醫(yī)療和預(yù)后有關(guān)的免疫組化。與醫(yī)療及預(yù)后有關(guān)的標(biāo)記物主要分以下為三類:(1)cancer基因標(biāo)記物:如cancer基因C-erbB2、c-myc、P53蛋白等,卵巢上皮性cancer中P53的過表達(dá)與cancer的擴(kuò)散、分化、術(shù)后殘存cancer灶呈正相關(guān);乳腺cancer中表達(dá)C-erbB2的浸潤(rùn)性cancer患者預(yù)后差;肺cancer中突變型P53基因蛋白表達(dá)增高,PTEN基因表達(dá)減弱,提示cancer預(yù)后不良。(2)細(xì)胞增殖性標(biāo)記物:cancer細(xì)胞增生是否活躍直接影響著臨床的醫(yī)療與預(yù)后,如表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)、Ki-67、PCNA、cycling等可對(duì)cancer細(xì)胞的增生做出評(píng)...
免疫組化的結(jié)果分析: 免疫組化實(shí)驗(yàn)通常需要設(shè)置陽性對(duì)照、陰性對(duì)照(或替代對(duì)照)(陽性對(duì)照是排除方法和實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)有無問題;陰性對(duì)照與替代對(duì)照是排除有無非特異性染色)。一般情況下,陽性對(duì)照顏色的特點(diǎn)為:Ag定位,包漿、胞核、胞膜、間質(zhì)具有結(jié)構(gòu)性。且染色的強(qiáng)度不同(顏色深淺不一);陰性對(duì)照的特點(diǎn)為:染色細(xì)胞與組織無區(qū)別,顏色具有彌散性,分布均勻。 英瀚斯生物可承接各類病理染色,包括免疫組化。 說明:免疫組化實(shí)驗(yàn)可以對(duì)結(jié)果進(jìn)行定量分析,但要實(shí)驗(yàn)得到的必須是高質(zhì)量的染色切片,要求背景染色淺且特異性染色較深,這樣分析的結(jié)果才會(huì)比較準(zhǔn)確。 英瀚斯生物免疫組化,高效高質(zhì)量出結(jié)果。貴州什么是...
免疫組化結(jié)果背景染色較深的原因有哪些? (1)抗體濃度過高:一抗?jié)舛冗^高是常見的原因之一。解決辦法是,每次使用新抗體前應(yīng)當(dāng)對(duì)其工作濃度進(jìn)行測(cè)試,使每一抗體個(gè)體化,找到適合自己實(shí)驗(yàn)室的理想工作濃度,既使是即用型的抗體也應(yīng)如此,不能只簡(jiǎn)單的按說明書進(jìn)行染色。 (2)抗體孵育時(shí)間過長(zhǎng)或溫度較高:解決辦法是,嚴(yán)格執(zhí)行操作規(guī)程,比較好隨身佩帶報(bào)時(shí)表或報(bào)時(shí)鐘,及時(shí)提醒,避免因遺忘而造成時(shí)間延長(zhǎng)?,F(xiàn)在流行的二步法(Polymer)敏感性很高,要求一抗孵育的時(shí)間不是傳統(tǒng)的1小時(shí),而是30分鐘,因此,要根據(jù)染色結(jié)果進(jìn)行調(diào)整。 (3)DAB變質(zhì)和顯色時(shí)間太長(zhǎng):DAB比較好現(xiàn)用現(xiàn)配,如有沉...
免疫組化指的是根據(jù)抗體與抗原特異結(jié)合的原理來檢測(cè)組織切片中的抗原(如蛋白)。immuno的詞根來自操作中所使用的抗體,而histo意味著組織。另一種類似的技術(shù)是免疫細(xì)胞化學(xué)(Immunocytochemistry,簡(jiǎn)稱ICC)。這兩個(gè)詞大家經(jīng)?;熘?,看著好像差不多,但實(shí)際上還是有點(diǎn)區(qū)別。IHCvsICC對(duì)于IHC,組織是來自患者或動(dòng)物,經(jīng)過冷凍或石蠟包埋。將這些組織制成約4μm厚的切片,封片后再處理。通過這種方法,研究人員可觀察細(xì)胞組分的定位,同時(shí)維持周圍組織的原先結(jié)構(gòu)。對(duì)于ICC,大部分細(xì)胞外基質(zhì)及其他基質(zhì)組分被去除,只剩下整個(gè)細(xì)胞來染色。ICC的來源可以是細(xì)胞懸液,來自患者或動(dòng)物(如...
