抗熒光素單克隆抗體免疫磁珠,并進(jìn)行初步應(yīng)用。方法采用B淋巴細(xì)胞雜交瘤技術(shù)制備抗熒光素單克隆抗體;制備腹水,經(jīng)50%硫酸銨粗提后,再經(jīng)陰離子交換樹脂DE52進(jìn)一步純化單克隆抗體;采用氧化共沉淀法制備納米磁性粒子;乳液聚合法制備羧基磁性微球;用碳二亞胺將抗熒光素單克隆抗體共價(jià)偶聯(lián)于磁性微球表面,制備抗熒光素單克隆抗體免疫磁珠。用制備的免疫磁珠檢測(cè)乙肝表面抗原,并與市售ELISA試劑盒的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行比較。結(jié)果共獲得5株雜交瘤細(xì)胞株,其中1F12細(xì)胞株分泌的抗體效價(jià)、相對(duì)親和力較高,特異性較好;純化的1F12株單抗的純度達(dá)95%,蛋白含量為2.4mg/ml,ELISA效價(jià)為106,相對(duì)親和力為0.2mg/L,與FITC標(biāo)記的BSA可特異性結(jié)合;納米磁性粒子的平均粒徑為150nm,鐵含量為71.63%;羧基磁性微球的平均粒徑為210nm,羧基含量約為2.15mmol/g;每克羧基磁性微球可結(jié)合抗熒光素單克隆抗體約12mg,制備的免疫磁珠可有效結(jié)合熒光素標(biāo)記的蛋白。應(yīng)用抗熒光素單克隆抗體免疫磁珠檢測(cè)乙型肝炎表面抗原的靈敏度高于ELISA試劑,檢測(cè)限達(dá)0.1ng/ml。結(jié)論成功制備了抗熒光素單克隆抗體免疫磁珠,其具有應(yīng)用于免疫檢測(cè)分析的價(jià)值。BEENbio Anti HA Co-IP&CHIP磁珠全國招商代理。甘肅anti-Flag COIP免疫磁珠代理價(jià)格4折起
免疫磁珠法分選人骨髓多能成體祖細(xì)胞,觀察其分選效果,建立體外分選純化及培養(yǎng)人骨髓來源多能成體祖細(xì)胞(hMAPCs)的方法.方法:取健康成人志愿者適量骨髓后采用梯度密度離心法分離獲取單個(gè)核細(xì)胞,在自制培養(yǎng)基下貼壁培養(yǎng)后,將獲取的骨髓貼壁細(xì)胞通過CD45,血糖蛋白A(GlyA)免疫微磁珠(miniMACS)負(fù)分選,錐蟲藍(lán)拒染實(shí)驗(yàn)計(jì)數(shù)MACS分選前后細(xì)胞活力.流式細(xì)胞儀鑒定分選后細(xì)胞純度;流式細(xì)胞儀分析培養(yǎng)細(xì)胞CD29,CD44,CD34和HLA-DR表達(dá)情況.結(jié)果:通過MACS分選,平均每1×106/ml骨髓貼壁細(xì)胞可分選出約(5~10)×104/mlhMAPCs,分選后的hMAPCs細(xì)胞生長(zhǎng)良好,**長(zhǎng)傳代到第20代.分選前后細(xì)胞活力分別為(96.7±1.7)%和(96.0±2.4)%,無明顯差異;流式細(xì)胞儀分析獲取的CD45-,GlyA-細(xì)胞純度大于98%;流式細(xì)胞儀檢測(cè)hMAPCs中CD29陽性表達(dá)細(xì)胞比率為99.2%,CD44陽性細(xì)胞比率為98.3%,CD34陽性細(xì)胞比率為1.2%,HLA-DR陽性細(xì)胞比率為5.3%.結(jié)論:CD45,GlyA免疫微磁珠負(fù)分選可從骨髓中分離高純度的hMAPCs;分選后hMAPCs在自行研制的培養(yǎng)基中有較強(qiáng)的增殖能力.浙江anti-HA COIP免疫磁珠代理價(jià)格4折起免疫磁珠法分離成人骨髓來源神經(jīng)干細(xì)胞的生物學(xué)特征。
免疫共沉淀檢測(cè)(CO-IP)
BEENbio提供免疫共沉淀(CO-IP)檢測(cè)服務(wù)。可對(duì)兩種已知蛋白是否存在相互作用進(jìn)行驗(yàn)證,也可以驗(yàn)證在總蛋白中是否含有與已知蛋白相互作用的未知蛋白。其實(shí)驗(yàn)方法為將靶蛋白(X)與目的蛋白(Y)在同一細(xì)胞內(nèi)孵育,形成“靶蛋白-目的蛋白”復(fù)合物。將靶蛋白的特異性抗體與復(fù)合物共孵育,形成“抗體-靶蛋白-目的蛋白”復(fù)合物,利用Proterin A/G純化。通過SDS-PAGE銀染,結(jié)合Western Blot及液相質(zhì)譜等對(duì)兩種蛋白之間是否存在相互作用進(jìn)行定性分析。
服務(wù)優(yōu)勢(shì)
? 使用銀染技術(shù),靈敏度是考馬斯亮藍(lán)100倍,SDS-PAGE電泳結(jié)果更加清晰;
? 擁有液相質(zhì)譜及Fortebio等完整配套檢測(cè)設(shè)備,可對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)一步分析;
