酶標(biāo)儀的用途是什么? 酶標(biāo)儀用于對微孔板中的幾種生物和化學(xué)測定進(jìn)行量化。 如今,大量試劑盒的出現(xiàn)使得酶標(biāo)儀在不同領(lǐng)域和許多不同應(yīng)用中的應(yīng)用成為可能。 除了在學(xué)術(shù)和工業(yè)環(huán)境中的生物學(xué)、生物化學(xué)和藥物研究外,讀板機(jī)還用于環(huán)境研究以及食品或化妝品行業(yè)。 多功能酶標(biāo)儀 酶標(biāo)儀的工作原理 酶標(biāo)儀檢測移液到微孔板中的樣品產(chǎn)生的光信號。這些樣品的光學(xué)特性是生物、化學(xué)、生化或物理反應(yīng)的結(jié)果。不同的分析反應(yīng)導(dǎo)致用于分析的不同光學(xué)變化。吸光度、熒光強(qiáng)度和發(fā)光是全球?qū)嶒?yàn)室流行和常用的檢測模式。此外,還提供熒光偏振、時(shí)間分辨熒光和 AlphaScreen 等高級模式。全自動酶標(biāo)儀采用先進(jìn)的測試技術(shù),能夠準(zhǔn)確地測量樣品的吸光度,從而得到準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。安徽如何選酶標(biāo)儀共同合作
酶標(biāo)儀的前世今生 酶標(biāo)儀問世之初,是酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)ELISA的常規(guī)檢測儀器。發(fā)展到如今,凡是與光信號相關(guān)的實(shí)驗(yàn)、需要高通量、需要節(jié)省試劑的實(shí)驗(yàn),且可以轉(zhuǎn)移到微孔板中的液體物質(zhì),都可以考慮使用微孔板檢測儀(酶標(biāo)儀)進(jìn)行信號檢測。因此,人們沿用早期“ELISA Plate Reader”的酶標(biāo)儀俗稱,其實(shí)現(xiàn)在已經(jīng)突破了ELISA的范疇,更常用的英文名稱是“Microplate Reader”,譯為“微孔板讀板機(jī)(儀)”。 早期的酶標(biāo)儀本質(zhì)是一臺分光光度計(jì),用比色法對96孔微孔板中微量體積液體的吸光值(Absorbances,Abs)進(jìn)行檢測。檢測時(shí),光源燈發(fā)出的光波經(jīng)過濾光片或單色器變成一束單色光,進(jìn)入塑料微孔板中的待測樣本,一部分光被樣本吸收,另一部分則透過樣本照射到光電檢測器上,光電檢測器將不同待測樣本的強(qiáng)弱不同的光信號轉(zhuǎn)換成相應(yīng)電信號,再經(jīng)前置放大、對數(shù)放大、模數(shù)轉(zhuǎn)換等信號處理后送入微處理器進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和計(jì)算,由顯示器和打印機(jī)顯示結(jié)果。微處理機(jī)還通過控制電路控制機(jī)械驅(qū)動結(jié)構(gòu)x和y方向的運(yùn)動來移動微孔板,從而實(shí)現(xiàn)自動進(jìn)樣檢測過程。其中,光吸收檢測技術(shù)原理符合朗伯比爾定律。安徽校驗(yàn)酶標(biāo)儀有哪些酶標(biāo)儀在技術(shù)質(zhì)量監(jiān)督局、動植物檢驗(yàn)檢疫以及食品飼料行業(yè)等眾多行業(yè)。
酶標(biāo)儀和普通的光電比色計(jì)有以下幾點(diǎn)差異: (1)盛裝待測比色液的容器不再使用比色皿,而是使用塑料微孔板.微孔板常用透明的聚乙烯材料制成,對抗原抗體有較強(qiáng)的吸附作用,故用它作為固相載體。 (2)由于盛樣本的塑料微孔板是多排多孔的,光線只能垂直穿過,因此酶標(biāo)儀的光束都是垂直通過待測溶液和微孔板的,光束既可是從上到下,也可以是從下到上穿過比色液。 (3)酶標(biāo)儀通常不僅用A,有時(shí)也使用光密度OD來表示吸光度.酶標(biāo)儀可分為單通道和多通道2種類型,單通道又有自動和手動2種之分.自動型的儀器有X,Y方向的機(jī)械驅(qū)動機(jī)構(gòu),可將微孔板L的小孔一個(gè)個(gè)依次送入光束下面測試,手動型則靠手工移動微孔板來進(jìn)行測量。 在單通道酶標(biāo)儀的基礎(chǔ)上又發(fā)展了多通道酶標(biāo)儀,此類酶標(biāo)儀一般都是自動化型的。它設(shè)有多個(gè)光束和多個(gè)光電檢測器,如 12個(gè)通道的儀器設(shè)有 12條光束或 12個(gè)光源,12個(gè)檢測器和12個(gè)放大器,在X方向的機(jī)械驅(qū)動裝置的作用下,樣品12個(gè)為一排被檢測.多通道酶標(biāo)儀的檢測速度快,但其結(jié)構(gòu)較復(fù)雜價(jià)格也較高。