免疫組化分類中免疫酶標(biāo)方法,英瀚斯生物為您介紹。免疫酶標(biāo)方法是繼免疫熒光后,于60年代發(fā)展起來的技術(shù)?;驹硎窍纫悦笜?biāo)記的抗體與組織或細(xì)胞作用,然后加入酶的底物,生成有色的不溶性產(chǎn)物或具有一定電子密度的顆粒,通過光鏡或電鏡,對(duì)細(xì)胞表面和細(xì)胞內(nèi)的各種抗原成分進(jìn)行定位研究。免疫酶標(biāo)技術(shù)是目前定位準(zhǔn)確、對(duì)比度好、染色標(biāo)本可長(zhǎng)期保存,適合于光、電鏡研究等。免疫酶標(biāo)方法的發(fā)展非常迅速,已經(jīng)衍生出了多種標(biāo)記方法,目前在病理診斷中廣為使用的當(dāng)屬***法(過氧化物酶-抗過氧化物酶)、ABC法(卵白素-生物素-過氧化物酶復(fù)合物)、SP法(鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶)、即用型二步法(聚合物鏈接)等。免疫組化...
免疫組化實(shí)驗(yàn)流程介紹: 英瀚斯生物為您整理總結(jié)免疫組化詳細(xì)步驟: 1、SP三步法 1)石蠟切片,常規(guī)脫蠟至水。 2)0.3%或3%H2O2去離子水(無色液體)孵育10-30分鐘,以滅活內(nèi)源性過氧化物酶活性。 3)蒸餾水沖洗,PBS浸泡5分鐘 4)候選步驟:采用抗原修復(fù):微波(建議30分鐘內(nèi)4次中火)、高壓、酶修復(fù)方法。自然冷卻,再用3分鐘×3次. 5)血清封閉:室溫15-30分鐘,盡可能與二抗來源一致。傾去,勿洗。 6)滴加適當(dāng)比例稀釋的一抗,37℃孵育2~3小時(shí)或4℃過夜(比較好復(fù)溫)。PBS沖洗,3分鐘×5次。 7)滴加生物素標(biāo)記的...
醫(yī)療和預(yù)后有關(guān)的免疫組化。與醫(yī)療及預(yù)后有關(guān)的標(biāo)記物主要分以下為三類:(1)cancer基因標(biāo)記物:如cancer基因C-erbB2、c-myc、P53蛋白等,卵巢上皮性cancer中P53的過表達(dá)與cancer的擴(kuò)散、分化、術(shù)后殘存cancer灶呈正相關(guān);乳腺cancer中表達(dá)C-erbB2的浸潤(rùn)性cancer患者預(yù)后差;肺cancer中突變型P53基因蛋白表達(dá)增高,PTEN基因表達(dá)減弱,提示cancer預(yù)后不良。(2)細(xì)胞增殖性標(biāo)記物:cancer細(xì)胞增生是否活躍直接影響著臨床的醫(yī)療與預(yù)后,如表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)、Ki-67、PCNA、cycling等可對(duì)cancer細(xì)胞的增生做出評(píng)...
實(shí)驗(yàn)失敗常見問題分析有哪些: 為什么在顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)所有的切片都成陰性? 答:這種現(xiàn)象主要是由操作不當(dāng)導(dǎo)致,可能的原因有:1.染色操作不當(dāng),致使染色失?。?.漏加一種抗體或者制備出的抗體沒有活性;3.緩沖液中有疊氮化鈉,抑制了酶的活性;4.復(fù)染或脫水劑使用不當(dāng)?shù)?。建議逐一排查,找到原因后重新進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。 在顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)所有的切片都成陽性,這是為什么?答:與上一個(gè)問題類似,出現(xiàn)的原因也是試驗(yàn)操作存在問題,可能的原因有:1.切片在染色過程中抗體過濃,或者干片了;使用的呈色底物溶液已變色或呈色反應(yīng)時(shí)間過長(zhǎng);3.抗體溫育的時(shí)間過長(zhǎng)等。 在顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)切片的背景很深,...
