microRNA脂質(zhì)體

microRNA是真核細胞中發(fā)現(xiàn)的短(約22mer)非編碼RNA，通過結合互補的mRNA序列發(fā)揮生物調(diào)節(jié)劑的作用。miRNA以初級miRNA的形式從其編碼的核基因轉錄，其長度為數(shù)百個核苷酸。RNaseIII酶，Drosha，將初級miRNA加工成pre-miRNA(長度為70個核苷酸)，攜帶一個特征的發(fā)夾環(huán)。然后pre-miRNA移動到細胞質(zhì)中，在那里RNaseIII酶Dicer產(chǎn)生成熟的miRNA和乘客鏈。***，成熟的miRNA被整合到RNAi誘導的沉默復合體中，以降解它們的靶mRNA。由DOTMA、膽固醇和vitaminETPGS1k琥珀酸鹽組成的陽離子脂質(zhì)體被證明可以有效遞送pre-miRNA-133b,導致A549非小肺*細胞中成熟miRNA-133b的表達比對照組細胞增加2.3倍，Mcl-1蛋白的表達減少1.8倍。經(jīng)尾靜脈注射含有pre-miRNA-133b的陽離子脂質(zhì)體(1.5mg/kg)的ICR小鼠肺組織中成熟miRNA-133b的表達比接受含有紊亂的pre-mirna的陽離子脂質(zhì)體的小鼠高52倍。 主動藥物裝載?法，也稱為遠程藥物裝載?法，涉及在空脂質(zhì)體產(chǎn)?后裝載藥物制劑。納米脂質(zhì)體載藥給藥

主動藥物裝載?法，也稱為遠程藥物裝載?法，涉及在空脂質(zhì)體產(chǎn)?后裝載藥物制劑。pH值或離?濃度的跨膜梯度是促進藥物跨膜擴散進?脂質(zhì)體內(nèi)核的驅(qū)動?。藥物包載過程?約需要5～30分鐘，可達到較?的裝載效率(90%以上)。Doxil是基于硫酸銨跨膜梯度的藥物負載的典型例?。由于脂質(zhì)體核?的(NH4)2SO4濃度遠?于外界介質(zhì)，具有?滲透性和?醇-緩沖分配系數(shù)的DOX-NH2中性分?通過脂質(zhì)雙分?層擴散，具有纖維狀結晶形式的(DOX-NH3)2SO4沉淀在脂質(zhì)體的核?產(chǎn)?。(DOX-NH3)2SO4的低溶解度使脂質(zhì)體內(nèi)滲透壓降?比較低，從?保持脂質(zhì)體的完整性。對于Myocet產(chǎn)品臨床使?前先加載DOX?？缒H梯度是DOX加載的驅(qū)動?。Myocet在?個包裝中有三瓶，包括1號瓶:：阿霉素HCl紅?凍?粉；2號瓶：脂質(zhì)體懸浮液溶于pH4-5300mM 檸檬酸中；3號瓶：碳酸鈉緩沖液。臨床使?前將空脂質(zhì)體(2號瓶)注射到碳酸鈉緩沖液(3號瓶)中，調(diào)節(jié)外脂質(zhì)體介質(zhì)pH值為7-8，然后與DOX?理鹽?溶液混合。脂質(zhì)體介質(zhì)中中性形式的DOX分?(pKa=8.3)穿過脂質(zhì)體雙分?層，在囊泡內(nèi)部形成獨特的DOX-檸檬酸復合物。DOX-檸檬酸鹽復合物呈現(xiàn)成束的柔性纖維，歸因于DOX單體具有相對平坦的環(huán)形堆疊在?起形成纖維，負載效率可達95%以上。供應脂質(zhì)體載藥影像脂質(zhì)體配方中各脂類的毒性的研究。

