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核酸提取磁珠通過對(duì)磁珠進(jìn)行一定的包被(如硅基、氨基、羧基等),從而可以實(shí)現(xiàn)對(duì)核酸的高通量、自動(dòng)化提取,這一技術(shù)產(chǎn)生于20世紀(jì)80年代,已經(jīng)有了成熟的試劑盒并形成為產(chǎn)業(yè)。隨著基因檢測(cè)、個(gè)性化給藥、產(chǎn)前診斷等的普及,在生物行業(yè)各領(lǐng)域都追求高通量、自動(dòng)化的***,傳統(tǒng)DNA提取方法的局限愈來(lái)愈明顯,而磁珠法DNA提取的優(yōu)勢(shì)則愈來(lái)愈明顯:①能夠?qū)崿F(xiàn)自動(dòng)化、大批量操作,已有96孔的核酸自動(dòng)提取儀,用一個(gè)樣品的提取時(shí)間即可實(shí)現(xiàn)對(duì)96個(gè)樣品的處理,符合生物學(xué)高通量的操作要求,使得傳染性疾病爆發(fā)時(shí)能夠進(jìn)行快速及時(shí)的應(yīng)對(duì),這一特點(diǎn)使得傳統(tǒng)方法望塵莫及;②操作簡(jiǎn)單、用時(shí)短,整個(gè)提取流程只有四步,大多可以在36-40分鐘內(nèi)完成;③安全無(wú)毒,不使用傳統(tǒng)方法中的苯、氯仿等有毒試劑,對(duì)實(shí)驗(yàn)操作人員的傷害減少到**少,完全符合現(xiàn)代環(huán)保理念;④磁珠與核酸的特異性結(jié)合使得提取的核酸純度高、濃度大??漳c彎曲菌免疫磁珠富集方法的建立。甘肅protein A/G COIP免疫磁珠性能
磁珠分離細(xì)胞STRO-1+的DPSC、EMSC中HNK-1、Nestin的表達(dá),進(jìn)一步了解DPSC的表型特點(diǎn)及與EMSC的相關(guān)性,為今后研究提供較為純化的細(xì)胞來(lái)源。方法采用間接免疫磁珠分離法獲得DPSC、EMSC,間接免疫熒光雙標(biāo)法檢測(cè)抗原HNK-1、Nestin的表達(dá)。結(jié)果磁珠分離前后進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù),大約有5%的DPSC為STRO-1+的細(xì)胞,大約有1%的EMSC為STRO-1+的細(xì)胞;STRO-1+的DPSC免疫熒光檢測(cè)同時(shí)表達(dá)HNK-1(++)、Nestin(+),STRO-1+的EMSC免疫熒光檢測(cè)顯示也同時(shí)表達(dá)HNK-1(++)、Nestin(++)。結(jié)論免疫磁珠分離法獲得STRO-1+陽(yáng)性的DPSC共表達(dá)EMSC的標(biāo)記HNK-1和Nestin,進(jìn)一步說(shuō)明二者作為間充質(zhì)來(lái)源的干細(xì)胞,細(xì)胞表型具有繼承性。天津蛋白質(zhì)免疫共沉淀免疫磁珠生產(chǎn)廠家免疫磁珠法分離和純化胚胎神經(jīng)干細(xì)胞。
免疫磁珠分離法分選弓形蟲速殖子,以去除宿主細(xì)胞成分,并 盡可能對(duì)蟲體的生物學(xué)特性無(wú)不良影響,為弓形蟲的基礎(chǔ)與臨床研究提供技術(shù)基礎(chǔ).方法采用弓形蟲Wh3株( China 1基因型)速殖子***小鼠,提取腹腔液,常規(guī)方法制備速殖子可溶性抗原,免疫家兔,獲得兔抗弓形蟲多克隆IgG抗體.用抗體包被的免疫磁珠對(duì)小鼠腹腔液內(nèi) 弓形蟲速殖子進(jìn)行純化,比較其純度,回收率,蟲體活力,毒力與***性.結(jié)果用免疫磁珠分離技術(shù)純化弓形蟲速殖子后,其純度提高到98.2%,細(xì)胞***率為 96%,蟲體回收率為73.5%;用內(nèi)鹽法( MTS )細(xì)胞增殖與毒性檢測(cè)試劑盒檢測(cè)分離后的速殖子活性為95.6%.定量分組***小鼠后死亡時(shí)間無(wú)***性差異.結(jié)論免疫磁珠分離的速殖子純度,細(xì)胞***率和 蟲體回收率較高,能有效去除宿主細(xì)胞,且對(duì)速殖子的活性和毒力無(wú)影響.該法操作簡(jiǎn)便快速,無(wú)需昂貴的儀器設(shè)備,具有較大的實(shí)用價(jià)值.