免疫組化在什么情況下進(jìn)行組織抗原修復(fù),抗原修復(fù)的條件是什么? (1)由于組織中部分抗原在甲醛或多聚甲醛固定過程中,發(fā)生了蛋白之間交聯(lián)及醛基的封閉作用,從而失去抗原性。通過抗原修復(fù),使得細(xì)胞內(nèi)抗原決定族重新暴露,提高抗原檢測(cè)率。 (2)修復(fù)方法從強(qiáng)到弱一般分為三種,高壓修復(fù)、微波修復(fù)、胰酶修復(fù)。修復(fù)液也分為若干種(具體的可以查閱相關(guān)資料,大量的:中性的、高pH的等)。 (3)微波修復(fù),我們一般用6min*4次,效果不錯(cuò)。 關(guān)于免疫組化的更多問題詳解,關(guān)注英瀚斯生物。 做免疫組化需要多少錢?湖北大鼠免疫組化要多少錢 免疫組化的結(jié)果分析: 免疫組化實(shí)驗(yàn)通常需要設(shè)...
關(guān)于免疫組化的封閉:用和二抗來源一致的血清在保濕盒中于37℃孵育15~30min,然后甩去封閉用血清,勿洗;注意:封閉時(shí)間根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)調(diào)整;封閉液一般選用5%BSA或與二抗來源一致的血清,切記是BSA,不是PBS.很多論壇寫的是PBS,太坑了。①使用血清好還是BSA好?答:***是待檢樣本會(huì)非特異性的和蛋白結(jié)合,從而導(dǎo)致背景過高,因此可以用BSA或血清封閉掉這部分非特異性的結(jié)合,從這點(diǎn)看,BSA和血清沒有明顯區(qū)別。第二是待檢樣本中可能會(huì)有Fc受體,可以和抗體恒定區(qū)結(jié)合,與抗體特異性無關(guān),封閉血清中有抗體,因此用血清可以封閉掉一抗及二抗和樣本Fc受體之間結(jié)合。BSA則無法封閉Fc受體。免疫組化相...
免疫組化中免疫膠體金技術(shù),英瀚斯生物小編為您說明介紹。免疫膠體金技術(shù)是以膠體金這樣一種特殊的金屬顆粒作為標(biāo)記物。膠體金是指金的水溶膠,它能迅速而穩(wěn)定地吸附蛋白,對(duì)蛋白的生物學(xué)活性則沒有明顯的影響。因此,用膠體金標(biāo)記一抗、二抗或其他能特異性結(jié)合免疫球蛋白的分子(如葡萄球菌A蛋白)等作為探針,就能對(duì)組織或細(xì)胞內(nèi)的抗原進(jìn)行定性、定位,甚至定量研究。由于膠體金有不同大小的顆粒,且膠體金的電子密度高,所以免疫膠體金技術(shù)特別適合于免疫電鏡的單標(biāo)記或多標(biāo)記定位研究。由于膠體金本身呈淡至深紅色,因此也適合進(jìn)行光鏡觀察。如應(yīng)用銀加強(qiáng)的免疫金銀法則更便于光鏡觀察。英瀚斯生物,組織包埋、切片、染色、免疫組化拍照、報(bào)...
免疫組化中IHC vs ICC的區(qū)別。英瀚斯生物為您說明。除了生物學(xué)來源,IHC和ICC在樣品處理的程度上也有所不同。ICC需要透化,要么通過固定過程,要么是單獨(dú)的透化步驟,這樣抗體才能與細(xì)胞內(nèi)的靶點(diǎn)相結(jié)合。而IHC可能不要單獨(dú)的透化步驟,這取決于切片的厚度和固定方法。包埋在石蠟中的IHC切片必須進(jìn)一步處理,才能進(jìn)行抗體染色。一旦處理好樣品,IHC和ICC的染色操作就幾乎沒什么差異了。當(dāng)然,就染色而言,根據(jù)所使用的抗體來優(yōu)化還是少不了的。免疫組化流程是什么樣的??jī)?nèi)蒙古做得好的免疫組化可以做什么 免疫組化實(shí)驗(yàn)所用的抗體 免疫組化實(shí)驗(yàn)中常用的抗體為單克隆抗體和多克隆抗體。單克隆抗體是一個(gè)B...
