檢查具備條件受檢者，經(jīng)歷一段經(jīng)常排精過(guò)程后，禁房事5－7天（上次排精到取標(biāo)本間隔時(shí)間至少不得少于100小時(shí)）；[1]備大口有蓋清潔干燥容器一個(gè)，以**方式獲取精液，一次全部射入容器，蓋上蓋，記錄標(biāo)本離體時(shí)間；貼身保溫，30分鐘內(nèi)送到化驗(yàn)室，并向檢驗(yàn)員提供標(biāo)本取出時(shí)間。精液常規(guī)觀察：精液總?cè)萘浚ê辽踊顒?dòng)情況，精子密度（個(gè)/毫升），精液液化時(shí)間（標(biāo)本取出到精液液化的時(shí)間），不動(dòng)精子（個(gè)/高倍視野）等。見不動(dòng)精子，須染色方可區(qū)分：不活動(dòng)的精子、死精子、未成熟精子等。找不到精子必須離心后檢驗(yàn)，仍然找不到精子；方可報(bào)告無(wú)精。經(jīng)三次取樣化驗(yàn)，結(jié)果仍然找不到精子方可確認(rèn)無(wú)精子癥。精子分析儀參數(shù)，精子頭側(cè)擺幅度（ALH）?：精子頭關(guān)于其平均路徑的側(cè)向位移幅度。上海馬精子分析DAP

方法:使用兩種已知濃度的質(zhì)控乳膠珠溶液,1份濃度為(35±5)×106/ml,另1份濃度為(18.0±2.5)×106/ml,評(píng)價(jià)4種計(jì)數(shù)方法的準(zhǔn)確性和精確性,并比較4種方法計(jì)數(shù)精液的結(jié)果。結(jié)果:計(jì)數(shù)乳膠珠時(shí),CellVU計(jì)數(shù)池的結(jié)果**接近已知濃度,分別為(39.70±4.76)、(19.09±2.02)×106/ml,變異系數(shù)(CV)值分別為12.80%和10.58%;血細(xì)胞計(jì)數(shù)池和Makler計(jì)數(shù)池結(jié)果均高于已知濃度,前者為(44.84±4.86)×106/ml、(21.04±1.87)×106/ml,CV值分別為10.81%和8.89%,后者為(52.36±7.78)×106/ml、(24.54±3.67)×106/ml,CV值分別為14.86%和14.96%;CASA系統(tǒng)結(jié)果低于已知濃度,為(28.53±2.06)、(14.62±0.95)×106/ml,但CV值比較低,分別為7.22%和6.50%。計(jì)數(shù)精液時(shí),CellVU計(jì)數(shù)池與CASA系統(tǒng)結(jié)果差異無(wú)***性(P=0.71),分別為(45.28±34.52)、(41.96±31.93)×106/ml,血細(xì)胞計(jì)數(shù)池和Makler計(jì)數(shù)池結(jié)果差異無(wú)***性(P=0.14),分別為(76.98±59.90)、(63.89±53.84)×106/ml,CellVU計(jì)數(shù)池、CASA系統(tǒng)與血細(xì)胞計(jì)數(shù)池、Makler計(jì)數(shù)池結(jié)果間差異***(P<0.05或P<0.01)。結(jié)論:計(jì)數(shù)精液時(shí),CASA系統(tǒng)與CellVU計(jì)數(shù)結(jié)果差異無(wú)***性。各實(shí)驗(yàn)室可選擇合適的手工或CASA計(jì)數(shù)方法。北京密度精子分析負(fù)相差精子分析儀能分析與精子運(yùn)動(dòng)功能相關(guān)的各種參數(shù)。

精子手工計(jì)數(shù)原理及操作方法1.原理：將精液用適當(dāng)?shù)南♂屢鹤饕欢肯♂尯螅靹蜃⑷胗?jì)數(shù)池內(nèi)計(jì)數(shù)，再算出每毫升精液中精子數(shù)。2.方法（按照***版第四版《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》）1).于小試管內(nèi)加精子稀釋液0.38ml,取液化精液20μl,加入稀釋液內(nèi)混勻。2).充分搖勻后,滴入改良Neubauer計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)池內(nèi),靜置1~2分鐘,待精子下沉后,以精子頭部作為基準(zhǔn)進(jìn)行計(jì)數(shù)。3.計(jì)算1).如每個(gè)**中方格內(nèi)精子少于10個(gè),應(yīng)計(jì)數(shù)所有25個(gè)中方格內(nèi)的精子數(shù)。2).如每個(gè)**中方格內(nèi)精子在10~40個(gè),應(yīng)計(jì)10個(gè)中方格內(nèi)的精子數(shù)。3).如每個(gè)**中方格內(nèi)精子多于40個(gè),應(yīng)計(jì)數(shù)5個(gè)中方格內(nèi)的精子數(shù)。公式：精子數(shù)=計(jì)數(shù)結(jié)果/計(jì)數(shù)中方格×25×1/計(jì)數(shù)池高度×20×103/ml=計(jì)數(shù)結(jié)果/計(jì)數(shù)中方格×1/計(jì)數(shù)池高度×5×103/ml