COIP常見問題及對(duì)策
1:如何提高抗體與磁珠結(jié)合效率?
磁珠與抗體的結(jié)合效率與抗體的種屬來(lái)源及所屬亞型有關(guān),請(qǐng)確 認(rèn)抗體的類型與 Protein A/G 配基的親和效率。如抗體所屬亞型與 Protein A/G的親和度較低,可以通過增加抗體與磁珠的孵育時(shí)間( 30~120min)、提高結(jié)合緩沖液的pH值(8~9)及降低離子強(qiáng)度( 25~100mM NaCl)等方法提高親和效率。
2:如何提高磁珠在免疫沉淀反應(yīng)中的特異性?
可以先將抗體與樣品進(jìn)行孵育,形成抗體-抗原復(fù)合物,再用 Protein A/G磁珠捕獲復(fù)合物。這種方法可以提高抗體與抗原的結(jié)合效 率,并降低磁珠與樣品接觸的時(shí)間,從而提高沉淀產(chǎn)物的特異性。對(duì) 于蛋白質(zhì)/核酸共沉淀或染色質(zhì)免疫共沉淀也推薦使用此法。 免疫磁珠分選兔前軟骨干細(xì)胞及細(xì)胞研究平臺(tái)的建立。
產(chǎn)品價(jià)格
產(chǎn)品貨號(hào)
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規(guī)格
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價(jià)格
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Beenbio -PR002-0.4
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0.4 mL
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1150 RMB
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Beenbio -PR002-1
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1 mL
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1780 RMB
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Beenbio -PR002-5
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5 mL
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6825 RMB
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產(chǎn)品描述
BEENbio Anti Flag COIP磁珠在大小為1um的納米磁珠上供價(jià)結(jié)合了大量的小鼠Anti Flag單克隆抗體,與傳統(tǒng)的Anti Flag COIP瓊脂糖凝膠比較,抗體結(jié)合能力相同,背景更低,由于采用磁性分離,使得每次COIP可以節(jié)省40%的時(shí)間。
產(chǎn)品特性
項(xiàng)目
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特性
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抗體亞型
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鼠源IgG1
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抗體純化方法
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Protein A 純化制備
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適用范圍
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免疫共沉淀(IP),Flag tag蛋白純化
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推薦使用體積
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COIP: 500μl 細(xì)胞裂解液 使用 10μL磁珠
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融合蛋白結(jié)合容量
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大于1.1 mg Flag tagged protein/mL 磁珠
