酶5mg/1mlSpecificactivity:approx.80U/mgat25°CwithCoAandacetyl-D,L-carnitineasthesubstratesContentsSuspensionin2.9Mammoniumsulfatesolution,50mMK-phosphate,1mMEDTA,pHapproximay7.5咸陽左旋肉堿測定用左旋肉堿測定用試劑左旋肉堿上海普譽(yù)科貿(mào)有限公司 左旋肉堿測定用獲得眾多用戶的認(rèn)可。

乙酰輔酶A

肉堿乙酰轉(zhuǎn)移酶乙酰肉堿轉(zhuǎn)移酶

5,5'-二硫代雙(2-硝基苯甲酸)69-78-3

N-2-羥乙基哌嗪-N-2-乙烷磺酸HEPES7365-45-9

HEPES

乙酰輔酶A三鋰鹽

左旋肉堿L-肉堿541-15-1

維生素BT541-15-1

乙酰輔酶A是能源物質(zhì)代謝的重要中間代謝產(chǎn)物，在體內(nèi)能源物質(zhì)代謝中是一個樞紐性的物質(zhì)。糖、脂肪、蛋白質(zhì)三大營養(yǎng)物質(zhì)通過乙酰輔酶A匯聚成一條共同的代謝通路——三羧酸循環(huán)和氧化磷酸化，經(jīng)過這條通路徹底氧化生成二氧化碳和水，釋放能量用以ATP的合成。乙酰輔酶A是合成脂肪酸、酮體等能源物質(zhì)的前體物質(zhì)，也是合成膽固醇及其衍生物等生理活性物質(zhì)的前體物質(zhì)。用于乳品肉堿的檢測普譽(yù)公司為您提供各種規(guī)格乙酰輔酶A

GB29989食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)嬰幼兒食品和乳品中左旋肉堿的測定

范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了嬰幼兒食品和乳品中左旋肉堿的測定方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于嬰幼兒食品和乳品中左旋肉堿的測定。

原理試樣經(jīng)過水提取，用高氯酸沉淀蛋白質(zhì)后過濾。濾液經(jīng)堿皂化后使溶液中結(jié)合態(tài)的左旋肉堿游離出來。左旋肉堿與乙酰輔酶A在乙酰肉堿轉(zhuǎn)移酶的催化下反應(yīng)生成乙酰肉堿和游離的輔酶A。游離的輔酶A和2-硝基苯甲酸反應(yīng)生成黃色物質(zhì)，其顏色深淺與游離的輔酶A含量成正比。因游離的輔酶A與左旋肉堿是等摩爾反應(yīng)關(guān)系，可間接求出試樣中左旋肉堿含量。

試劑和材料注：除非另有說明，本方法所用試劑均為分析純，水為GB/T6682規(guī)定的三級水。

試劑 高氯酸(HClO4)。 氫氧化鈉(NaOH)。氫氧化鉀(KOH)。 2-硝基苯甲酸(C14H8N2O8S2)。 N-2-羥乙基哌嗪-N-2-乙烷磺酸(C8H18N2O4S)。 乙二胺四乙酸二鈉（C10H14N2Na2·2H2O）。 乙酰輔酶A（AcetylCoA）：在2℃~8℃保存。 乙酰肉堿轉(zhuǎn)移酶(CAT)：在2℃~8℃保存。 上海普譽(yù)科貿(mào)有限公司是一家專業(yè)提供 左旋肉堿測定用的公司，價(jià)格實(shí)惠，期待您的光臨！

乙酰輔酶A含量計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)條件下測定的回歸方程為y=1640x+0.012；x為吸光值，y為標(biāo)準(zhǔn)品濃度（nmol/mL）。注意：本試劑盒比較低檢測限為1.6nmol/mL。（1）按照蛋白濃度計(jì)算乙酰輔酶A含量(nmol/mgprot)=[(1640×ΔA＋0.012)×V1]÷(V1×Cpr)=(1640×ΔA＋0.012)÷Cpr需要另外測定，建議使用本公司BCA蛋白質(zhì)含量測定試劑盒。（2）按照樣本質(zhì)量計(jì)算乙酰輔酶A含量(nmol/g鮮重)=[(1640×ΔA＋0.012)×V1]÷(W×V1÷V2)=(1640×ΔA＋0.012)÷W(3)按照細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算：乙酰輔酶A含量(nmol/104)=[(1640×ΔA＋0.012)×V1]÷(500×V1÷V2)=(1640×ΔA＋0.012)÷500V1：加入反應(yīng)體系中樣本體積，0.1mL；V2：加入提取液體積，1mL；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；500：細(xì)胞或細(xì)菌總數(shù)，500萬。上海普譽(yù)科貿(mào)有限公司致力于提供 左旋肉堿測定用，有需要可以聯(lián)系我司哦！西安PUYU左旋肉堿測定用試劑乙酰肉堿轉(zhuǎn)移酶

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GB 29989 嬰幼兒食品和乳品中左旋肉堿的測定

酶技術(shù)法

該方法也有不足,由于DTNB 還能與待測樣品中其他的硫醇類(-SH)物質(zhì)起反應(yīng)DTNB與CoASH不能完全反應(yīng),從而影響測定的準(zhǔn)確度。因此為了消除-SH物質(zhì)的干擾Marquis 在測定前將樣品置于90CpH85的環(huán)境中處理5min;也有人用H20，化樣品中含硫醇基的物質(zhì)8(2)2-酮戊二酸脫酶(0GDH)法。JochenSchafer 和Heinz Reichmann(1989)對原方法進(jìn)行改進(jìn),在測定游離輔酶A時用2-  戊二酸取代DTNB,在2-酮戊二酸脫酶(OGDH)催化下與COASH反應(yīng)生產(chǎn)珀酷輔酶A和還原型輔酶I(NADH)NADH在340m 處有強(qiáng)吸收。與原方法相比，OCDH與 COASH反應(yīng)的專一性更強(qiáng)，反應(yīng)更加完全,且不受其他-SH 的影響。該方法靈敏度高至nmol級，肉堿回收率在103%~115%之間適合低肉堿含量的樣品。 黑龍江乳品用左旋肉堿測定用試劑乙酰輔酶A三鋰鹽

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