通過(guò)結(jié)果的生物學(xué)意義對(duì)結(jié)果質(zhì)量進(jìn)行評(píng)估?當(dāng)所有具生物學(xué)意義的參數(shù)在測(cè)試中表現(xiàn)出較小的可變性時(shí)則方法學(xué)可變性亦較低方法學(xué)可變性低則結(jié)果質(zhì)量就高。CASA系統(tǒng)獲得的數(shù)值與直觀評(píng)估獲得的數(shù)值進(jìn)行分析和比較在精子數(shù)量和綜合運(yùn)動(dòng)性上具有較好的相關(guān)性而·131·中國(guó)優(yōu)生與遺傳雜志2002第10卷第6期DOI:10．13404／j．cnki．cjbhh．2002．06．091在前向運(yùn)動(dòng)精子百分率上的相關(guān)性較低］。Holt等報(bào)道了在常規(guī)實(shí)驗(yàn)條件下采用五種不同的CASA系統(tǒng)對(duì)**參數(shù)值進(jìn)行比較，其結(jié)果為：采用同一個(gè)測(cè)定池由不同的操作者測(cè)定**參數(shù)；變異系數(shù)（CV）是29％?活動(dòng)精子比率的CV為24％?平均路徑速度（VAP）的CV為43?85％。作者們指出該分析結(jié)果不應(yīng)看作是不同CASA系統(tǒng)間的工作情況的比較?實(shí)際上它揭示了操作者的錯(cuò)誤是差異的主要來(lái)源。目前有待于尋找進(jìn)一步的標(biāo)準(zhǔn)來(lái)評(píng)估CASA變量的結(jié)果質(zhì)量。精子***的生物學(xué)功能是使卵細(xì)胞授精?因此用夫婦中的授精結(jié)果來(lái)考察精子運(yùn)動(dòng)性是合理的?只有在該基礎(chǔ)上能夠確定活動(dòng)性參數(shù)的重要性。輔助生殖技術(shù)（授精I(xiàn)VF）的發(fā)展使檢測(cè)精子質(zhì)量與各參數(shù)間的關(guān)系的比較成為可能；同樣可以驗(yàn)證CASA測(cè)定結(jié)果與精子真實(shí)質(zhì)量間的相關(guān)性有利于CASA結(jié)果質(zhì)量的提高。不同品牌CASA分析的結(jié)果差異較大，因此，更高效精確的精液質(zhì)量檢測(cè)系統(tǒng)對(duì)促進(jìn)男科學(xué)發(fā)展具有重要的意義。

[臨床意義]1.若數(shù)日未**、且精液量少于1.5ml者為不正常，說(shuō)明精囊或前列腺有病變；若精液量減至數(shù)滴，甚至排不出，稱為無(wú)精液癥，見于生殖系統(tǒng)的特異性***，如結(jié)核、淋病和非特異性炎癥等。2．若精液量過(guò)多(一次超過(guò)8ml)，則精子被稀釋而相應(yīng)減少，有礙生育。二、顏色檢查[正常參考值]灰白或乳白色，久未**者可呈淺黃色。[臨床意義]1．黃色或棕色膿樣精液：見于精囊炎或前列腺炎等。2．鮮紅或暗紅色血性精液：見于生殖系統(tǒng)的炎癥、結(jié)核和**等。三、粘稠度和液化檢查[正常參考值]粘稠膠凍狀，30分鐘內(nèi)自行液化。[臨床意義]1．精液粘稠度低，似米湯樣，可因精子量減少所致，見于生殖系統(tǒng)炎癥。??2．液化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或不液化，可抑制精子活動(dòng)而影響生育，常見于前列腺炎癥等。四、精子活動(dòng)率檢測(cè)[正常參考值]正常精子活力一般在Ⅲ級(jí)(活動(dòng)較好，有中速運(yùn)動(dòng)，但波形運(yùn)動(dòng)的較多)以上，**后1小時(shí)內(nèi)有Ⅲ級(jí)以上活動(dòng)能力的精于應(yīng)＞0.60。[臨床意義]如果0級(jí)(死精子，無(wú)活動(dòng)能力，加溫后仍不活動(dòng))和Ⅰ級(jí)(活動(dòng)不良，精子原地旋轉(zhuǎn)、擺動(dòng)或抖動(dòng)，運(yùn)動(dòng)遲緩)精子在0.40以上，常為男性不育癥的重要原因之一。CASA系統(tǒng)通過(guò)計(jì)算機(jī)分析精子運(yùn)動(dòng)參數(shù)，能夠提供精確的量化數(shù)據(jù)，優(yōu)于人工檢測(cè)方法。美國(guó)濃度精子分析VAP

Hamilton Thorne自動(dòng)精子分析儀具有高精度、高效率和自動(dòng)化的優(yōu)點(diǎn)。上海馬精子分析DAP

精子分析儀使用注意事項(xiàng)1.樣品制備是CASA取得高質(zhì)量檢查結(jié)果的關(guān)鍵。CASA采用深度為10um樣品池，能保證精子在單層界面內(nèi)自由運(yùn)動(dòng)。取樣分析前標(biāo)本必須充分混勻，用微量取液器取5~7ul**加入樣品池中，用0.5mm厚皿蓋片蓋緊。2.不潔凈的計(jì)數(shù)池可影響精子的活力，尤其影響灰度CASA精子計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性。3.精子樣品密度過(guò)大時(shí)，造成圖像處理上的粘連，無(wú)法分析每個(gè)精子的運(yùn)動(dòng)特性。**中所含精子太少時(shí)，需增加檢查視野數(shù)量或者使用低倍物鏡觀察，以提高樣品檢出率。上海馬精子分析DAP