脂質(zhì)體靶向遞送中葉酸配體修飾脂質(zhì)與生物活性小分子(如葉酸)的結合已被研究用于靶向遞送核酸。例如，由葉酸與1-棕櫚酰-2-油酰-sn-甘油-3-非共價結合而形成的脂質(zhì)體乙基磷脂膽堿:膽固醇脂質(zhì)體顯著提高胸苷激酶質(zhì)粒DNA轉染效率，抑制體外TSA和SCC7細胞生長。這些葉酸相關的脂質(zhì)體在移植SCC7**的小鼠中顯示出較高的抗**效果。在另一種方法中，葉酸標記的陽離子脂質(zhì)體與小牛胸腺DNA復合物***巨噬細胞，與不含葉酸的普通陽離子脂質(zhì)體相比，顯示出更高的DNA葉酸受體表達細胞的遞送。在荷瘤小鼠中，與不含葉酸的脂質(zhì)體相比，葉酸標記的脂質(zhì)體誘導干擾素-g和白細胞介素-6的產(chǎn)生，延長了存活時間。甘草次酸已被用于靶向肝細胞肝*細胞，基于一項研究表明，與鄰近的非**肝細胞相比，甘草次酸的結合靶點蛋白激酶C在肝細胞*細胞表面的表達更高。合成了甘次酸-次酸-聚乙二醇-聚膽甾醇綴合物,并將其與DOTAP和膽固醇配制成陽離子脂質(zhì)體。這些脂質(zhì)體與表達GFP的質(zhì)粒DNA形成復合物的能力更高，并且與缺乏甘次酸的對照陽離子Lipo脂質(zhì)體相比，能增強質(zhì)粒DNA轉染至肝*細胞的能力。

遞送核酸的脂質(zhì)體中的脂質(zhì)成分脂質(zhì)體的脂質(zhì)組成可以影響陽離子脂質(zhì)的結構性質(zhì)及其轉染效率。由3β[N(N',N'Dimethylaminoethane)carbamoyl]cholesterol,(DC-Chol)和DOPE組成的陽離子脂質(zhì)體被認為是高效基因傳遞的代表性脂質(zhì)體。對于質(zhì)粒DNA傳遞，DC-Chol與DOPE的***摩爾比被發(fā)現(xiàn)為1:2。質(zhì)粒DNA的轉染效率隨著DC-Chol與質(zhì)粒DNA質(zhì)量比的增大而降低，比較高轉染效率為3:1。**近的一項研究報道了不同的內(nèi)吞途徑對陽離子脂質(zhì)體組成的可能依賴性。由質(zhì)粒DNA加DC-Chol或DOPE為基礎的陽離子脂質(zhì)組成的脂質(zhì)體優(yōu)先通過內(nèi)吞作用進入細胞，而包括1,2-二酰-3-三甲基丙烷胺(DOTAP)或DistearoylPhosphatidylcholine(DSPC)為基礎的陽離子脂質(zhì)體的脂質(zhì)體則被非特異性的液相巨胞飲作用所吸收。聚乙二醇在免疫脂質(zhì)體中起到了重要作用。

脂質(zhì)體靶向遞送中**核靶向功能已知**具有核靶向功能。為了增強質(zhì)粒DNA的核轉運，**與PAMAM樹狀大分子偶聯(lián)，與DOPE(1:1)混合形成脂質(zhì)體。與聚亞胺相比，PAMAM-**/DOPE陽離子脂質(zhì)體增強了HEK293細胞中質(zhì)粒DNA的表達，并顯示出較低的細胞毒性(m.w.25,000)。總的來說，靶向配體的修飾可以幫助實現(xiàn)特異性靶向，避免非特異性分布到肝臟和其他組織。然而，從商業(yè)化的角度來看，配體定制技術仍然面臨許多障礙，包括需要更流線型的制造工藝和改進的質(zhì)量控制。增強成像性能，熒光標記的定量分析，探索藥物的藥代動力學以及研究藥物的靶向性等。安徽脂質(zhì)體載藥核酸

脂質(zhì)體表?修飾的作用。納米脂質(zhì)體載藥給藥

脂質(zhì)體中輔助脂質(zhì)中性脂也經(jīng)常被用作陽離子脂質(zhì)體的助手。例如，已知中性脂質(zhì)1,2-二油基-asn-甘油-3-磷酸乙醇胺(DOPE)在胞吞作用后參與內(nèi)體逃逸，膽固醇(一種內(nèi)源性脂質(zhì))可以插入脂質(zhì)雙層之間以增加納米顆粒的剛性。為了增加體內(nèi)穩(wěn)定性，一種非常普遍的方法包括插入聚乙二醇(PEG)偶聯(lián)的中性脂質(zhì)，對納米顆粒進行聚乙二醇化。此外，中性輔助性脂質(zhì)，如DOPE已被用于提高陽離子脂質(zhì)體的遞送效率。DOPE提高核酸遞送效率的生物物理機制仍在研究中。**近的一項研究報道，含有DOPE的脂質(zhì)單層呈現(xiàn)不規(guī)則的豆狀結構域，而缺乏DOPE的脂質(zhì)單層呈現(xiàn)均勻的表面。除DOPE外，其他中性脂質(zhì)，包括N-十二烷?；“彼?，已被報道可提高陽離子脂質(zhì)體的基因遞送效率。納米脂質(zhì)體載藥給藥