發(fā)酵培養(yǎng)基為：葡萄糖80g/l，酵母浸膏20g/l，k2hpo42g/l，mgso4·7h2o50mg/l，cecl30-40mg/l，mnso4·h2o3mg/l，feso4·7h2o3mg/l，vb110mg/l，生物素7μg/l；發(fā)酵工藝同實施例1，100l發(fā)酵罐中含有70l發(fā)酵培養(yǎng)基。設置cecl3的添加濃度為0，，如圖1-2所示，隨著cecl3添加量的增加，菌體濃度和谷氨酸含量均有所提升，當添加量為10mg/l時，菌體濃度和谷氨酸含量達到峰值，然后出現下降趨勢，但是整個過程中，糖酸轉化率沒有明顯改變（附圖未顯示）；說明cecl3稀土鹽能夠促進菌株增殖，提高谷氨酸相關合成酶的活力，提高谷氨酸的產量，但是過高的濃度會造成菌株增殖放緩和死亡，谷氨酸產量相應下降。二、通過上述實驗確定cecl3添加量為10mg/l，在此基礎上，研究2-羥基乙胺對菌體濃度、谷氨酸含量以及糖酸轉化率的影響。設置2-羥基乙胺的濃度為，5,10,20,40,80,160mg/l，如圖3-4所示，隨著2-羥基乙胺添加量的增加，菌體濃度隨之增加，相應地，谷氨酸含量和糖酸轉化率也有所提升，當添加量為40mg/l時，菌體濃度和谷氨酸含量達到峰值，繼續(xù)增加2-羥基乙胺的濃度，產生明顯的抑菌效果，菌株密度下降明顯；原因是，低濃度的2-羥基乙胺可能促進磷脂酰乙醇胺細胞壁組分的合成。F12培養(yǎng)基提供了豐富的營養(yǎng)支持。上海RPMI1640培養(yǎng)基

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    cs液體培養(yǎng)基和1/2cs液體培養(yǎng)基在用不同ph超純水(ph為)配制時的ph都較為穩(wěn)定，在未調ph的情況下，可直接用于多種植物培養(yǎng)。如圖8所示。(2)以克新18號馬鈴薯無菌苗為例，觀察在未調ph和將ph調至：a、培養(yǎng)基制作方法：隨機選取超純水，測得其ph為，用于配制8種不同的液體培養(yǎng)基。第一種：1/2ms未調ph液體培養(yǎng)基，其為取1/2ms基本培養(yǎng)基置于ph為；第二種：1/2cs未調ph液體培養(yǎng)基，其為取1/2cs基本培養(yǎng)基置于ph為；第三種：ms未調ph液體培養(yǎng)基，其為取ms基本培養(yǎng)基置于ph為；第四種：cs未調ph液體培養(yǎng)基，其為取cs基本培養(yǎng)基置于ph為；第五種：1/，其為取1/2ms基本培養(yǎng)基置于ph為，調ph至；第六種：1/，其為取1/2cs基本培養(yǎng)基置于ph為，調ph至；第七種：，其為取ms基本培養(yǎng)基置于ph為，調ph至；第八種：，其為取cs基本培養(yǎng)基置于ph為，調ph至。b、培養(yǎng)方法：從培養(yǎng)實例4所述培養(yǎng)基獲得長勢**的馬鈴薯幼苗，在清水中緩苗2-3d后選取長勢一致的馬鈴薯幼苗，如圖9-a所示，置于上述8種不同液體培養(yǎng)基8d，每隔2d更新1次液體培養(yǎng)基；于溫度22-23℃、濕度50-70％、光照強度2000-3000lux、光照和黑暗交替(光照時間14h、黑暗時間10h)條件下培養(yǎng)。

    3)培養(yǎng)方法：將配制的1/2cs生長培養(yǎng)基分裝于長、寬、高9cm的耐高溫培養(yǎng)盒中，用移液槍吸取帶有無菌水的無菌種子，吹打在無菌濾紙上，用無菌尖頭鑷子將種子均勻點播在培養(yǎng)基上；于溫度22-24℃、濕度50-70％、光照強度1500-2000lux、光照和黑暗交替(光照時間16h、黑暗時間8h)條件下培養(yǎng)。(4)1/2cs生長培養(yǎng)基的培養(yǎng)結果為：哥倫比亞型擬南芥種子在1/2cs生長培養(yǎng)基上的萌發(fā)率為100％，培養(yǎng)16d的幼苗，表現為植株健壯，蓮座葉均已伸展，葉色濃綠，根系發(fā)達、平均主根長為。如圖1所示。對比培養(yǎng)例1：將1/2cs基本培養(yǎng)基替換為1/2ms基本培養(yǎng)基，其余完全同培養(yǎng)實例1，1/2ms基本培養(yǎng)基的成分及用量如表1所示。1/2ms生長培養(yǎng)基的培養(yǎng)結果為：哥倫比亞型擬南芥種子在1/2ms生長培養(yǎng)基上的萌發(fā)率為100％，培養(yǎng)16d的幼苗，表現為植株健壯，蓮座葉部分伸展，葉色濃綠，根系發(fā)達、平均主根長為。如圖1所示。培養(yǎng)實例1和對比培養(yǎng)例1的培養(yǎng)結果比較：哥倫比亞型擬南芥在1/2cs生長培養(yǎng)基和1/2ms生長培養(yǎng)基上的萌發(fā)率均為100％；在相同條件下培養(yǎng)16d時，與1/2ms生長培養(yǎng)基相比，1/2cs生長培養(yǎng)基中的幼苗長勢更佳，主要表現為蓮座葉長勢更好、根系更為發(fā)達。如圖1所示。無酚紅培養(yǎng)基確保了實驗結果的準確性。

    若應用于植物培養(yǎng)中的液體培養(yǎng)基制作，可不用調節(jié)ph，用超純水(ph為)充分溶解后定容，便可直接應用于大多數植物水培。培養(yǎng)實例1：哥倫比亞型擬南芥無菌苗培養(yǎng)(1)種子保存及消毒方法：a、擬南芥種子保存方法：哥倫比亞(col,columbia)型擬南芥種子成熟后，收取種子于，加入3-8顆變色**干燥劑，用封口膜密封后置于4℃長期保存；b、擬南芥種子**消毒方法：取出經低溫干燥保存的種子，于無菌環(huán)境下，將適量種子置于無菌，加入適量體積的無菌水，將離心管顛倒幾次后用低速離心機離心10s，小心倒掉上清，重復3次；加入75％酒精，將離心管顛倒幾次后用低速離心機離心10s，小心倒掉上清；用無菌水清洗3次，低速離心10s后去除上清；加入適量體積的5％naclo溶液，將離心管上下顛倒10-20次，低速離心10s后倒掉上清，重復2次；用無菌水清洗3次，低速離心10s后去除上清；加入無菌水，使種子完全浸泡在無菌水中，于4℃放置48h后播種。在種子質量良好的情況下，利用上述方法保存及消毒的無菌擬南芥種子，萌發(fā)率極高且?guī)缀跬瑫r出苗。(2)生長培養(yǎng)基配制：1/2cs基本培養(yǎng)基+蔗糖30g/l+植物凝膠8g/l，用超純水溶解，。1/2cs基本培養(yǎng)基的成分及用量如表1所示。。無酚紅培養(yǎng)基在細胞實驗中減少了不必要的干擾。云南DMEM高糖培養(yǎng)基生產企業(yè)

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