? 實(shí)驗(yàn)重復(fù)進(jìn)行兩次,排除隨機(jī)因素影響,結(jié)果更加可靠;
? 擁有蛋白、抗體等制備平臺(tái),您只需提供序列便可完成全部實(shí)驗(yàn);
戊二醛兩步交聯(lián)法將辣根過氧化物酶(HRP)結(jié)合于甲胎蛋白 (AFP)抗體上制成酶標(biāo)AFP抗體,質(zhì)量鑒定結(jié)果表明其比活性為200 U/mg,抗體效價(jià)為1: 256,滿足酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法(ELISA)要求;通過滴定法確定酶標(biāo)AFP抗體的**適工作稀釋度為V(酶標(biāo)抗體): V(磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖液)=1: 160;血清用量及孵育時(shí)間的影響實(shí)驗(yàn)表明:血清100 μL,孵育時(shí)間2 h為比較好測(cè)定條件.建立了肝*患者血清AFP免疫磁珠ELISA法的規(guī)范化檢測(cè)程序.初步應(yīng)用實(shí)驗(yàn)顯示:免疫磁珠ELISA法測(cè)定受試健康組血清AFP值 平均為3.9 ng/mL,肝*組血清AFP值平均為316.7 ng/mL,對(duì)肝*診斷陽性率為72.0%.批內(nèi)及批間CV值分別為5.05%和8.20%.該項(xiàng)技術(shù)有較高的靈敏度和很好的特異性,操作簡(jiǎn)便,分離快 速,適用于肝*的初期快速診斷.BEENbio protein A/G Co-IP&CHIP磁珠 Cell Nature Science。
產(chǎn)品價(jià)格
產(chǎn)品貨號(hào)
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規(guī)格
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價(jià)格
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Beenbio -PR002-0.4
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0.4 mL
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1150 RMB
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Beenbio -PR002-1
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1 mL
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1780 RMB
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Beenbio -PR002-5
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5 mL
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6825 RMB
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產(chǎn)品描述
BEENbio Anti Flag COIP磁珠在大小為1um的納米磁珠上供價(jià)結(jié)合了大量的小鼠Anti Flag單克隆抗體,與傳統(tǒng)的Anti Flag COIP瓊脂糖凝膠比較,抗體結(jié)合能力相同,背景更低,由于采用磁性分離,使得每次COIP可以節(jié)省40%的時(shí)間。
產(chǎn)品特性
項(xiàng)目
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特性
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抗體亞型
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鼠源IgG1
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抗體純化方法
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Protein A 純化制備
