利用免疫磁珠從SD大鼠坐骨神經(jīng)分離培養(yǎng)獲得大量,高純度雪旺細胞的方法.[方法]選用4-7dSD大鼠,無菌條件下取雙側(cè)坐骨神經(jīng),解剖鏡下剝離去除神經(jīng)外膜,獲得神經(jīng)束,將神經(jīng)束剪碎至1mm3大小.采用雙酶2次消化法消化,胎牛血清中止消化后,離心并加入DF12培養(yǎng)液培養(yǎng).7d后應(yīng)用免疫磁珠法對細胞進行純化培養(yǎng),培養(yǎng)2d后進行傳代接種.培養(yǎng)過程中對細胞進行形態(tài)學(xué)觀察,計數(shù)及活力測定;MTY法繪制細胞生長曲線,采用免疫細胞化學(xué)熒光染色對細胞進行鑒定并且計算所得細胞純度.[結(jié)果]分離培養(yǎng)所得細胞即為雪旺細胞;采用免疫磁珠法能對培養(yǎng)所得雪旺細胞進行純化.純化后雪旺細胞活力為96%±0.5%,純度98%±1.1%,培養(yǎng)2d后就可以傳代.[結(jié)論]免疫磁珠法可以用于雪旺細胞的純化培養(yǎng),所得雪旺細胞純度高,活力強,能滿足組織工程人工神經(jīng)的需要.上海普平生物科技有限公司專業(yè)致力于免疫磁珠批發(fā)。安徽protein A/G COIP免疫磁珠哪家好
一種免疫磁珠及制作方法和用于檢測的方法及測試板,所述的免疫磁珠至少由磁性載體微球組成,該磁性載體微球結(jié)合有至少一種免疫配基;所述的磁性載體微球由磁性納米粒和高分子骨架材料組成,其**為金屬小顆粒,**外為高分子材料,**外層為帶有各種可以結(jié)合不同免疫配基功能基因的功能層;免疫磁珠的制作方法包括:磁珠預(yù)處理;活化磁珠;偶聯(lián)抗體的制作;對偶聯(lián)抗體用封閉液封閉;免疫磁珠純化等;用于檢測的方法是:利用免疫學(xué)反應(yīng)夾心法,競爭法以及間接法檢測不同物質(zhì)的存在,并在測試板上設(shè)置對照體系:測試板由包被試紙條,偶聯(lián)墊,樣品墊,吸水墊,覆蓋膜以及測試板外卡組成,它具有靈敏度高,定量準確,不受光學(xué)因素干擾,磁信號穩(wěn)定,不易衰減,試劑簡單,穩(wěn)定,低廉,檢測快速,適合現(xiàn)場檢測等特點.天津protein A/G 免疫共沉淀免疫磁珠供應(yīng)商免疫磁珠的不同系列會有不同的優(yōu)勢。
免疫磁珠分離法純化抗血清的實驗條件,并與A蛋白親和層析法比較純化效果,以求得到一種簡便,快速,高效的純化IgG方法.結(jié)果表明:從5只新西蘭兔獲得210 mL試管凝集效價高達1:5 120的兔抗鰻弧菌抗血清,磁珠與IgG結(jié)合10 min達到平衡,其比較大結(jié)合量為0.227 mg/mL;免疫磁珠分離法與A蛋白親和層析法得到的IgG純度都很高,經(jīng)過SDS-PAGE電泳都只得到25 ku和55 ku左右的兩條帶;免疫磁珠分離法得到的抗體ELISA效價高于A蛋白親和層析法;免疫磁珠分離法反應(yīng)所需時間(10 min)小于A蛋白親和層析法所需的20 min,其得率(11.5 mg/mL)也高于A蛋白親和層析法的10.25 mg/mL.
常用的磁珠法DNA提取試劑盒，國外的有Dynal、Qiagen等，國內(nèi)將磁珠應(yīng)用于核酸提取的研究起源于02年左右，經(jīng)過近些年的反復(fù)試驗，形成了穩(wěn)定的核酸提取體系，并已被***用于一些疾?。ㄈ缫腋?、丙肝、結(jié)核菌）等的定量檢測（如惠爾納米的系列磁珠法核酸提取試劑盒）。國產(chǎn)磁珠法試劑盒與進口產(chǎn)品相比，已不單單是只具有價格優(yōu)勢，其產(chǎn)品的穩(wěn)定性、高效性、提取出的核酸的質(zhì)量與產(chǎn)量都足以與進口磁珠法試劑盒媲美。但是進口試劑盒長期以來形成的完善的銷售渠道對國產(chǎn)試劑盒的推廣是一大挑戰(zhàn)。上海普平生物科技有限公司銷售的免疫磁珠質(zhì)量很好。
建立有效的人類神經(jīng)干細胞分離純化系統(tǒng)和方法.方法:無菌取孕24周流產(chǎn)胎兒的室下區(qū)腦組織,制備細胞懸液,用磁性微珠標記的CD133單克隆抗體與細胞孵育,通過磁分選器分離出CD133(+)和CD133(-)細胞,通過體外培養(yǎng)并誘導(dǎo)分化,觀察CD133陽性細胞和陰性細胞的增殖情況及分化能力.結(jié)果:經(jīng)免疫磁珠分選的室下區(qū)腦組織中,CD133(+)細胞占胚胎腦組織細胞的2%左右,該細胞體外擴增能力強,細胞呈球形生長,并易聚集成團,培養(yǎng)5d,10d,15d,20d進行活細胞計數(shù),細胞增長率分別為1.79%,4.82%,7.21%,14.66%,誘導(dǎo)分化后的細胞經(jīng)染色鑒定可分化為神經(jīng)元,神經(jīng)膠質(zhì)等多種神經(jīng)細胞,陰性細胞擴增能力弱,活細胞計數(shù)以死細胞數(shù)量居多,大約705,另外一些細胞貼壁分化.結(jié)論:免疫磁珠法簡便,有效,經(jīng)免疫磁珠分離的神經(jīng)干細胞在體外能進一步培養(yǎng)擴增并分化.上海免疫磁珠批發(fā)推薦上海普平生物科技有限公司。廣東anti-HA COIP免疫磁珠哪家好
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免疫磁珠法分離細胞是基于細胞表面抗原能與連接有磁珠的特異性單抗相結(jié)合，在外加磁場中，通過抗體與磁珠相連的細胞被吸附而滯留在磁場中，無該種表面抗原的細胞由于不能與連接著磁珠的特異性單抗結(jié)合而沒有磁性，不在磁場中停留，從而使細胞得以分離。免疫磁珠應(yīng)用分為正選法和負選法：正選法－磁珠結(jié)合的細胞就是所要分離獲得的細胞負選法－磁珠結(jié)合不需要的細胞，游離于上清液的細胞為所需細胞，一般而言，負選法比正選法的磁珠用量大磁珠：大小在0.1－0.45mm包被了生產(chǎn)的高質(zhì)量單抗磁珠已為白細胞亞群的分選所優(yōu)化將包被了特異性單抗的BDIMag磁珠加入細胞懸液，磁珠特異性地與有相應(yīng)抗原的細胞亞群結(jié)合，通過分離得到的連有磁珠的細胞可直接用于功能試驗和用流式細胞儀檢測。安徽protein A/G COIP免疫磁珠哪家好
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