對(duì)細(xì)胞活力的影響：一些研究表明，在陽離子脂質(zhì)體LipofectamineTM2000介導(dǎo)下雞TRPV6基因RNA干擾（RNAi）質(zhì)粒轉(zhuǎn)染入成骨細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)中，當(dāng)轉(zhuǎn)染前細(xì)胞融合達(dá)到90％以上，質(zhì)粒DNA與脂質(zhì)體比例為1:2.5時(shí)轉(zhuǎn)染效率比較高，并且在轉(zhuǎn)染后48h轉(zhuǎn)染效果比較好，對(duì)細(xì)胞的毒性作用較小3。在人肝瘤兩種細(xì)胞模型中，通過比較LipofectamineRnaimax和Genmute轉(zhuǎn)染劑發(fā)現(xiàn)，用基因***的細(xì)胞呈現(xiàn)熒光陰性對(duì)照siRNA的更高攝取，并且觀察到與基因轉(zhuǎn)染的細(xì)胞相對(duì)于脂質(zhì)積rnaimax的細(xì)胞具有較高的活力6。有研究使用兩種常見的RNA干擾（RNAi）轉(zhuǎn)染試劑DharmaFECT1和INTERFERin，在模擬轉(zhuǎn)染中使用非靶向siRNAs，結(jié)果表明這些試劑會(huì)引起HeLa細(xì)胞脂質(zhì)組的變化，但功能影響仍有待研究，這也暗示在RNAi實(shí)驗(yàn)中使用適當(dāng)?shù)哪M轉(zhuǎn)染對(duì)照非常重要。

與DNA轉(zhuǎn)染類似，RNA可以通過基于RNA的病毒或非病毒載體導(dǎo)入真核細(xì)胞。寧夏轉(zhuǎn)染試劑

    核細(xì)胞、關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞、間充質(zhì)干細(xì)胞（MSCs）：選擇兩種合成轉(zhuǎn)染試劑（陽離子脂質(zhì)商業(yè)試劑LipofectamineRNAiMAX和聚乙烯亞胺（PEI））以及兩種天然衍生轉(zhuǎn)染試劑（多糖殼聚糖（98%脫乙?；┖屯该髻|(zhì)酸（20%酰胺化）），用于將siRNA遞送到包括髓核細(xì)胞、關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞和間充質(zhì)干細(xì)胞在內(nèi)的原代間充質(zhì)細(xì)胞中。以甘油醛-3-磷酸脫氫酶（***DH）作為內(nèi)源性模型基因，在轉(zhuǎn)染后第3天和第6天評(píng)估由20nM或200nMsiRNA引起的沉默程度。除了沉默效率外，還評(píng)估了細(xì)胞毒性、DNA含量變化和細(xì)胞分化潛能等非特異性影響。在四種轉(zhuǎn)染試劑中，基于商業(yè)脂質(zhì)體的試劑在20nMsiRNA時(shí)是**有效的siRNA遞送試劑，其次是殼聚糖。使用陽離子脂質(zhì)體、殼聚糖和PEI轉(zhuǎn)染顯示出不同程度的活力和DNA含量下降，這取決于所評(píng)估的siRNA劑量和細(xì)胞類型，但與***DH敲低無關(guān)。一些對(duì)DNA含量的影響并不伴隨著活力的相應(yīng)變化。然而，細(xì)胞周期抑制或進(jìn)展的標(biāo)記基因（如p21和PCNA）的表達(dá)變化不能解釋DNA含量的變化。有趣的是，發(fā)現(xiàn)了***DH活性的非特異性上調(diào)，這***于軟骨細(xì)胞15。肝*細(xì)胞HepG2和：比較兩種人類細(xì)胞模型中兩種轉(zhuǎn)染劑，即基于脂質(zhì)體的Lipofectamine?RNAiMAX和基于聚合物的GenMute?。 福建廣州轉(zhuǎn)染試劑其結(jié)構(gòu)的一個(gè)共同特征是分子中存在許多帶正電的基團(tuán)，這些基團(tuán)被質(zhì)子化成帶正電的聚合物。

