熒光染料的作用過程吸收激發(fā)光：當(dāng)熒光染料暴露在特定波長的激發(fā)光下時，染料分子中的電子吸收光子的能量，從基態(tài)躍遷到激發(fā)態(tài)。這個過程非常迅速，通常在飛秒到皮秒的時間尺度內(nèi)完成25。激發(fā)態(tài)的電子弛豫：處于激發(fā)態(tài)的電子不穩(wěn)定，會通過各種方式釋放能量，回到基態(tài)。這個過程包括內(nèi)部轉(zhuǎn)換和振動弛豫等。內(nèi)部轉(zhuǎn)換是指激發(fā)態(tài)的電子通過無輻射躍遷的方式回到能量較低的激發(fā)態(tài)，而振動弛豫則是指激發(fā)態(tài)的電子通過與周圍分子的碰撞等方式，將多余的能量轉(zhuǎn)化為分子的振動能，從而使電子處于激發(fā)態(tài)的比較低振動能級35。發(fā)射熒光：當(dāng)激發(fā)態(tài)的電子回到基態(tài)時，會發(fā)射出熒光。熒光的波長通常比激發(fā)光的波長更長，這是因為在發(fā)射熒光的過程中，電子釋放的能量一部分以熱能的形式散失，導(dǎo)致發(fā)射的光子能量較低，波長較長。不同類型熒光染料的穩(wěn)定性直接關(guān)系到成像質(zhì)量。中國澳門水溶熒光染料

神經(jīng)特異性熒光染料：噁嗪類熒光染料YQN-3能夠精細定位并識別出動物（大鼠）的喉返神經(jīng)，從而在術(shù)中保留這些神經(jīng)的完整性8。這表明該類熒光染料對特定的神經(jīng)組織具有較高的特異性。良好的穩(wěn)定性可以確保在動物成像過程中始終保持對特定神經(jīng)部位的準確識別和定位，為手術(shù)操作提供可靠的指導(dǎo)。如果穩(wěn)定性不佳，可能會導(dǎo)致成像部位的特異性降低，出現(xiàn)錯誤定位或無法清晰顯示目標神經(jīng)的情況。熒光染料標記的氧化鐵磁性納米顆粒（MNP）：使用雙重?zé)晒馊玖蠘擞浀腗NP，其中附著在**（DY-730）上的染料在小鼠施用后的一天，其熒光在肝臟和脾臟中較為突出，但此后的時間點不明顯。相反，在體內(nèi)粘附到PEG涂層上的染料Dy-555的熒光較為穩(wěn)定14。這說明不同部位的熒光染料穩(wěn)定性差異會影響對特定***（如肝臟和脾臟）的成像特異性。穩(wěn)定性好的染料能夠更準確地反映目標***的情況，而穩(wěn)定性差的染料可能會導(dǎo)致成像結(jié)果的不確定性，影響對動物體內(nèi)特定部位的準確判斷?？贵w熒光染料脂質(zhì)通過將大腸桿菌與有機熒光染料尼羅紅共孵育，在超分辨率顯微鏡下實現(xiàn)了大腸桿菌細胞壁的熒光標記。

化學(xué)穩(wěn)定性方面的差異芳香環(huán)融合BOPHYs：具有6,5,6,6,5,6-六環(huán)稠合環(huán)的新型紅色α-苯并稠合BOPHY和具有5,5,6,6,5,5-六環(huán)稠合環(huán)的β-噻吩稠合BOPHY，與母體BOPHY相比，具有很高的化學(xué)穩(wěn)定性1116。這些染料通過多種表征手段，如NMR光譜、HRMS、X射線結(jié)構(gòu)分析、循環(huán)伏安法和光學(xué)測量等，證實了其化學(xué)穩(wěn)定性。芳環(huán)稠合導(dǎo)致HOMO能級顯著提高，有效擴展了π共軛，賦予了這些染料獨特的結(jié)構(gòu)和吸引人的光物理性質(zhì)，同時也提高了其化學(xué)穩(wěn)定性。對稱雙偶氮苯紅色染料：兩種新型對稱雙偶氮苯紅色染料末端帶有吸電子或給電子基團，具有良好的溶解性、優(yōu)異的化學(xué)和熱穩(wěn)定性。在溶液和固態(tài)下均具有熒光性13。這表明特定的化學(xué)結(jié)構(gòu)設(shè)計可以使熒光染料具有較高的化學(xué)穩(wěn)定性。

