納米顆粒遞送藥物并發(fā)揮功能的能力在很大程度上取決于它們被細(xì)胞攝取的機(jī)制。以蒲公英湯劑體為例，研究發(fā)現(xiàn)親溶酶體物質(zhì)能***抑制蒲公英湯劑體進(jìn)入細(xì)胞；巨胞飲抑制劑細(xì)胞松弛素D和阿米洛利能***降低蒲公英湯劑體的胞內(nèi)攝入，且呈現(xiàn)劑量依賴性，敲減Rac1和PAK1也有效地抑制其進(jìn)入細(xì)胞。這些結(jié)果提示蒲公英湯劑體通過內(nèi)吞進(jìn)入A549細(xì)胞且主要由巨胞飲介導(dǎo)26。同理，RNA轉(zhuǎn)染試劑在某些情況下也可能利用巨胞飲途徑進(jìn)入細(xì)胞。電穿孔轉(zhuǎn)染中的內(nèi)吞途徑電穿孔轉(zhuǎn)染是一種用于基因遞送的技術(shù)，在研究其機(jī)制時(shí)發(fā)現(xiàn)，用冰冷介質(zhì)處理或在電穿孔轉(zhuǎn)染前使用內(nèi)吞抑制劑處理三種不同的人類細(xì)胞系（HEK293、HCT116和HT29）。結(jié)果表明，用冰冷介質(zhì)、氯丙嗪或染料木黃酮處理會(huì)***降低所有三種細(xì)胞系的電穿孔轉(zhuǎn)染效率，但阿米洛利處理對(duì)電穿孔轉(zhuǎn)染效率影響不***。對(duì)于用小干擾RNA（siRNA）處理的細(xì)胞，只有敲低網(wǎng)格蛋白重鏈（CLTC）會(huì)導(dǎo)致所有三種細(xì)胞系的電穿孔轉(zhuǎn)染效率降低。這些數(shù)據(jù)表明，網(wǎng)格蛋白介導(dǎo)的內(nèi)吞作用在電穿孔轉(zhuǎn)染中起著重要作用27。Severino et al.進(jìn)行的研究也指出了陽離子脂質(zhì)作為基因遞送納米載體的潛在毒性。中國香港轉(zhuǎn)染試劑靠譜

    RNA轉(zhuǎn)染試劑在不同細(xì)胞類型中的效果存在***差異。以下將詳細(xì)闡述不同細(xì)胞類型對(duì)RNA轉(zhuǎn)染試劑效果的具體影響。腎*細(xì)胞系786-O和ACHN：微小RNA-1180（miR-1180）轉(zhuǎn)染對(duì)腎*細(xì)胞系786-O和ACHN生長有影響。實(shí)時(shí)定量（qRT）-PCR檢測(cè)顯示轉(zhuǎn)染miR-1180后，786-O和ACHN細(xì)胞中p21mRNA水平分別上調(diào)。Westernblot檢測(cè)表明p21蛋白表達(dá)趨勢(shì)與qRT-PCR結(jié)果相符，同時(shí)細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶（CDK）4、CDK6和CyclinD1蛋白的表達(dá)明顯下調(diào)。流式細(xì)胞術(shù)（FCM）結(jié)果顯示轉(zhuǎn)染miR-1180后，位于G0/G1期的細(xì)胞比例明顯增大，而位于S期和G2/M期的細(xì)胞比例明顯下降，表明細(xì)胞周期被阻滯在G0/G1期。MTS結(jié)果顯示轉(zhuǎn)染miR-1180后，兩種腎*細(xì)胞活力明顯降低。集落形成實(shí)驗(yàn)顯示miR-1180組的集落數(shù)數(shù)量明顯較少，表明細(xì)胞增殖能力降低1。HeLa細(xì)胞：兩種常見的RNA干擾（RNAi）轉(zhuǎn)染試劑DharmaFECT1和INTERFERin，在使用非靶向siRNAs的模擬轉(zhuǎn)染中，會(huì)引起HeLa細(xì)胞脂質(zhì)組的改變。一些脂質(zhì)對(duì)兩種可能化學(xué)性質(zhì)不同的轉(zhuǎn)染試劑都有反應(yīng)，而其他脂質(zhì)種類只對(duì)其中一種試劑有反應(yīng)。雖然這些脂質(zhì)組改變的功能影響尚待研究，但實(shí)驗(yàn)表明在RNAi實(shí)驗(yàn)中使用適當(dāng)?shù)哪M轉(zhuǎn)染對(duì)照非常重要，比較好輔以正交擾動(dòng)。 吉林轉(zhuǎn)染試劑優(yōu)惠超聲輔助轉(zhuǎn)染涉及在宿主細(xì)胞膜上制造微小的孔，以促進(jìn)核酸(包括DNA和RNA)的傳遞。