病理醫(yī)師日常工作中經(jīng)常說的一句話應(yīng)該就是“做個(gè)免疫組化吧”;不管是臨床醫(yī)師,還是患者,他們問的多的問題則是“為什么要做免疫組化?”病理醫(yī)師通過“特殊染色”來進(jìn)行細(xì)胞的識(shí)別。這一做法的依據(jù)是特定細(xì)胞和組織中的成分不同、則化學(xué)性質(zhì)不同,通過染色的方法則可以呈現(xiàn)不同顏色。不過,由于組織固定或儲(chǔ)存等,會(huì)造成相應(yīng)物質(zhì)的活性降低甚至消失,因而限制了特殊染色方法的應(yīng)用。隨著免疫學(xué)研究的進(jìn)展,根據(jù)抗原與相應(yīng)抗體間特異性結(jié)合的性質(zhì),則有了現(xiàn)在免疫組化的方法:不同細(xì)胞、不同組織中抗原有一定差異,抗體與被測(cè)組織中的特定抗原結(jié)合,進(jìn)而通過一定顯色方法將結(jié)合的抗體顯示出來。如有相應(yīng)顯色,則證實(shí)可能有被測(cè)抗原;無顯色則可...
確定cancer分期,免疫組化技術(shù)應(yīng)用于臨床可以進(jìn)行處理哦,英瀚斯生物為您處理。cancer分期是判斷預(yù)后的一個(gè)指標(biāo),與是否浸潤(rùn)、有無淋巴管或血管侵襲密切相關(guān),而通過免疫組化方法可以判斷cancer是否浸潤(rùn)、有無淋巴管或血管侵襲。層黏連蛋白和Ⅳ型膠原的單克隆抗體可以清楚的顯示基膜的主要成分,用于區(qū)分原位*和浸潤(rùn)*,一旦上皮性*突破基膜為浸潤(rùn),未突破基膜為原位;顯示血管和淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞的標(biāo)記物第八因子相關(guān)蛋白、D2-40等則可清楚顯示cancer對(duì)血管或淋巴管的浸潤(rùn)。因此對(duì)許多cancer的良惡性鑒別及有無血管或淋巴管浸潤(rùn),免疫組化結(jié)果作為主要的鑒別依據(jù)。病理報(bào)告中的免疫組化到底有什么作用?山東...
免疫組化技術(shù)有哪些應(yīng)用? 定位和定性是免疫組化比較大的優(yōu)勢(shì)。相比于其他蛋白檢測(cè)方法,免疫組化具有定位較直接準(zhǔn)確、定性靈敏度高,是定位檢測(cè)分析優(yōu)先方法,尤其對(duì)于有些因子的轉(zhuǎn)位研究十分有用。免疫組織化學(xué)的臨床應(yīng)用主要包括以下幾方面:惡性**的診斷與鑒別定性;確定轉(zhuǎn)移性惡性**的原發(fā)部位;對(duì)某類**進(jìn)行進(jìn)一步的病理分型;軟組織**診斷;為臨床提供治療方案的選擇;近年來,隨著免疫組織化學(xué)技術(shù)的發(fā)展和各種特異性抗體的出現(xiàn),使許多疑難**得到了明確診斷。免疫組化在**診斷和鑒別診斷中的實(shí)用價(jià)值受到了普遍的認(rèn)可,其在低分化或未分化**的鑒別診斷時(shí),準(zhǔn)確率可達(dá)50%-75%。 南京有靠譜的能...