在近紅外二區(qū)的應(yīng)用潛力動態(tài)成像：通過擴展π共軛和增強分子內(nèi)電荷轉(zhuǎn)移效應(yīng)，開發(fā)了一系列新的基于氧雜蒽的近紅外二區(qū)染料，如VIXs。其中，VIX-4具有在1210nm的熒光發(fā)射和高亮度，可用于動態(tài)成像小鼠的血液循環(huán)，具有高時空分辨率，能夠區(qū)分動脈和靜脈，并測量血流體積22。***成像研究：設(shè)計構(gòu)建了若干基于氧雜蒽骨架的近紅外二區(qū)熒光團（命名為VIX），開展了其在***成像中的應(yīng)用研究。例如，探針VIX-S在水和固體形式都能發(fā)出近紅外二區(qū)熒光（約1057nm），且展現(xiàn)了較好的抗淬滅效果、化學(xué)穩(wěn)定性和光穩(wěn)定性，成為推薦的生物成像探針?；谔结榁IX-S的小鼠***成像研究表明，該探針具有特異性地在脾臟中積累的特點，能夠?qū)?**小鼠的脾臟進行成像，為動物***的脾臟研究提供新的工具25。綜上所述，新型近紅外氧雜蒽熒光染料在細胞熒光成像中具有避免生物組織自發(fā)熒光干擾、良好的細胞靶向熒光標記效果、用于特定細胞和疾病的檢測與成像、支持超分辨率成像以及在近紅外二區(qū)的應(yīng)用潛力等廣闊的應(yīng)用前景。使用雙重?zé)晒馊玖蠘擞浀难趸F磁性納米顆粒（MNP），研究熒光檢測在程度上可以反映其在生物動物中的命運。

新型近紅外氧雜蒽熒光染料優(yōu)勢：具有操作簡單、靈敏度高和實時等優(yōu)點，且近紅外熒光成像能夠有效避免生物組織自發(fā)熒光干擾。例如，設(shè)計和合成的新型近紅外氧雜蒽熒光染料NXD-1～NXD-3，其中NXD-3的光譜更為紅移，比較大吸收波長和發(fā)射波長分別為611nm和759nm，具有良好的細胞線粒體靶向熒光標記效果2。應(yīng)用場景：細胞熒光成像，特別是細胞線粒體的熒光標記。綜上所述，不同類型的熒光染料在生物成像領(lǐng)域各有其獨特的優(yōu)勢和應(yīng)用場景。在實際應(yīng)用中，需要根據(jù)具體的研究需求選擇合適的熒光染料，以優(yōu)化生物醫(yī)學(xué)成像的靈敏度和準確性。引入 “醛功能化” 策略，以同時增強近紅外熒光團的光穩(wěn)定性和線粒體固定化。蛋白質(zhì)熒光染料發(fā)射

不同結(jié)構(gòu)修飾的噁嗪衍生物熒光染料在神經(jīng)與其他組織的對比度上也存在差異。中國澳門水溶熒光染料

不同類型熒光染料的穩(wěn)定性直接關(guān)系到成像質(zhì)量：穩(wěn)定性好的熒光染料能夠在動物成像過程中保持較強的熒光信號，減少信號的波動和衰減，從而提高成像的質(zhì)量和清晰度。例如，神經(jīng)特異性熒光染料YQN-3在特定時間內(nèi)能夠?qū)游锏纳窠?jīng)組織進行高特異性成像，其良好的穩(wěn)定性有助于獲得準確的神經(jīng)結(jié)構(gòu)圖像，為手術(shù)操作提供可靠的依據(jù)8。而穩(wěn)定性差的熒光染料可能會導(dǎo)致成像模糊、信號不穩(wěn)定，影響對動物體內(nèi)結(jié)構(gòu)和功能的準確判斷。對成像準確性的影響：熒光染料的穩(wěn)定性差異還會影響成像的準確性。穩(wěn)定性好的染料能夠在不同的實驗條件下保持相對穩(wěn)定的性能，減少因染料自身變化而帶來的誤差。例如，在對動物特定***或組織進行成像時，穩(wěn)定性高的熒光染料能夠更準確地反映目標部位的真實情況，避免因染料的不穩(wěn)定而導(dǎo)致錯誤的成像結(jié)果。相反，穩(wěn)定性差的染料可能會使成像結(jié)果出現(xiàn)偏差，影響對動物體內(nèi)生理和病理過程的準確理解。中國澳門水溶熒光染料