選擇**適合的RNA轉(zhuǎn)染試劑是一個(gè)復(fù)雜的過程，需要綜合考慮多個(gè)因素。以下是一些關(guān)鍵的考慮因素和方法來幫助選擇**適合的RNA轉(zhuǎn)染試劑。一、考慮轉(zhuǎn)染效率轉(zhuǎn)染效率是選擇RNA轉(zhuǎn)染試劑的重要指標(biāo)之一。較高的轉(zhuǎn)染效率可以確保更多的細(xì)胞成功攝取和表達(dá)RNA。實(shí)驗(yàn)細(xì)胞類型：不同的細(xì)胞類型對(duì)轉(zhuǎn)染試劑的敏感性可能不同。例如，一些細(xì)胞系可能更容易被某些轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染，而另一些細(xì)胞則可能對(duì)不同的試劑更敏感。在腎*細(xì)胞系786-O和ACHN中，微小RNA-1180（miR-1180）轉(zhuǎn)染后，通過實(shí)時(shí)定量PCR和Westernblot等方法檢測(cè)到p21mRNA和蛋白表達(dá)的變化，表明該轉(zhuǎn)染在腎*細(xì)胞中有一定的效果1。在乳腺*細(xì)胞系T47D和非*性細(xì)胞MCF-10A中，研究比較了Lipofectamine2000和PAMAMG5兩種轉(zhuǎn)染試劑對(duì)短RNA的轉(zhuǎn)染效率，結(jié)果顯示Lipofectamine的轉(zhuǎn)染效率明顯高于PAMAMdendrimer2。檢測(cè)方法：可以使用多種方法來檢測(cè)轉(zhuǎn)染效率，如熒光顯微鏡、流式細(xì)胞儀分析、實(shí)時(shí)定量PCR等。例如，在脂質(zhì)體方法用于modRNA轉(zhuǎn)染各種類型細(xì)胞的初步研究中，分別用RNAiMax及MessageMax將modGFP轉(zhuǎn)染入MEF細(xì)胞，應(yīng)用熒光顯微鏡、流式細(xì)胞分析儀檢測(cè)并比較兩種轉(zhuǎn)染試劑的轉(zhuǎn)染效率和蛋白表達(dá)效果5。

X射線發(fā)光成像技術(shù)結(jié)合了X射線成像的高空間分辨率和光學(xué)成像的高測(cè)量靈敏度，可用于小動(dòng)物成像。小動(dòng)物的X射線發(fā)光成像：MichaelCLun、WenxiangCong和Md.Arifuzzaman綜述了兩種類型的X射線發(fā)光計(jì)算斷層掃描（XLCT）成像方法，并介紹了他們正在建立的聚焦X射線發(fā)光斷層掃描（FXLT）成像系統(tǒng)7。該系統(tǒng)將開發(fā)基于機(jī)器學(xué)習(xí)的FXLT重建算法，并合成不同發(fā)射波長(zhǎng)的納米級(jí)磷光劑。四、近紅外高光譜成像技術(shù)近紅外高光譜成像技術(shù)在動(dòng)物飼料成分分析中具有應(yīng)用前景。NIRhyperspectralimagingforanimalfeedingredientapplications：P.Dantes探索了近紅外高光譜成像（NIRHSI）在動(dòng)物飼料中的應(yīng)用8。該技術(shù)能夠在像素級(jí)別提供樣品的化學(xué)成分信息，相比傳統(tǒng)的近紅外光譜具有優(yōu)勢(shì)。研究中使用CorningNIRHSI儀器預(yù)測(cè)了豆粕中的蛋白質(zhì)和油含量，并可視化了整個(gè)豆粕樣品中預(yù)測(cè)的蛋白質(zhì)分布。預(yù)處理方法如標(biāo)準(zhǔn)正態(tài)變量和Savitzky-Golay導(dǎo)數(shù)能夠有效提高校準(zhǔn)模型性能。此外，還將NIRHSI儀器與兩種商業(yè)單點(diǎn)近紅外光譜儀進(jìn)行了比較。在聚葡萄糖、精胺(PG)偶聯(lián)物和第四代聚酰胺樹狀大分子(PAMAM G4)的幫助下。