免疫組化染色切片的好壞直接影響著病理醫(yī)生對(duì)其染色結(jié)果的判斷,進(jìn)而影響病理診斷,所以制作一張良好的免疫組化切片至關(guān)重要,它需要病理醫(yī)生與病理技師兩者間的相互協(xié)調(diào),密切配合和共同努力,病理醫(yī)生選擇抗體,設(shè)置對(duì)照,判讀結(jié)果,指導(dǎo)技術(shù);而技術(shù)人員進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作,保證染色質(zhì)量。在免疫組化切片的制作過程存在多個(gè)環(huán)節(jié),每一環(huán)節(jié)的失誤都可能影響檢測(cè)結(jié)果,如抗原保存,蛋白酶消化,增強(qiáng)技術(shù)及對(duì)抗體的管理、使用和試劑的濃度等等,因此制作一張高質(zhì)量的免疫組織化學(xué)切片是多方面相互配合的結(jié)果。免疫組化方法步驟是什么?云南病理免疫組化實(shí)驗(yàn)免疫組化分類中,免疫熒光方法,英瀚斯生物為您進(jìn)行介紹。一開始建立的免疫組織化學(xué)技術(shù)。它利...
免疫組化如何才能充分脫蠟? (1)蠟不溶于水,如果脫蠟不干凈,少許蠟存留于切片上,將會(huì)引起染色不均勻、陽性物時(shí)隱時(shí)現(xiàn)、真假難辨、背景染色增加等。為了解決上述的問題,切片在染色前必須徹底脫蠟,目前用于脫蠟的試劑主要是二甲苯,因它脫蠟力強(qiáng),脫蠟時(shí)間較短; (2)脫蠟的時(shí)間要根據(jù)季節(jié),室溫和試劑的新鮮謀面是在不同。如果在夏天,室溫較高,脫蠟試劑也新鮮,則脫蠟時(shí)間不需很多,3-5分鐘就已足夠。如果在冬天,室溫較低,脫蠟試劑也較陳舊,則脫蠟時(shí)間需要延長(zhǎng),10-20分鐘或更長(zhǎng)。 (3)當(dāng)天切的切片,燒烤2小時(shí)后進(jìn)行染色,切片帶有溫度進(jìn)行脫蠟這將可加速脫蠟的過程,如果預(yù)先切好烤好的...
免疫組化的發(fā)展路程?在臨床病理診斷中,免疫組織化學(xué)(IHC)是一種很重要的技術(shù)和手段,從20世紀(jì)70年代開始,免疫組化技術(shù)就應(yīng)用于病理診斷,對(duì)于診斷cancer、cancer分類、判斷預(yù)后產(chǎn)生了巨大的影響,同時(shí)也擴(kuò)展了人們對(duì)于各種疾病及cancer形成過程的認(rèn)識(shí),提高了病理診斷與研究水平。但是,隨著免疫組化的廣泛應(yīng)用,發(fā)現(xiàn)免疫組化技術(shù)存在一些局限性。深入研究免疫組化原理和技術(shù),必須熟悉各種抗體真陽性反應(yīng)部位,實(shí)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)室間免疫組化標(biāo)準(zhǔn)化,使免疫組化在病理診斷中發(fā)揮比較大的輔助作用。如果您有免疫組化相關(guān)的實(shí)驗(yàn),可以與我們英瀚斯生物進(jìn)行聯(lián)系。有沒有做免疫組化比較好的公司??jī)?nèi)蒙古免疫組化怎么樣免疫組化...
實(shí)驗(yàn)失敗常見問題分析有哪些: 為什么在顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)所有的切片都成陰性? 答:這種現(xiàn)象主要是由操作不當(dāng)導(dǎo)致,可能的原因有:1.染色操作不當(dāng),致使染色失敗;2.漏加一種抗體或者制備出的抗體沒有活性;3.緩沖液中有疊氮化鈉,抑制了酶的活性;4.復(fù)染或脫水劑使用不當(dāng)?shù)?。建議逐一排查,找到原因后重新進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。 在顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)所有的切片都成陽性,這是為什么?答:與上一個(gè)問題類似,出現(xiàn)的原因也是試驗(yàn)操作存在問題,可能的原因有:1.切片在染色過程中抗體過濃,或者干片了;使用的呈色底物溶液已變色或呈色反應(yīng)時(shí)間過長(zhǎng);3.抗體溫育的時(shí)間過長(zhǎng)等。 在顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)切片的背景很深,...
