黃曲霉b1檢測(cè)試劑盒技術(shù)指標(biāo)

1試劑盒靈敏度：0.01ppb(ng/ml)

2反應(yīng)模式：25℃，30min～15min

3檢測(cè)下限：

大米等谷物………………………………0.05ppb

吸水性強(qiáng)谷物……………………………0.1ppb

4交叉反應(yīng)率：

黃曲霉***B1………………………………100%

5樣本回收率：

大米等谷物………………………………85±15%

吸水性強(qiáng)樣本……………………………82±15%

試劑盒組成

酶標(biāo)板……………………………96孔

標(biāo)準(zhǔn)液（黑蓋）：各1ml0ppb、0.01ppb、0.03ppb、0.09ppb、0.27ppb、0.81ppb

高標(biāo)準(zhǔn)液：100ppb…………………1ml

酶標(biāo)記物（紅蓋）…………………5.5ml

抗體工作液（藍(lán)蓋）………………5.5ml

底物液A（白蓋）……………………6ml

底物液B（黑蓋）……………………6ml

終止液（黃蓋）………………………6ml

20×濃縮洗滌液（白蓋）……………40ml

說明書………………………………1份 酶聯(lián)免疫法檢測(cè)黃曲霉b1殘留檢測(cè)的方法？云南實(shí)驗(yàn)室裝黃曲霉B1酶聯(lián)試劑盒

   產(chǎn)黃曲霉微生物經(jīng)常在種植、貯藏、加工和運(yùn)輸過程污染玉米、花生等富含脂肪酸的糧食及相關(guān)食品和飼料，并會(huì)產(chǎn)生多種有毒次生代謝產(chǎn)物，統(tǒng)稱為黃曲霉***。黃曲霉***（Aflatoxins，AFT）是一類化學(xué)結(jié)構(gòu)相似、具有強(qiáng)毒性的化合物總稱。目前已發(fā)現(xiàn)的黃曲霉***有20余種，**常見的有AFB1、AFB2、AFG1、AFG2、AFM1和AFM2，AFB1與AFB2在體內(nèi)經(jīng)過羥化可衍生成AFM1、AFM2，其中M是Milk的簡(jiǎn)寫，奶牛食用了含有AFB1和AFB2的飼料，AFB1和AFB2在奶牛體內(nèi)經(jīng)過代謝會(huì)有一小部分轉(zhuǎn)化為AFM1、AFM2，這也是牛奶中AFM1、AFM2的來源。在天然環(huán)境中受污染的糧食和飼料中以AFB1**為多見，其毒性和致*性也**強(qiáng)。1993年，該類物質(zhì)被國(guó)際**研究機(jī)構(gòu)劃為I類致*物，其毒性是**的68倍。內(nèi)蒙古黃曲霉檢測(cè)卡家庭如何便捷檢測(cè)食用油中的黃曲霉素是否超標(biāo)?

黃曲霉b1檢測(cè)試劑盒試驗(yàn)

步驟將所需試劑從4℃冷藏環(huán)境中取出，置于室溫平衡30min以上,洗滌液冷藏時(shí)可能會(huì)有結(jié)晶需恢復(fù)到室溫以充分溶解，每種液體試劑使用前均須搖勻。取出需要數(shù)量的微孔板及框架，將不用的微孔板放入自封袋，保存于2-8℃。

1 編號(hào)：將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào)，每個(gè)樣本和標(biāo)準(zhǔn)品做2孔平行，并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置。

2 加樣反應(yīng)：加標(biāo)準(zhǔn)品或樣本50μl/孔到各自的微孔中，然后加酶標(biāo)記物50μl/孔，再加入50μl/孔的抗體工作液，用蓋板膜封板，輕輕振蕩5秒混勻，25℃反應(yīng)30分鐘。

3 洗滌：小心揭開蓋板膜，甩去孔內(nèi)液體，每孔加350μl工作洗滌液，靜置30秒后棄去，重復(fù)洗滌5次，***一次拍干（用吸水紙拍干，拍干后未被***的氣泡可用干凈的***頭刺破）。

4顯色：每孔加入底物液A50μl，再加底物液B50μl，輕輕振蕩5秒混勻，25℃避光顯色15分鐘（若藍(lán)色過淺，可適當(dāng)延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間）。

