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一種免疫磁珠及制作方法和用于檢測的方法及測試板,所述的免疫磁珠至少由磁性載體微球組成,該磁性載體微球結(jié)合有至少一種免疫配基;所述的磁性載體微球由磁性納米粒和高分子骨架材料組成,其**為金屬小顆粒,**外為高分子材料,**外層為帶有各種可以結(jié)合不同免疫配基功能基因的功能層;免疫磁珠的制作方法包括:磁珠預(yù)處理;活化磁珠;偶聯(lián)抗體的制作;對偶聯(lián)抗體用封閉液封閉;免疫磁珠純化等;用于檢測的方法是:利用免疫學(xué)反應(yīng)夾心法,競爭法以及間接法檢測不同物質(zhì)的存在,并在測試板上設(shè)置對照體系:測試板由包被試紙條,偶聯(lián)墊,樣品墊,吸水墊,覆蓋膜以及測試板外卡組成,它具有靈敏度高,定量準確,不受光學(xué)因素干擾,磁信號穩(wěn)定,不易衰減,試劑簡單,穩(wěn)定,低廉,檢測快速,適合現(xiàn)場檢測等特點.上海普平生物科技有限公司專業(yè)致力于免疫磁珠生產(chǎn)。黑龍江anti-HA 免疫共沉淀免疫磁珠批量定制
建立免疫磁珠法分離,并培養(yǎng)人腦膠質(zhì)瘤干細胞的方法.方法將術(shù)中取得的腦膠質(zhì)瘤標本,通過剪切、消化和吹打成單細胞懸液,篩網(wǎng)過濾,免疫磁珠分選試劑盒分選出CD133+細胞,用神經(jīng)干細胞無血清培養(yǎng)法培養(yǎng)出具有單細胞克隆能力的細胞球,取第3代進行誘導(dǎo)分化,分化前后用免疫細胞熒光化學(xué)方法鑒定**干細胞及分化后細胞.結(jié)果免疫磁珠分選出的CD133-細胞,可懸浮生長并形成神經(jīng)干細胞樣細胞球,有較強的增殖能力,干細胞標志物巢蛋白(nestin)陽性,分化后細胞表達神經(jīng)元小管相關(guān)蛋白β-3(β-tubulin3)和星形膠質(zhì)細胞膠質(zhì)纖維酸性蛋白質(zhì)(GFAP)特異性抗原,而巢蛋白、CD133陰性,并具有**的核型.結(jié)論免疫磁珠分選法可避免原代培養(yǎng)中眾多細胞混雜牛長的發(fā)生,能夠從大量腫瘤細胞中分離出只占極少比例的**干細胞,細胞結(jié)合磁珠后在體外可以長期培養(yǎng)和傳代,進一步證實了**干細胞的存在,并為膠質(zhì)瘤干細胞的研究奠定基礎(chǔ).黑龍江anti-HA COIP免疫磁珠經(jīng)銷商價格4折起免疫磁珠的優(yōu)點有很多。
從臍血中分離,培養(yǎng)血管內(nèi)皮祖細胞,研究內(nèi)皮祖細胞的生長特性和誘導(dǎo)分化條件.方法:應(yīng)用MACS磁球抗體標記法純化臍血中的CD133+細胞,通過流式細胞儀,免疫細胞化學(xué),免疫熒光等技術(shù)及形態(tài)學(xué)(光鏡,電鏡)觀察研究內(nèi)皮祖細胞;將細胞接種于添加(或未添加)VEGF,bFGF,干細胞因子(SCF)的含20%胎牛血清(FBS)的IMDM培養(yǎng)基中,觀察內(nèi)皮祖細胞的生長特性.結(jié)果:分離新鮮臍血所得CD133陽性細胞占單個核細胞的(1.41±1.14)%,經(jīng)流式細胞儀鑒定CD133+細胞純度為75%-85%;將分離細胞接種于纖維連接蛋白包被的24孔板內(nèi),培養(yǎng)1-2h即有細胞貼壁,7-10d可見貼壁細胞呈鋪路石樣排列;14d后細胞出現(xiàn)小圓形,梭形等多樣性變化,可見***管腔樣結(jié)構(gòu),電鏡觀察可見胞漿內(nèi)典型的Weibel-Palade小體;在VEGF,bFGF,SCF存在條件下,檢測貼壁細胞培養(yǎng)14d后細胞表面抗原表達情況:與培養(yǎng)開始時相比,祖細胞標志CD133和CD34陽性率呈明顯下降趨勢,分別由(77.0±3.3)%和(93.1±4.7)%降至(1.6±2.2)%和(37.4±4.9)%,P<0.05,內(nèi)皮細胞特異性標志Flk-1表達明顯增加,由(22.3±3.3)%增至(94.3±4.1)%,P<0.05,同時vWF抗原呈強陽性表達,陽性率為(77.9±3.3)%.