免疫組化在在病理診斷中,隨著各種抗體新的用途不斷被發(fā)現(xiàn)及越來越多的新型抗體的出現(xiàn),免疫組化在cancer診斷及鑒別診斷、分類、預(yù)后判斷等方面產(chǎn)生了重大的影響。由于免疫組化技術(shù)也存在一些局限性,因此,深入研究免疫組化原理和技術(shù),并努力實(shí)現(xiàn)規(guī)范化的操作,才能充分發(fā)揮免疫組化在病理的診斷及鑒別診斷、判斷預(yù)后、指導(dǎo)臨床醫(yī)療中的作用。 觀察組織切片中抗原的數(shù)量及其在組織中的分布情況,對(duì)抗原進(jìn)行定位、定性及定量的研究,稱為免疫組織化學(xué),由于抗原與抗體特異性結(jié)合,因此通過免疫組化使標(biāo)記抗體的顯色劑(酶、熒光素、同位素、金屬離子等等)顯色來確定組織細(xì)胞內(nèi)抗原(多肽和蛋白質(zhì))。IHC所用標(biāo)本主要為兩大...
免疫組化實(shí)驗(yàn)所用的組織和細(xì)胞標(biāo)本是什么樣的? 實(shí)驗(yàn)所用主要為組織標(biāo)本和細(xì)胞標(biāo)本兩大類,前者包括石蠟切片(病理大片和組織芯片)和冰凍切片,后者包括組織印片、細(xì)胞爬片和細(xì)胞涂片。其中石蠟切片是制作組織標(biāo)本**常用、**基本的方法,對(duì)于組織形態(tài)保存好,且能作連續(xù)切片,有利于各種染色對(duì)照觀察;還能長(zhǎng)期存檔,供回顧性研究;石蠟切片制作過程對(duì)組織內(nèi)抗原暴露有一定的影響,但可進(jìn)行抗原修復(fù),是免疫組化中優(yōu)先的組織標(biāo)本制作方法。 英瀚斯生物具有專業(yè)病理團(tuán)隊(duì),染色分析一站搞定! 做免疫組化的目的是什么?云南動(dòng)物組織免疫組化可以做什么 什么是免疫組化?免疫組化的原理是什么? 1、定義:用標(biāo)記...
在臨床應(yīng)用中,免疫組化還可以進(jìn)一步分類不同qi官與組織交界處cancer。由于重疊的特征,在一些組織qi官交界處的cancer,只憑組織學(xué)基礎(chǔ)對(duì)cancer進(jìn)行分類很困難。如胃腸道梭形細(xì)胞肉瘤是肌肉起源的平滑肌肉瘤,是間質(zhì)起源的胃腸道間質(zhì)瘤(GIST),還是神經(jīng)起源的神經(jīng)鞘瘤;同樣發(fā)生于組織交界處的cancer有睪丸胚胎cancer與精原細(xì)胞cancer,兩者較難區(qū)別,且醫(yī)療與預(yù)后明顯的不同,但用免疫組化檢測(cè)角蛋白就較易于區(qū)別:角蛋白陰性則為精原細(xì)胞cancer,而角蛋白陽性則為胚胎cancer。英瀚斯生物免疫組化,高效高質(zhì)量出結(jié)果。江蘇小鼠免疫組化檢測(cè) 實(shí)驗(yàn)失敗常見問題分析有哪些: ...
免疫組化的抗原修復(fù) 很多抗原的可視性可以通過抗原修復(fù)來提高,抗原修復(fù)可以打破福爾馬林固定時(shí)形成的蛋白質(zhì)交聯(lián),從而使被掩藏的抗原顯現(xiàn)出來??乖迯?fù)技術(shù)包括不同時(shí)間長(zhǎng)度的加熱或者利用蛋白酶來做酶消化,例如蛋白酶K,胰蛋白酶或胃蛋白酶。加熱的方法通常會(huì)用到微波爐,高壓鍋,蒸箱或水浴。將樣品在接近100°C高溫加熱20分鐘后再冷卻同等的時(shí)間。**常用的抗原修復(fù)液有a)檸檬酸鹽緩沖劑,pH6.0,b)Tris-EDTA,pH9.0和c)EDTA,pH8.0.如需要可用檸檬酸鹽緩沖劑做抗原修復(fù):檸檬酸鹽緩沖劑配方:10mM檸檬酸鈉,0.05%Tween-20,pH6.0或10mM檸檬酸,0.05...