陽離子殼交聯(lián)的類Knedel納米粒子作為轉(zhuǎn)染試劑結(jié)合機(jī)制：陽離子殼交聯(lián)的類Knedel納米顆粒（cSCKs）含有不同百分比伯胺和叔胺，通過與siRNA結(jié)合來發(fā)揮作用18。含100％伯胺的cSCK在HeLa細(xì)胞中的沉默效率比較高，能夠抑制人血清中siRNA降解以及轉(zhuǎn)染HeLa和小鼠巨噬細(xì)胞系。與融合的GALA肽復(fù)合可以增強(qiáng)iNOS在較低siRNA濃度下的siRNA沉默，這被證明可以增強(qiáng)攝取后的內(nèi)體逃逸，進(jìn)一步說明其結(jié)合機(jī)制可能涉及與siRNA的緊密結(jié)合以及促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)。作用特點(diǎn)：cSCK-pa100在HeLa細(xì)胞、293T細(xì)胞和人支氣管上皮（HEK）細(xì)胞中顯示出比Lipofectamine2000更高的沉默效率，但在人支氣管上皮（BEAS-2B）細(xì)胞和人乳腺上皮（MCF10a）細(xì)胞中可比。在小鼠巨噬細(xì)胞系中，cSCK-pa100表現(xiàn)出更大的iNOS沉默，并提供了更好的保護(hù)免于血清降解，證明了其作為siRNA轉(zhuǎn)染劑的潛在用途。綜上所述，不同類型的陽離子RNA轉(zhuǎn)染試劑在結(jié)合RNA分子的機(jī)制上存在差異，主要涉及靜電相互作用、納米復(fù)合物形成以及與其他分子的協(xié)同作用等方面。這些差異導(dǎo)致了它們?cè)谵D(zhuǎn)染效率、細(xì)胞毒性、對(duì)不同細(xì)胞類型的適用性等方面的不同特點(diǎn)。

在人類多能干細(xì)胞衍生的心肌細(xì)胞（HPSC-CMs）中的應(yīng)用低轉(zhuǎn)染效率是實(shí)現(xiàn)HPSC-CMs在疾病建模和心臟修復(fù)研究中廣泛應(yīng)用的障礙。通過優(yōu)化四個(gè)基本參數(shù)，即血清補(bǔ)充劑、復(fù)制和轉(zhuǎn)染之間的時(shí)間、試劑與DNA比以及細(xì)胞密度，使用Promega的Viafect?轉(zhuǎn)染試劑能夠?qū)PSC-CMs轉(zhuǎn)染至約95%的效率28。盡管活力有所降低，但轉(zhuǎn)染后的HPSC-CMs仍保持了高純度和結(jié)構(gòu)完整性，確保了至少14天的轉(zhuǎn)染基因持續(xù)表達(dá)，為心臟相關(guān)疾病的研究開辟了新機(jī)遇。在C2C12細(xì)胞中的應(yīng)用C2C12細(xì)胞在肌肉領(lǐng)域***使用，但它們和原代成肌細(xì)胞一樣難以轉(zhuǎn)染，影響了下游實(shí)驗(yàn)。雖然自2015年以來超過95%的使用C2C12細(xì)胞的報(bào)告使用了一種金標(biāo)準(zhǔn)轉(zhuǎn)染劑（如Lipofectamine®），但有研究表明其效率低于30%。通過比較五種商業(yè)試劑（Lipofectamine®3000、Viafect?、Fugene®HD、C2C12CellAvalanche®和JetOPTIMUS®）在C2C12細(xì)胞中的轉(zhuǎn)染效率，發(fā)現(xiàn)通過優(yōu)化DNA:轉(zhuǎn)染劑比例和細(xì)胞密度，所有試劑都能達(dá)到超過60%的轉(zhuǎn)染效率，且對(duì)細(xì)胞生長和活力影響有限。這些試劑還能在C2C12細(xì)胞中轉(zhuǎn)染后高效生成GFP陽性的肌管，但在轉(zhuǎn)染siRNA和對(duì)原代肌肉細(xì)胞的轉(zhuǎn)染中表現(xiàn)出較低效率和較高毒性3。PHP是由天然來源的羥基脯氨酸(如膠原蛋白、明膠和其他蛋白質(zhì))制成的，是一個(gè)用作基因載體的聚酯。

