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將裝有樣品的Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管接在Amicon?Pro上樣池的下端。 3. Amicon?Pro上樣池內(nèi)加入預(yù)先準(zhǔn)備好的1.5 mL含有染料的反應(yīng)混合液。 4. 4,000×g離心15 min。 5. 優(yōu)化選做：將樣品在室溫下...

在將進(jìn)行ChIP咳PCR實(shí)驗(yàn)的地點(diǎn)期近，不得打開(kāi)含有擴(kuò)增PCR產(chǎn)物約試幢。 確保您使用的抗體是在ChIP中給證過(guò)的抗體。關(guān)于ChIP抗體約完整選擇過(guò)程，請(qǐng)參見(jiàn)默克官網(wǎng)表觀遺傳學(xué)。如果您正使用ChIP抗體，請(qǐng)?jiān)黾涌贵w的解育時(shí)間。?一般1-10uq ChIP抗體...

如果實(shí)驗(yàn)試劑將用于進(jìn)一步測(cè)量，應(yīng)避免直接使用移液管從試劑瓶中移取。（氧化活性污采物可通過(guò)非特異性顯色影響費(fèi)底物），檢查所用抗體和陶結(jié)合物的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)稀釋度 檢查確保樣品根據(jù)建議的樣品操作抽提、配制和貯菱（聚丙烯試管，澄清樣品的貯載溫度為-20℃）。配置樣品和標(biāo)準(zhǔn)...

· 間接檢測(cè)法 在間接檢測(cè)法中，用純化抗體進(jìn)行解育和目標(biāo)抗原結(jié)合，隨后采用熒光標(biāo)記二抗，形成一抗-焚光二抗復(fù)合物，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)目標(biāo)抗原的檢測(cè)?！ど锼鼗瘷z測(cè)法 第三種方法即生物素化檢測(cè)法;親和素是細(xì)菌源蛋白，由于它們與生物素的天然親和力，故如此命名。生物素-...

用途極為***的液相懸浮芯片法，是基于Luminex公司開(kāi)發(fā)的xMAP?技術(shù)。 多因子檢測(cè)技術(shù)是三種**技術(shù)的結(jié)合：xMAP?微球、 Luminex液相懸浮芯片儀和分析軟件。 Luminex xMAP*微珠免疫檢測(cè)法的原理微球用不同濃度的紅色和紅外兩種受...

在解育過(guò)程中，檢查密封蓋與平板的接觸情況。確保樣品所用的稀釋倍數(shù)在數(shù)據(jù)計(jì)算范圍內(nèi)。認(rèn)真遵守產(chǎn)品說(shuō)明書中的指示（第育時(shí)間、稀釋等）。 確保樣品根據(jù)建議的樣品操作抽提、配制和貯藏（聚丙烯試管，澄清樣品的貯戴溫度為-20℃）。 多因子免疫檢測(cè)法(Multiple...

如果目標(biāo)蛋白的種屬不包括在已檢測(cè)的種屬中，您可以通過(guò)蛋白數(shù)據(jù)庫(kù)快速檢查特異性蛋白序列。 抗體種屬來(lái)源 一抗的種屬來(lái)源在選擇二抗時(shí)有很大的作用。二抗應(yīng)盡量與您的樣本物種相隔較遠(yuǎn)。 在說(shuō)明書或供應(yīng)商網(wǎng)站上查詢已驗(yàn)證的數(shù)據(jù)： 1、查看說(shuō)明書或供應(yīng)商網(wǎng)站上的驗(yàn)...

在解育過(guò)程中，檢查密封蓋與平板的接觸情況。確保樣品所用的稀釋倍數(shù)在數(shù)據(jù)計(jì)算范圍內(nèi)。認(rèn)真遵守產(chǎn)品說(shuō)明書中的指示（第育時(shí)間、稀釋等）。 確保樣品根據(jù)建議的樣品操作抽提、配制和貯藏（聚丙烯試管，澄清樣品的貯戴溫度為-20℃）。 多因子免疫檢測(cè)法(Multiple...

在將進(jìn)行ChIP咳PCR實(shí)驗(yàn)的地點(diǎn)期近，不得打開(kāi)含有擴(kuò)增PCR產(chǎn)物約試幢。 確保您使用的抗體是在ChIP中給證過(guò)的抗體。關(guān)于ChIP抗體約完整選擇過(guò)程，請(qǐng)參見(jiàn)默克官網(wǎng)表觀遺傳學(xué)。如果您正使用ChIP抗體，請(qǐng)?jiān)黾涌贵w的解育時(shí)間。?一般1-10uq ChIP抗體...

與技術(shù)支持部門協(xié)商，以便進(jìn)行適當(dāng)?shù)姆桨感薷摹Ｐ?zhǔn)移液管 確認(rèn)在所有洗滌步驟中所有試劑都已完全***。見(jiàn)上文。 在所有解育步驟中應(yīng)采用垂直微孔板振彩器振高做孔板，其速度應(yīng)使橫珠處于怛定運(yùn)動(dòng)狀態(tài)，但不引起飛踐。當(dāng)再使用封閉劑時(shí)，檢查沒(méi)有任例試養(yǎng)觸及封閉劑。 ...