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儲(chǔ)存條件
4oC長(zhǎng)期穩(wěn)定,
使用說(shuō)明
磁珠的準(zhǔn)備
重懸Anti Flag 免疫磁珠,取10 μL加入到500 μL TBS,洗滌3次,分離磁珠,棄上清。
樣品的結(jié)合(binding)
在上述沉淀中加入500 μL細(xì)胞裂解液,室溫緩慢孵育2小時(shí)或者4°C條件下過夜,分離磁珠,棄上清。
結(jié)合過程中,磁珠可能會(huì)出現(xiàn)聚團(tuán)或呈片狀,屬于正?,F(xiàn)象,不會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
洗滌(washing):0.5 mL TBS緩沖液洗滌四次,每次5min,分離磁珠,棄上清。
洗脫(elution):上述所得沉淀中加 入50 μL 1×蛋白上樣緩沖液,煮沸5 min,冷卻后分離磁珠,吸取上清液,進(jìn)行SDS-PAGE檢測(cè)。 紅細(xì)胞膜免疫磁珠檢測(cè)成分血中抗A/抗B的研究。天津anti-HA 免疫共沉淀免疫磁珠供應(yīng)商
BEENbio Anti HA Co-IP&CHIP磁珠廠家直銷。甘肅protein A/G COIP免疫磁珠性能
抗熒光素單克隆抗體免疫磁珠,并進(jìn)行初步應(yīng)用。方法采用B淋巴細(xì)胞雜交瘤技術(shù)制備抗熒光素單克隆抗體;制備腹水,經(jīng)50%硫酸銨粗提后,再經(jīng)陰離子交換樹脂DE52進(jìn)一步純化單克隆抗體;采用氧化共沉淀法制備納米磁性粒子;乳液聚合法制備羧基磁性微球;用碳二亞胺將抗熒光素單克隆抗體共價(jià)偶聯(lián)于磁性微球表面,制備抗熒光素單克隆抗體免疫磁珠。用制備的免疫磁珠檢測(cè)乙肝表面抗原,并與市售ELISA試劑盒的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行比較。結(jié)果共獲得5株雜交瘤細(xì)胞株,其中1F12細(xì)胞株分泌的抗體效價(jià)、相對(duì)親和力較高,特異性較好;純化的1F12株單抗的純度達(dá)95%,蛋白含量為2.4mg/ml,ELISA效價(jià)為106,相對(duì)親和力為0.2mg/L,與FITC標(biāo)記的BSA可特異性結(jié)合;納米磁性粒子的平均粒徑為150nm,鐵含量為71.63%;羧基磁性微球的平均粒徑為210nm,羧基含量約為2.15mmol/g;每克羧基磁性微球可結(jié)合抗熒光素單克隆抗體約12mg,制備的免疫磁珠可有效結(jié)合熒光素標(biāo)記的蛋白。應(yīng)用抗熒光素單克隆抗體免疫磁珠檢測(cè)乙型肝炎表面抗原的靈敏度高于ELISA試劑,檢測(cè)限達(dá)0.1ng/ml。結(jié)論成功制備了抗熒光素單克隆抗體免疫磁珠,其具有應(yīng)用于免疫檢測(cè)分析的價(jià)值。甘肅protein A/G COIP免疫磁珠性能
上海普平生物科技有限公司是一家上海普平生物科技有限公司上海普平生物科技有限公司上海普平生物科技有限公司從事生物科技領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開發(fā)、技術(shù)咨詢、技術(shù)轉(zhuǎn)讓;實(shí)驗(yàn)室設(shè)備、化工原料及產(chǎn)品的銷售;計(jì)算機(jī)軟件開發(fā);計(jì)算機(jī)網(wǎng)絡(luò)工程;從事貨物及技術(shù)進(jìn)出口業(yè)務(wù)。 的公司,是一家集研發(fā)、設(shè)計(jì)、生產(chǎn)和銷售為一體的專業(yè)化公司。普平生物作為上海普平生物科技有限公司上海普平生物科技有限公司上海普平生物科技有限公司從事生物科技領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開發(fā)、技術(shù)咨詢、技術(shù)轉(zhuǎn)讓;實(shí)驗(yàn)室設(shè)備、化工原料及產(chǎn)品的銷售;計(jì)算機(jī)軟件開發(fā);計(jì)算機(jī)網(wǎng)絡(luò)工程;從事貨物及技術(shù)進(jìn)出口業(yè)務(wù)。 的企業(yè)之一,為客戶提供良好的科研試劑、耗材、儀器,納米脂質(zhì)體,細(xì)胞、分子、蛋白實(shí)驗(yàn),科研項(xiàng)目。普平生物繼續(xù)堅(jiān)定不移地走高質(zhì)量發(fā)展道路,既要實(shí)現(xiàn)基本面穩(wěn)定增長(zhǎng),又要聚焦關(guān)鍵領(lǐng)域,實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)型再突破。普平生物始終關(guān)注化工市場(chǎng),以敏銳的市場(chǎng)洞察力,實(shí)現(xiàn)與客戶的成長(zhǎng)共贏。