    核細(xì)胞、關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞、間充質(zhì)干細(xì)胞（MSCs）：選擇兩種合成轉(zhuǎn)染試劑（陽離子脂質(zhì)商業(yè)試劑LipofectamineRNAiMAX和聚乙烯亞胺（PEI））以及兩種天然衍生轉(zhuǎn)染試劑（多糖殼聚糖（98%脫乙?；┖屯该髻|(zhì)酸（20%酰胺化）），用于將siRNA遞送到包括髓核細(xì)胞、關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞和間充質(zhì)干細(xì)胞在內(nèi)的原代間充質(zhì)細(xì)胞中。以甘油醛-3-磷酸脫氫酶（***DH）作為內(nèi)源性模型基因，在轉(zhuǎn)染后第3天和第6天評(píng)估由20nM或200nMsiRNA引起的沉默程度。除了沉默效率外，還評(píng)估了細(xì)胞毒性、DNA含量變化和細(xì)胞分化潛能等非特異性影響。在四種轉(zhuǎn)染試劑中，基于商業(yè)脂質(zhì)體的試劑在20nMsiRNA時(shí)是**有效的siRNA遞送試劑，其次是殼聚糖。使用陽離子脂質(zhì)體、殼聚糖和PEI轉(zhuǎn)染顯示出不同程度的活力和DNA含量下降，這取決于所評(píng)估的siRNA劑量和細(xì)胞類型，但與***DH敲低無關(guān)。一些對(duì)DNA含量的影響并不伴隨著活力的相應(yīng)變化。然而，細(xì)胞周期抑制或進(jìn)展的標(biāo)記基因（如p21和PCNA）的表達(dá)變化不能解釋DNA含量的變化。有趣的是，發(fā)現(xiàn)了***DH活性的非特異性上調(diào)，這***于軟骨細(xì)胞15。肝*細(xì)胞HepG2和：比較兩種人類細(xì)胞模型中兩種轉(zhuǎn)染劑，即基于脂質(zhì)體的Lipofectamine?RNAiMAX和基于聚合物的GenMute?。 用二乙基氨基乙基修飾，右旋糖酐鏈的酰胺化很容易被質(zhì)子化，這使得它可以自組裝成帶負(fù)電荷核酸的納米顆粒。江西DOTAP 轉(zhuǎn)染試劑

選擇合適的轉(zhuǎn)染試劑可能取決于幾個(gè)因素，包括轉(zhuǎn)染核酸的類型和轉(zhuǎn)染的復(fù)雜性(單轉(zhuǎn)染或共轉(zhuǎn)染)。中國香港轉(zhuǎn)染試劑靠譜

非人靈長類動(dòng)物是神經(jīng)科學(xué)研究的重要?jiǎng)游锬Ｐ?，超高?chǎng)磁共振腦成像技術(shù)在非人靈長類動(dòng)物研究中具有重要作用。非人靈長類動(dòng)物超高場(chǎng)磁共振腦成像技術(shù)進(jìn)展：徐斌、高陽、王菁綜述了非人靈長類動(dòng)物超高場(chǎng)磁共振腦成像應(yīng)用、面臨的技術(shù)挑戰(zhàn)以及當(dāng)前的技術(shù)解決方案等3。磁共振腦成像技術(shù)是目前**主要的非侵入式大腦神經(jīng)信號(hào)探測(cè)手段，非人靈長類動(dòng)物磁共振腦成像研究對(duì)于深入理解磁共振腦成像生理機(jī)制、研發(fā)定量生理探測(cè)技術(shù)、神經(jīng)科學(xué)基礎(chǔ)研究、心理學(xué)以及臨床病理機(jī)制研究等都具有重要作用。但非人靈長類動(dòng)物磁共振腦成像面臨著缺少適配商用系統(tǒng)、需要更高成像分辨率以及對(duì)多樣化動(dòng)物實(shí)驗(yàn)需求兼容性等技術(shù)挑戰(zhàn)。超高場(chǎng)磁共振具有高信噪比、高腦血氧水平依賴信號(hào)檢測(cè)靈敏度和亞毫米級(jí)高分辨率成像能力等優(yōu)勢(shì)，有潛力應(yīng)用于非人靈長類動(dòng)物超高分辨率腦成像研究。中國香港轉(zhuǎn)染試劑靠譜