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從Star開始CSD序列前25個左右堿基，此時注意溫度比較好在60度左右（22-40堿基數(shù)目之間都可以），點(diǎn)擊Primers>addprimer>topstrand，點(diǎn)OK。-生命科學(xué)軟件從END開始CSD序列后25個左右堿基，此時注意溫度比較好在60度左右（22-40堿基數(shù)目之間都可以），但也要兼顧堿基的長度，如果太長則不好擴(kuò)增PCR。點(diǎn)擊Primers>addprimer>bottomstrand，點(diǎn)OK.這一步先做到這，后續(xù)再添加酶和堿基。-生命科學(xué)軟件點(diǎn)擊Emazy>chooseemazy>先移除右邊框中的酶，然后再添加你所在實驗室中已有的酶，我在這里隨便選了6種。如下圖所示，然后點(diǎn)確定。北京FCS Express生命科學(xué)軟件價格生命科學(xué)軟件有什么特點(diǎn)和作用。

在該序列5’端上添加數(shù)個堿基作為保護(hù)堿基。點(diǎn)擊完成。-生命科學(xué)軟件△下游引物設(shè)計相同，不再贅述。2.突變引物繪制：在目的基因上截取一小段包含要突變位點(diǎn)的序列，點(diǎn)擊Primers→Addprimers，為該引物命名，在5’序列突變位點(diǎn)的三個堿基畫黑，點(diǎn)擊Insertions，選擇突變成的氨基酸，點(diǎn)擊Insert。即可獲得該突變引物，點(diǎn)擊ReverseComplement，可獲得反向引物。-生命科學(xué)軟件模擬標(biāo)準(zhǔn)限制性克隆1.打開**入片段的質(zhì)粒圖譜，選擇合適的兩個酶切位點(diǎn)，如HindIII和ApaI。

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