免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎(chǔ)的用于研究蛋白質(zhì)相互作用的經(jīng)典方法。是確定兩種蛋白質(zhì)在完整細胞內(nèi)生理性相互作用的有效方法。當細胞在非變性條件下被裂解時,完整細胞內(nèi)存在的許多蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)間的相互作用被保留了下來。當用預(yù)先固化在agarosebeads上的蛋白質(zhì)A的抗體免疫沉淀A蛋白,那么與A蛋白在體內(nèi)結(jié)合的蛋白質(zhì)B也能一起沉淀下來。再通過蛋白變性分離,對B蛋白進行檢測,進而證明兩者間的相互作用。這種方法得到的目的蛋白是在細胞內(nèi)與興趣蛋白天然結(jié)合的,符合體內(nèi)實際情況,得到的結(jié)果可信度高。這種方法常用于測定兩種目標蛋白質(zhì)是否在體內(nèi)結(jié)合;也可用于確定一種特定蛋白質(zhì)的新的作用搭檔。您了解免疫磁珠的優(yōu)勢嗎?
利用免疫磁珠從SD大鼠坐骨神經(jīng)分離培養(yǎng)獲得大量,高純度雪旺細胞的方法.[方法]選用4-7dSD大鼠,無菌條件下取雙側(cè)坐骨神經(jīng),解剖鏡下剝離去除神經(jīng)外膜,獲得神經(jīng)束,將神經(jīng)束剪碎至1mm3大小.采用雙酶2次消化法消化,胎牛血清中止消化后,離心并加入DF12培養(yǎng)液培養(yǎng).7d后應(yīng)用免疫磁珠法對細胞進行純化培養(yǎng),培養(yǎng)2d后進行傳代接種.培養(yǎng)過程中對細胞進行形態(tài)學(xué)觀察,計數(shù)及活力測定;MTY法繪制細胞生長曲線,采用免疫細胞化學(xué)熒光染色對細胞進行鑒定并且計算所得細胞純度.[結(jié)果]分離培養(yǎng)所得細胞即為雪旺細胞;采用免疫磁珠法能對培養(yǎng)所得雪旺細胞進行純化.純化后雪旺細胞活力為96%±0.5%,純度98%±1.1%,培養(yǎng)2d后就可以傳代.[結(jié)論]免疫磁珠法可以用于雪旺細胞的純化培養(yǎng),所得雪旺細胞純度高,活力強,能滿足組織工程人工神經(jīng)的需要.那么免疫磁珠的優(yōu)勢都有哪些呢?天津protein A/G COIP免疫磁珠代理價格4折起
免疫磁珠的系列有很多種。黑龍江anti-HA 免疫共沉淀免疫磁珠批量定制
戊二醛兩步交聯(lián)法將辣根過氧化物酶(HRP)結(jié)合于甲胎蛋白 (AFP)抗體上制成酶標AFP抗體,質(zhì)量鑒定結(jié)果表明其比活性為200 U/mg,抗體效價為1: 256,滿足酶聯(lián)免疫吸附測定法(ELISA)要求;通過滴定法確定酶標AFP抗體的**適工作稀釋度為V(酶標抗體): V(磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖液)=1: 160;血清用量及孵育時間的影響實驗表明:血清100 μL,孵育時間2 h為比較好測定條件.建立了肝*患者血清AFP免疫磁珠ELISA法的規(guī)范化檢測程序.初步應(yīng)用實驗顯示:免疫磁珠ELISA法測定受試健康組血清AFP值 平均為3.9 ng/mL,肝*組血清AFP值平均為316.7 ng/mL,對肝*診斷陽性率為72.0%.批內(nèi)及批間CV值分別為5.05%和8.20%.該項技術(shù)有較高的靈敏度和很好的特異性,操作簡便,分離快 速,適用于肝*的初期快速診斷.黑龍江anti-HA 免疫共沉淀免疫磁珠批量定制
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