免疫組化的抗原修復(fù) 很多抗原的可視性可以通過抗原修復(fù)來提高,抗原修復(fù)可以打破福爾馬林固定時(shí)形成的蛋白質(zhì)交聯(lián),從而使被掩藏的抗原顯現(xiàn)出來??乖迯?fù)技術(shù)包括不同時(shí)間長(zhǎng)度的加熱或者利用蛋白酶來做酶消化,例如蛋白酶K,胰蛋白酶或胃蛋白酶。加熱的方法通常會(huì)用到微波爐,高壓鍋,蒸箱或水浴。將樣品在接近100°C高溫加熱20分鐘后再冷卻同等的時(shí)間。**常用的抗原修復(fù)液有a)檸檬酸鹽緩沖劑,pH6.0,b)Tris-EDTA,pH9.0和c)EDTA,pH8.0.如需要可用檸檬酸鹽緩沖劑做抗原修復(fù):檸檬酸鹽緩沖劑配方:10mM檸檬酸鈉,0.05%Tween-20,pH6.0或10mM檸檬酸,0.05...
確定cancer分期,免疫組化技術(shù)應(yīng)用于臨床可以進(jìn)行處理哦,英瀚斯生物為您處理。cancer分期是判斷預(yù)后的一個(gè)指標(biāo),與是否浸潤(rùn)、有無淋巴管或血管侵襲密切相關(guān),而通過免疫組化方法可以判斷cancer是否浸潤(rùn)、有無淋巴管或血管侵襲。層黏連蛋白和Ⅳ型膠原的單克隆抗體可以清楚的顯示基膜的主要成分,用于區(qū)分原位*和浸潤(rùn)*,一旦上皮性*突破基膜為浸潤(rùn),未突破基膜為原位;顯示血管和淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞的標(biāo)記物第八因子相關(guān)蛋白、D2-40等則可清楚顯示cancer對(duì)血管或淋巴管的浸潤(rùn)。因此對(duì)許多cancer的良惡性鑒別及有無血管或淋巴管浸潤(rùn),免疫組化結(jié)果作為主要的鑒別依據(jù)。英瀚斯生物,組織包埋、切片、染色、免疫組...
免疫組化臨床應(yīng)用對(duì)“未分化”cancer的分類。未分化cancer包括cancer或肉瘤,在HE切片上由于cancer的“未分化”而缺少cancer細(xì)胞的起源特征不能分類,初步區(qū)分組織學(xué)類型用非特異性抗體,在其基礎(chǔ)上再選用特異性抗體做進(jìn)一步鑒定。如分化差的cancer可顯示Vimentin或S-100蛋白,有時(shí)淋巴瘤可以表達(dá)上皮膜抗原,一些黑色素瘤表現(xiàn)出角蛋白,這同時(shí)也強(qiáng)調(diào)了在cancer診斷中應(yīng)使用一組抗體而不是單個(gè)抗體。如果您有實(shí)驗(yàn)外包的需求,可以與我們南京英瀚斯生物進(jìn)行聯(lián)系,我們也有做免疫組化的服務(wù)!英瀚斯生物做免疫組化怎么樣?江西靠譜免疫組化怎么樣免疫組化中IHC vs ICC的區(qū)別。...