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適用范圍
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免疫共沉淀(IP),Flag tag蛋白純化
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推薦使用體積
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COIP: 500μl 細(xì)胞裂解液 使用 10μL磁珠
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融合蛋白結(jié)合容量
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大于1.1 mg Flag tagged protein/mL 磁珠
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儲(chǔ)存條件
4oC長(zhǎng)期穩(wěn)定,
使用說明
磁珠的準(zhǔn)備
重懸Anti Flag 免疫磁珠,取10 μL加入到500 μL TBS,洗滌3次,分離磁珠,棄上清。
樣品的結(jié)合(binding)
在上述沉淀中加入500 μL細(xì)胞裂解液,室溫緩慢孵育2小時(shí)或者4°C條件下過夜,分離磁珠,棄上清。
結(jié)合過程中,磁珠可能會(huì)出現(xiàn)聚團(tuán)或呈片狀,屬于正?,F(xiàn)象,不會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
洗滌(washing):0.5 mL TBS緩沖液洗滌四次,每次5min,分離磁珠,棄上清。
洗脫(elution):上述所得沉淀中加 入50 μL 1×蛋白上樣緩沖液,煮沸5 min,冷卻后分離磁珠,吸取上清液,進(jìn)行SDS-PAGE檢測(cè)。 應(yīng)用免疫磁珠分離成人骨髓中STRO-1陽性細(xì)胞。湖南protein A/G COIP免疫磁珠經(jīng)銷商價(jià)格4折起
免疫磁珠法分離膽囊CancerCD133陽性細(xì)胞及其生物學(xué)特性鑒定。甘肅anti-Flag COIP免疫磁珠代理價(jià)格4折起
免疫磁珠分離羊水來源OCT-4陽性胎兒干細(xì)胞的可行性.方法 采用免疫磁珠細(xì)胞分選法去除羊水細(xì)胞中CD44和SSEA4陽性細(xì)胞,使OCT-4陽性胎兒干細(xì)胞間接得到分離,體外培養(yǎng)擴(kuò)增后,觀察細(xì)胞生長(zhǎng)特性,免疫熒光染色計(jì)算OCT-4陽性胎兒干細(xì)胞得率,Real-TimePCR比較分離前后OCT-4表達(dá)量的差異,免疫組化檢測(cè)NANOG,AKP,MAP-2,NGFR和Myosin等細(xì)胞因子的表達(dá).結(jié)果 經(jīng)免疫磁珠分離的細(xì)胞接種12h內(nèi)貼壁生長(zhǎng),形態(tài)呈梭形,部分呈多角形,融合后形成輻射狀排列.免疫熒光染色OCT-4陽性細(xì)胞得率為(90.15±8.25)%,Real-TimePCR檢測(cè)結(jié)果顯示分離后細(xì)胞OCT-4的表達(dá)量較未分離細(xì)胞和MSC有***性差異(P<0.01).原代培養(yǎng)可獲得(1~2)×107個(gè)細(xì)胞,3代可獲得(2~4)×108個(gè)細(xì)胞,傳至10代以后細(xì)胞的增殖能力下降.免疫組化結(jié)果顯示OCT-4陽性胎兒干細(xì)胞表達(dá)NANOG,AKP,MAP-2和NGFR等細(xì)胞因子.結(jié)論 免疫磁珠細(xì)胞分選法可以從羊水中分離出OCT-4陽性的胎兒干細(xì)胞,分離后的細(xì)胞保持干細(xì)胞原有特性及生物學(xué)特征,可作為組織工程種子細(xì)胞.甘肅anti-Flag COIP免疫磁珠代理價(jià)格4折起
上海普平生物科技有限公司致力于化工,以科技創(chuàng)新實(shí)現(xiàn)***管理的追求。普平生物深耕行業(yè)多年,始終以客戶的需求為向?qū)?,為客戶提?**的科研試劑、耗材、儀器,納米脂質(zhì)體,細(xì)胞、分子、蛋白實(shí)驗(yàn),科研項(xiàng)目。普平生物致力于把技術(shù)上的創(chuàng)新展現(xiàn)成對(duì)用戶產(chǎn)品上的貼心,為用戶帶來良好體驗(yàn)。普平生物始終關(guān)注化工市場(chǎng),以敏銳的市場(chǎng)洞察力,實(shí)現(xiàn)與客戶的成長(zhǎng)共贏。