Ca2+是重要的第二信使,對于調(diào)節(jié)細(xì)胞的生理反應(yīng)具有極其重要的作用,開發(fā)和利用雙光子熒光顯微成像技術(shù)對Ca2+熒光信號進(jìn)行觀測,可以從某些方面對有機體或細(xì)胞的變化機制進(jìn)行分析,具有重要的意義。利用雙光子熒光顯微成像技術(shù)可以觀察細(xì)胞內(nèi)用熒光探針標(biāo)記的Ca2*的時間和空間的熒光圖像的變化,還可以觀察細(xì)胞某一層面或局部的(Ca2+)熒光圖像和變化。通過對單細(xì)胞的研究發(fā)現(xiàn),Ca2+不僅在細(xì)胞局部區(qū)域間的分布是不均勻的,而且細(xì)胞內(nèi)各局部區(qū)域的不同深度或?qū)哟伍g也存在不同程度的Ca2+梯差即所謂的空間Ca2梯差。全球多光子顯微鏡主要生產(chǎn)地區(qū)分析,包括產(chǎn)量、產(chǎn)值份額等。進(jìn)口多光子顯微鏡技術(shù)
從產(chǎn)品類型及技術(shù)方面來看,正置顯微鏡占據(jù)絕大多數(shù)市場。2020年,全球多光子激光掃描正置顯微鏡市場達(dá)到87.30百萬美元,預(yù)計到2027年該部分市場將達(dá)到154.02百萬美元,年復(fù)合增長率(2021-2027)為8.48%。中國多光子激光掃描正置顯微鏡市場達(dá)到13.32百萬美元,預(yù)計到2027年該部分市場將達(dá)到25.21百萬美元,年復(fù)合增長率(2021-2027)為9.58%。從產(chǎn)品市場應(yīng)用情況來看,研究機構(gòu)為主要應(yīng)用領(lǐng)域,2020年約占全球市場46.28%。2020年,全球多光子激光掃描顯微鏡研究機構(gòu)應(yīng)用消費量為174臺,預(yù)計2027年達(dá)到349臺,2021-2027年復(fù)合增長率(CAGR)為9.72%。多光子顯微鏡數(shù)據(jù)處理中國市場多光子顯微鏡進(jìn)出口貿(mào)易趨勢。
以往我們認(rèn)識的光電效應(yīng)是單光子光電效應(yīng),即一個電子在極短時間內(nèi)能吸收到一個光子而從金屬表面逸出。強激光的出現(xiàn)豐富了人們對于光電效應(yīng)的認(rèn)識,用強激光照射金屬,由于其光子密度極大,一個電子在短時間吸收多個光子成為可能,從而形成多光子電效應(yīng),這已被實驗證實。為什么一般討論的光電效應(yīng)都是指單光子光電效應(yīng)呢?這是因為,在使用普通光源的情況下,電子吸收兩個以上光子能量的概率是非常非常小的,幾乎為零。事實上,愛因斯坦本人就考慮過在強光下發(fā)生光電效應(yīng)的可能性問題。對此,他有如下的論述:光電效應(yīng)中的一個電子吸收兩個光子的幾率不會大于下雨天兩個雨滴同事打在一個螞蟻上的幾率。因此,多光子光電效應(yīng)在實驗上的研究成為可能,是二十世紀(jì)六十年代激光乃至強激光出現(xiàn)以后的事情。有了激光,對于雙光子光電效應(yīng),在實驗上和理論上均取得了許多成果。利用強激光,人們不僅觀察到雙光子和三光子的光電效應(yīng),甚至觀察到金靶材吸收幾十個等效光子實驗現(xiàn)象。
當(dāng)細(xì)胞受到外界刺激時,隨著刺激時間的增加,即使繼續(xù)刺激,Ca2+熒光信號也不會繼續(xù)增強,反而會減弱,直至恢復(fù)到無刺激時的水平。對于細(xì)胞受精過程中Ca2+熒光信號的變化,發(fā)現(xiàn)粘附過程中Ca2+熒光信號沒有變化,但當(dāng)配子融合時,Ca2+熒光信號強度出現(xiàn)一個不穩(wěn)定的峰值,持續(xù)數(shù)分鐘。這些現(xiàn)象對于研究受精發(fā)育的早期信號以及Ca2+在卵子和受精卵發(fā)育中的作用具有重要意義。在其他生理過程中,如細(xì)胞分裂和胞吐,Ca2+熒光信號的強度也會發(fā)生很大的變化。多光子激光掃描顯微鏡更能解決生物組織中深層物質(zhì)的層析成像問題, 擴大了應(yīng)用范圍。
2020年,JianglaiWu等人提出提高2PM橫向掃描速率的裝置,稱為FACED(free-spaceangular-chirp-enhanceddelay)。圓柱透鏡將激光束一維聚焦,會聚角為Δθ。光束進(jìn)入到一對幾乎平行的高反射鏡中,其間距為S,偏角為α。經(jīng)過反射鏡多次反射后,激光脈沖被分成多個傳播方向不同的子脈沖(N=Δθ/α),脈沖間以2S/c的時間延遲(c,光速)回射。FACED模塊輸出處的子脈沖序列可以看作從虛擬光源陣列發(fā)出的光,這些子脈沖在中繼到顯微鏡物鏡后形成了一個空間上分離且時間延遲的焦點陣列。然后將該模塊并入具有高速數(shù)據(jù)采集系統(tǒng)的標(biāo)準(zhǔn)雙光子熒光顯微鏡中。光源是具有1MHz重復(fù)頻率的920nm的激光器,通過FACED模塊可產(chǎn)生80個脈沖焦點,其脈沖時間間隔為2ns。這些焦點是虛擬源的圖像,虛擬源越遠(yuǎn),物鏡處的光束尺寸越大,焦點越小。光束沿y軸比x軸能更好地充滿物鏡,從而導(dǎo)致x軸的橫向分辨率為0.82μm,y軸的橫向分辨率為0.35μm。多光子顯微鏡,為疾病診斷和藥物研發(fā)提供強大支持。美國多光子顯微鏡長時間觀察
國內(nèi)市場多光子顯微鏡銷售渠道。進(jìn)口多光子顯微鏡技術(shù)
作為一個多學(xué)科、知識密集型和資金密集型的高科技產(chǎn)業(yè),多光子顯微鏡涉及醫(yī)學(xué)、生物學(xué)、化學(xué)、物理學(xué)、電子學(xué)、工程學(xué)等多個學(xué)科。其生產(chǎn)工藝相對復(fù)雜,進(jìn)入門檻較高。它是衡量一個國家制造業(yè)和高科技發(fā)展水平的重要標(biāo)準(zhǔn)之一。在過去的五年里,多光子顯微鏡的市場是集中的。由于投產(chǎn)成本高,技術(shù)難度大,目前涌現(xiàn)的新企業(yè)并不多。顯微鏡作為傳統(tǒng)的高科技產(chǎn)業(yè),并沒有被其他技術(shù)顛覆,而是一直在不斷融合發(fā)展相關(guān)技術(shù),在醫(yī)療等精密檢測領(lǐng)域發(fā)揮更大的作用。顯微鏡的商業(yè)化發(fā)展已進(jìn)入成熟階段,主要需求來自教學(xué)、生命科學(xué)研究和精密測試等。全球市場呈現(xiàn)溫和增長趨勢。而顯微鏡產(chǎn)品(如多光子顯微鏡、電子顯微鏡)正在刺激市場需求,多光子顯微鏡市場發(fā)展?jié)摿薮蟆_M(jìn)口多光子顯微鏡技術(shù)