免疫組化的局限性。靈敏度高、精確性和特異性是一種理想的cancer標(biāo)記物必須具有的,但至今所發(fā)現(xiàn)的cancer標(biāo)記物還沒有能完全滿足這些標(biāo)準(zhǔn)。某些正常細(xì)胞也分泌一些cancer標(biāo)記物,因此cancer細(xì)胞學(xué)并不是單獨(dú)產(chǎn)生一種標(biāo)記物,即選用一組抗體比單一抗體更有利。在cancer診斷中評(píng)估免疫組化的局限性主要在抗體特異性和解釋方面。在免疫組化操作中都必須有適當(dāng)?shù)年栃耘c陰性對(duì)照,作為技術(shù)完整性質(zhì)量控制,如對(duì)照組被忽略或不理想時(shí),免疫組化染色的結(jié)果要謹(jǐn)慎對(duì)待,免疫組化的正確結(jié)果不僅要依靠技術(shù)步驟上規(guī)范化操作,而且有賴于正確的解釋,在報(bào)告免疫組化染色結(jié)果時(shí)不應(yīng)孤立地解釋,應(yīng)考慮到診斷與鑒別診斷、所應(yīng)用...
免疫組化原理及實(shí)驗(yàn)步驟——實(shí)驗(yàn)外包。眾所周知,抗體與抗原之間的結(jié)合具有高度的特異性。免疫組化正是利用這一特性,即先將組織或細(xì)胞中的某些化學(xué)物質(zhì)提取出來,以其作為抗原或半抗原去免疫實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,制備特異性抗體,再用這種抗體(第1抗體)作為抗原去免疫動(dòng)物制備第二抗體,并用某種酶(常用辣根過氧化物酶)或生物素等處理后再與前述抗原成分結(jié)合,形成抗原 - 一抗 - 二抗復(fù)合物,將抗原放大,由于抗體與抗原結(jié)合后形成的免疫復(fù)合物是無色的,因此,還必須借助于組織化學(xué)方法將抗原抗體反應(yīng)部位顯示出來。通過抗原抗體反應(yīng)及呈色反應(yīng),顯示細(xì)胞或組織中的化學(xué)成分,在顯微鏡下可清晰看見細(xì)胞內(nèi)發(fā)生的抗原抗體反應(yīng)產(chǎn)物,從而能夠在細(xì)...
做免疫組化時(shí)如何選擇一抗? 1、單克隆和多克隆抗體的選擇。由一種克隆產(chǎn)生的特異性抗體叫做單克隆抗體。單克隆抗體能目標(biāo)明確地與單一的特異抗原決定簇結(jié)合,就像導(dǎo)彈精確地命中目標(biāo)一樣。另一方面,即使是同一個(gè)抗原決定簇,在機(jī)體內(nèi)也可以由好幾種克隆來產(chǎn)生抗體,形成好幾種單克隆抗體混雜物,稱為多克隆抗體。在抗原抗體反應(yīng)中,一般單克隆抗體特異性強(qiáng),但親和力相對(duì)小,檢測(cè)抗原靈敏度相對(duì)就低;而多克隆抗體特異性稍弱,但抗體的親和力強(qiáng),靈敏度高,但易出現(xiàn)非特異性染色(可以通過封閉等避免)。 2、應(yīng)用范圍的選擇。有的一抗只能用于Westernblotting,或免疫組化、免疫熒光、免疫沉淀等;甚至標(biāo)明...
免疫組化結(jié)果背景染色較深的原因有哪些? (1)抗體濃度過高:一抗?jié)舛冗^高是常見的原因之一。解決辦法是,每次使用新抗體前應(yīng)當(dāng)對(duì)其工作濃度進(jìn)行測(cè)試,使每一抗體個(gè)體化,找到適合自己實(shí)驗(yàn)室的理想工作濃度,既使是即用型的抗體也應(yīng)如此,不能只簡(jiǎn)單的按說明書進(jìn)行染色。 (2)抗體孵育時(shí)間過長(zhǎng)或溫度較高:解決辦法是,嚴(yán)格執(zhí)行操作規(guī)程,比較好隨身佩帶報(bào)時(shí)表或報(bào)時(shí)鐘,及時(shí)提醒,避免因遺忘而造成時(shí)間延長(zhǎng)?,F(xiàn)在流行的二步法(Polymer)敏感性很高,要求一抗孵育的時(shí)間不是傳統(tǒng)的1小時(shí),而是30分鐘,因此,要根據(jù)染色結(jié)果進(jìn)行調(diào)整。 (3)DAB變質(zhì)和顯色時(shí)間太長(zhǎng):DAB比較好現(xiàn)用現(xiàn)配,如有沉...