這是為了避免或盡量減少凍融循環(huán)。抗體溶液不可反復(fù)凍融，因?yàn)檫@可以導(dǎo)致抗體。 聚集，從而引起活性喪失。因此，貯存溶液應(yīng)在保存前先進(jìn)行分裝。未稀釋抗體應(yīng)在保存于-20℃之前分裝，以盡量減少可使抗體變性的反復(fù)凍融循環(huán)。集中保存抗體可預(yù)防或盡量減少降解。可在抗體溶液...

Troubleshooting 問(wèn)題 微珠計(jì)數(shù)不足 本底過(guò)高 微珠不在制定的區(qū)域內(nèi)或圈門中 整個(gè)微孔板的信號(hào)與本底相同 陽(yáng)性對(duì)照的信號(hào)任樣品信號(hào)過(guò)高或飽和 樣品信號(hào)過(guò)低 樣品和/或標(biāo)準(zhǔn)品CV值較大 微孔板洗板機(jī)吸液高度設(shè)置過(guò)低微珠混合物配制不...

未加入鏈零親和素-藻紅蛋白前育溫度、時(shí)間或需蕩不適當(dāng)校準(zhǔn)目標(biāo)值設(shè)置過(guò)高 對(duì)照物和樣品在微孔板上解育時(shí)間過(guò)長(zhǎng)樣品中含有的分析物流度高于分析動(dòng)態(tài)范圍 樣品不含分析物或所含分析物任于可檢測(cè)水平 多道移液器可能沒(méi)有校準(zhǔn)微孔板洗滌不均勻 樣品可能含有較高水平的顆...

不均勻樣品，如混濁液、樣品中有顆粒節(jié) 樣品和標(biāo)準(zhǔn)品混勻不亮分移液器加樣不準(zhǔn) 移液器在樣品和/或標(biāo)準(zhǔn)品使用時(shí)存在題留 在解育過(guò)程中試劑混合不充分洗滌不充分 液體蒸發(fā) 稀釋倍數(shù)的計(jì)算不正確修改實(shí)驗(yàn)程序樣品處理不正確 處理辦法： 確保只使用特定批次...

在陰性對(duì)照（igG或mockIP）樣品中本底較高 抗體過(guò)量導(dǎo)致抗體與非靶蛋白結(jié)合∶ 與珠子的非特異性結(jié)合∶ 染色質(zhì)的不完金裂解∶ 試劑污染∶ "無(wú)DNA" PCR反應(yīng)顯示信號(hào) DNA的較低回收率 ChIP抗體無(wú)效或較低親和力： ChIP抗體不足...

對(duì)您的特定應(yīng)用，增加（和優(yōu)化）試劑濃度和培養(yǎng)時(shí)間。 檢查確保檢測(cè)試劑按建議的方法正確貯藏和使用。 從抗體緩沖液中除去吐溫。 配制少量工作液（1mL），在暗室中加入HRP偶聯(lián)二抗1mL。 應(yīng)觀察到可見(jiàn)的藍(lán)光。 在再雜交過(guò)程中可能有抗原損失。 信號(hào)較弱...

如果吸光度任于1.0，則延長(zhǎng)底物的解育時(shí)間使用之前應(yīng)確保所用的試劑已回復(fù)至室溫（20-28C）。使用不含或含有較任濃度（

· 間接檢測(cè)法 在間接檢測(cè)法中，用純化抗體進(jìn)行解育和目標(biāo)抗原結(jié)合，隨后采用熒光標(biāo)記二抗，形成一抗-焚光二抗復(fù)合物，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)目標(biāo)抗原的檢測(cè)?！ど锼鼗瘷z測(cè)法 第三種方法即生物素化檢測(cè)法;親和素是細(xì)菌源蛋白，由于它們與生物素的天然親和力，故如此命名。生物素-...

對(duì)每種細(xì)胞類型或組織焚型單壯優(yōu)化表解，使用l化試管或低吸附試管。確保所有試劑都是新鮮配制的，且沒(méi)有污染物。增加洗滌次數(shù)。運(yùn)行一次"無(wú)DNA"PCR反應(yīng)，以確定您的樣品是否被核酸污染。 使用PCR的專門應(yīng)用移液管;在設(shè)置PCR之前，使用紫外性照射移液管。采用專...

如果吸光度任于1.0，則延長(zhǎng)底物的解育時(shí)間使用之前應(yīng)確保所用的試劑已回復(fù)至室溫（20-28C）。使用不含或含有較任濃度（

主要優(yōu)點(diǎn) ?兩種過(guò)濾裝置均有快速過(guò)濾的Millipore Express PLUS (PES)和**蛋白吸附的Durapore膜兩種材質(zhì)可選 ?過(guò)濾中培養(yǎng)基損失極小，回收率超高 ?0.mm孔徑的過(guò)濾裝置推薦用于去除支原體 Sterivex?過(guò)濾器 S...