準(zhǔn)確控制脂質(zhì)體與核酸的比例是關(guān)鍵。通過實(shí)驗(yàn)確定比較好的脂質(zhì)體 - 核酸復(fù)合物比例，一般可以進(jìn)行梯度實(shí)驗(yàn)，從較低比例開始逐步增加，觀察轉(zhuǎn)染效率的變化。例如，不同類型的細(xì)胞對(duì)脂質(zhì)體和 RNA 或 DNA 的比例要求不同，像在轉(zhuǎn)染 HEK293 細(xì)胞時(shí)，可能 1:3（脂質(zhì)體：核酸）的比例比較合適，而對(duì)于較難轉(zhuǎn)染的原代細(xì)胞，可能需要適當(dāng)增加脂質(zhì)體的用量。

不同配方的脂質(zhì)體在轉(zhuǎn)染效率上有差異。根據(jù)細(xì)胞類型和實(shí)驗(yàn)?zāi)康倪x擇合適的脂質(zhì)體試劑。例如，一些脂質(zhì)體含有特殊的功能成分，如靶向基團(tuán)可以增強(qiáng)與特定細(xì)胞的結(jié)合，或者具有促進(jìn)內(nèi)吞體逃逸的成分，從而提高轉(zhuǎn)染效率。新型的脂質(zhì)體制劑不斷涌現(xiàn)，如含有可電離陽離子脂質(zhì)的脂質(zhì)體，在生理 pH 條件下呈電中性，減少與血清蛋白的相互作用，進(jìn)入酸性的內(nèi)體后帶正電，更有利于與內(nèi)體膜融合，釋放核酸，在提高轉(zhuǎn)染效率的同時(shí)降低細(xì)胞毒性。 RNA 轉(zhuǎn)染試劑在不同細(xì)胞類型中的效果存在明顯差異。武漢轉(zhuǎn)染試劑脂質(zhì)體

共轉(zhuǎn)染是將一種以上類型的核酸引入真核細(xì)胞的過程。寧夏轉(zhuǎn)染試劑

調(diào)節(jié)免疫刺激特性魚精蛋白穩(wěn)定的RNA還可以調(diào)節(jié)免疫刺激特性。魚精蛋白-RNA復(fù)合物可以刺激樹突狀細(xì)胞（DC），使其上調(diào)成熟標(biāo)志物，并以劑量依賴的方式產(chǎn)生促炎性細(xì)胞因子1213。此外，兩個(gè)DC亞群均以與IL-10有利的比率誘導(dǎo)T細(xì)胞增殖和IFNγ分泌1213。這表明魚精蛋白-RNA復(fù)合物可用于離體刺激人mDC和pDC，用于免疫***環(huán)境1213。四、靈活的RNA遞送系統(tǒng)平臺(tái)魚精蛋白作為RNA遞送穩(wěn)定劑，構(gòu)建了一個(gè)靈活且多功能的平臺(tái)?？梢愿鶕?jù)***目標(biāo)進(jìn)行調(diào)整，例如可以與靶向抗體融合實(shí)現(xiàn)精確遞送，或者被消化成細(xì)胞穿透肽以提高轉(zhuǎn)染效率，也可以與功能性聚合物非共價(jià)混合23。綜上所述，魚精蛋白作為RNA遞送穩(wěn)定劑，通過保護(hù)RNA免受降解、增強(qiáng)細(xì)胞穿透性、調(diào)節(jié)免疫刺激特性以及構(gòu)建靈活的遞送系統(tǒng)平臺(tái)等多種機(jī)制，在RNA遞送中發(fā)揮著重要作用。寧夏轉(zhuǎn)染試劑