5終止：每孔加入終止液50μl，輕輕振蕩混勻，終止反應(yīng)。

6測(cè)吸光值：用酶標(biāo)儀于450nm處測(cè)定每孔吸光度值（建議用雙波長(zhǎng)450/630nm）。測(cè)定應(yīng)在終止反應(yīng)后10分鐘內(nèi)完成。

黃曲霉m1檢測(cè)試劑盒樣本前處理步驟：

1液態(tài)奶

1）取1ml液態(tài)奶于50ml離心管中，加入4ml乙腈，振蕩5分鐘，室溫4000轉(zhuǎn)/分，離心10分鐘；

2）取2.5ml上清液，于50℃-60℃下氮?dú)饣蚩諝獯蹈苫蛩]干。加1ml復(fù)溶液，振蕩混勻；

3）取50μl進(jìn)行分析。樣本稀釋倍數(shù)：2檢測(cè)下限：0.1ppb

2奶粉

1）稱取5.0g奶粉于50ml離心管中，加入20ml樣本提取液，振蕩5分鐘，過濾或室溫4000轉(zhuǎn)/分，離心10分鐘；

2）取1ml濾液或清液，于50℃-60℃下氮?dú)饣蚩諝獯蹈苫蛩]干。加750μl復(fù)溶液，振蕩混勻；

3）取50μl進(jìn)行分析。

樣本稀釋倍數(shù)：

檢測(cè)下限：0.15ppb

3尿液

1)取100μl尿液與900μl復(fù)溶液混合，振蕩1分鐘；

2)取50μl進(jìn)行分析。

樣本稀釋倍數(shù)：10檢測(cè)下限：0.5ppb 黃曲霉b1檢測(cè)卡的操作方法？

霉菌***是一種抗?fàn)I養(yǎng)因子，大多數(shù)存在于動(dòng)物飼料或原料中，由不同的***產(chǎn)生的二級(jí)代謝產(chǎn)物。換而言之，霉菌***是一種含有毒性的霉菌代謝產(chǎn)物，對(duì)動(dòng)物的機(jī)體有著極大的威脅性，主要表現(xiàn)在破壞動(dòng)物機(jī)體的免疫系統(tǒng)，極大程度的降低了動(dòng)物的***，進(jìn)而造成動(dòng)物生長(zhǎng)的緩慢?，F(xiàn)階段，黃曲霉***是飼料中主要的霉菌***，在自然界中普遍存在，尤其在濕熱的環(huán)境中極易產(chǎn)生，由于其具有極強(qiáng)的致*性，也是毒性**強(qiáng)的霉菌***，時(shí)刻威脅著動(dòng)物的機(jī)體健康。鑒別食物中是否黃曲霉素超標(biāo)的方法有那些？?jī)?nèi)蒙古黃曲霉檢測(cè)卡

黃曲霉B1檢測(cè)卡該如何使用？云南實(shí)驗(yàn)室裝黃曲霉B1酶聯(lián)試劑盒

黃曲霉b1檢測(cè)試劑盒樣本前處理

濃縮料處理方法

1）稱取2g±0.05g粉碎樣本于50ml離心管中，加10ml樣本提取液，振蕩5分鐘，室溫4000轉(zhuǎn)/分離心10分鐘；

2）取2ml上清，加入4ml三氯甲烷（或二氯甲烷），振蕩5分鐘，室溫4000轉(zhuǎn)/分離心10分鐘；

3）轉(zhuǎn)移上層液體到另一容器中，下層液留置備用，向上層液中再加入4ml三氯甲烷（或二氯甲烷），充分振蕩混5分鐘，室溫4000轉(zhuǎn)/分離心10分鐘；

4）去除上層液體，合并兩次的下層液體并充分混勻；

5）取合并后的下層液體2ml于50-60℃氮?dú)饣蚩諝庀麓蹈桑?

6）加入0.5ml樣本提取液充分溶解干燥物，再加入0.5ml去離子水混勻；

7）取50μl進(jìn)行分析。

樣本稀釋倍數(shù)：10檢測(cè)下限：3ppb 云南實(shí)驗(yàn)室裝黃曲霉B1酶聯(lián)試劑盒

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