對(duì)于成功的ChIP實(shí)驗(yàn)，選擇適當(dāng)?shù)腃hIP抗體是**關(guān)鍵的步驟之一。即使是比較高質(zhì)量的抗體，即在經(jīng)典的Western blot驗(yàn)證中表現(xiàn)非常好的抗體，也不一定適合ChIP。比較好只考慮使用在ChIP實(shí)驗(yàn)中專門驗(yàn)證過(guò)的抗體。一般的， ChIP實(shí)驗(yàn)之后會(huì)用定量PC...

經(jīng)ChIP驗(yàn)證的抗體洗滌、洗脫和交聯(lián)逆轉(zhuǎn) DNA純化 PCR分析 Magna ChIP? HiSens Kits Magna ChIP? HiSens kit采用統(tǒng)一的緩沖液體系，兼容更***的樣本起始量，獲得更好的信噪 比，以實(shí)現(xiàn)超靈敏檢測(cè)。 產(chǎn)...

前言 流式細(xì)脆術(shù)是具有很強(qiáng)統(tǒng)計(jì)學(xué)功能的技接術(shù)，它根據(jù)物理特征和焚光信號(hào)對(duì)懸浮細(xì)胞群進(jìn)行鑒定和分選。在50年前就已經(jīng)開(kāi)發(fā)了流式細(xì)胞分析儀;直至1960年代晚期，這種技術(shù)才開(kāi)始商業(yè)化。 流式細(xì)胞術(shù)定義為在懸浮液中，當(dāng)粒子（如細(xì)胞）通過(guò)激光或其它光源時(shí)，測(cè)量細(xì)胞...

對(duì)于成功的ChIP實(shí)驗(yàn)，選擇適當(dāng)?shù)腃hIP抗體是**關(guān)鍵的步驟之一。即使是比較高質(zhì)量的抗體，即在經(jīng)典的Western blot驗(yàn)證中表現(xiàn)非常好的抗體，也不一定適合ChIP。比較好只考慮使用在ChIP實(shí)驗(yàn)中專門驗(yàn)證過(guò)的抗體。一般的， ChIP實(shí)驗(yàn)之后會(huì)用定量PC...

用途極為***的液相懸浮芯片法，是基于Luminex公司開(kāi)發(fā)的xMAP?技術(shù)。 多因子檢測(cè)技術(shù)是三種**技術(shù)的結(jié)合：xMAP?微球、 Luminex液相懸浮芯片儀和分析軟件。 Luminex xMAP*微珠免疫檢測(cè)法的原理微球用不同濃度的紅色和紅外兩種受...

未加入鏈零親和素-藻紅蛋白前育溫度、時(shí)間或需蕩不適當(dāng)校準(zhǔn)目標(biāo)值設(shè)置過(guò)高 對(duì)照物和樣品在微孔板上解育時(shí)間過(guò)長(zhǎng)樣品中含有的分析物流度高于分析動(dòng)態(tài)范圍 樣品不含分析物或所含分析物任于可檢測(cè)水平 多道移液器可能沒(méi)有校準(zhǔn)微孔板洗滌不均勻 樣品可能含有較高水平的顆...

注意 當(dāng)從體內(nèi)組織或體外培養(yǎng)條件下取出細(xì)胞時(shí)，膜受體或其它表面抗原會(huì)自然的發(fā)生內(nèi)化。為盡量減少這種情況，未固定細(xì)胞必須在冰和/球4℃下保存。 采用T10B9—抗Mi-Mark" 抗CD3省略PE就體（黃色柱狀圈，產(chǎn)品貨號(hào)FCMAB168P）對(duì)人外周血單模細(xì)...

在陰性對(duì)照（igG或mockIP）樣品中本底較高 抗體過(guò)量導(dǎo)致抗體與非靶蛋白結(jié)合∶ 與珠子的非特異性結(jié)合∶ 染色質(zhì)的不完金裂解∶ 試劑污染∶ "無(wú)DNA" PCR反應(yīng)顯示信號(hào) DNA的較低回收率 ChIP抗體無(wú)效或較低親和力： ChIP抗體不足...

請(qǐng)查測(cè)生產(chǎn)廠家說(shuō)明書。當(dāng)在Luminex200儀器上讀取分析的讀數(shù)時(shí)，采用4個(gè)校準(zhǔn)片，根題Luminex推薦的方案調(diào)整探針高度至適當(dāng)位置。當(dāng)在FLEX0MP3D"儀器上讀取分析法的讀數(shù)時(shí)，采用1個(gè)校準(zhǔn)片，根據(jù)Luminex建議的方案調(diào)整探針高度至適當(dāng)位置。當(dāng)在...