化學(xué)發(fā)光是檢測化學(xué)發(fā)光酶免疫的光子信號或來自生物化學(xué)反應(yīng)中的自發(fā)光,可分為閃光型和輝光型兩種類型。輝光型發(fā)光持久,穩(wěn)定,能持續(xù)一段時(shí)間;閃光型發(fā)光時(shí)間短,變化快,穩(wěn)定性不強(qiáng),需要應(yīng)用自動加樣器才可以進(jìn)行。化學(xué)發(fā)光酶標(biāo)儀用單光子化學(xué)發(fā)光檢測器 (PMT)計(jì)數(shù),光子數(shù)與樣品中目標(biāo)分析物濃度呈一定比例關(guān)系?;瘜W(xué)發(fā)光酶標(biāo)儀靈敏度非常高,動力學(xué)范圍廣。 多功能酶標(biāo)儀是以上兩種或更多檢測模塊的集成,通常情況下至少可提供光吸收、熒光這兩種較常見檢測功能,而一些中高質(zhì)量多功能酶標(biāo)儀還可支持化學(xué)發(fā)光、時(shí)間分辨熒光、熒光偏振、生物發(fā)光共振能量轉(zhuǎn)移,甚至還可以支持“Western Blot”和“上轉(zhuǎn)換發(fā)光”等檢測。某些多用途高質(zhì)量型酶標(biāo)儀支持標(biāo)準(zhǔn)1cm立式比色皿插槽,可進(jìn)行熒光強(qiáng)度和化學(xué)發(fā)光檢測。多功能酶標(biāo)儀功能強(qiáng)大、使用范圍廣、避免了重復(fù)購買,所以成為了實(shí)驗(yàn)室的較佳之選。上海穩(wěn)贏機(jī)電設(shè)備全自動酶標(biāo)儀多功能性強(qiáng)。
三、通道差與孔間差檢測 方法及其表達(dá)方式:①通道差檢測:取一只酶標(biāo)板小孔杯(杯底須光滑、透明、無劃痕、無污染)以酶標(biāo)板架作載體,分別加入三種不同濃度的甲基橙溶液200u*后置于8個(gè)通道的相應(yīng)位置,蒸餾水調(diào)零,采用雙波長(測定波長490nm,參比波長630或650nm,以下均相同)連續(xù)測三次,觀察其不同通道之間測量結(jié)果的一致性可用極差值來表示其通道差。②孔間差的測量:選擇同一廠家、同一批號酶標(biāo)板條(8條共96孔)分別加入200ul甲基橙溶液(吸光度調(diào)0.065~0.070A)先后置于同一通道,蒸餾水調(diào)零,采用雙波長檢測,其誤差大小用±1.96s衡量。 四、零點(diǎn)飄移 方法:取八只小孔杯,分別置于八個(gè)通道的相應(yīng)位置,均加入200ul蒸餾水并調(diào)零,采用雙波長或單波長(490nm)每隔30min測定一次,觀察8個(gè)通道4h內(nèi)的吸光度變化。其與零點(diǎn)的差值即為零點(diǎn)飄移。酶標(biāo)儀通常具有自動化操作系統(tǒng),能夠?qū)崿F(xiàn)自動加樣、洗滌、檢測等功能,減少了人為操作的誤差和繁瑣性。安徽如何選酶標(biāo)儀共同合作
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原理 酶標(biāo)儀實(shí)際上就是一臺變相光電比色計(jì)或分光光度計(jì),其基本工作原理與主要結(jié)構(gòu)和光電比色計(jì)基本相同。光源燈發(fā)出的光波經(jīng)過濾光片或單色器變成一束單色光,進(jìn)入塑料微孔板中的待測標(biāo)本。該單色光一部分被標(biāo)本吸收,另一部分則透過標(biāo)本照射到光電檢測器上,光電檢測器將這一待測標(biāo)本不同而強(qiáng)弱不同的光信號轉(zhuǎn)換成相應(yīng)的電信號,電信號經(jīng)前置放大,對數(shù)放大,模數(shù)轉(zhuǎn)換等信號處理后送入微處理器進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和計(jì)算,由顯示器和打印機(jī)顯示結(jié)果。微處理機(jī)還通過控制電路控制機(jī)械驅(qū)動機(jī)構(gòu)X方向和Y方向的運(yùn)動來移動微孔板,從而實(shí)現(xiàn)自動進(jìn)樣檢測過程。而另一些酶標(biāo)儀則是采用手工移動微孔板進(jìn)行檢測,因此省去了X,Y方向的機(jī)械驅(qū)動機(jī)構(gòu)和控制電路,從而使儀器更小巧,結(jié)構(gòu)也更簡單。安徽如何選酶標(biāo)儀共同合作