免疫磁珠分離法純化抗血清的實驗條件,并與A蛋白親和層析法比較純化效果,以求得到一種簡便,快速,高效的純化IgG方法.結(jié)果表明:從5只新西蘭兔獲得210 mL試管凝集效價高達(dá)1:5 120的兔抗鰻弧菌抗血清,磁珠與IgG結(jié)合10 min達(dá)到平衡,其比較大結(jié)合量為0.227 mg/mL;免疫磁珠分離法與A蛋白親和層析法得到的IgG純度都很高,經(jīng)過SDS-PAGE電泳都只得到25 ku和55 ku左右的兩條帶;免疫磁珠分離法得到的抗體ELISA效價高于A蛋白親和層析法;免疫磁珠分離法反應(yīng)所需時間(10 min)小于A蛋白親和層析法所需的20 min,其得率(11.5 mg/mL)也高于A蛋白親和層析法的10.25 mg/mL.人骨關(guān)節(jié)炎關(guān)節(jié)軟骨間充質(zhì)祖細(xì)胞的免疫磁珠分選和鑒定。上海COIP免疫磁珠哪家好
免疫磁珠技術(shù)(immunomagneticbeads,IMB)是近年來國內(nèi)外研究的一種新的免疫學(xué)技術(shù).隨著納米技術(shù)的不斷發(fā)展,納米免疫磁珠具備了良好的磁感應(yīng)性,超順磁性,高特異性,高濃縮性,高分離率,且不影響細(xì)胞活性等優(yōu)點,因此它能從大量外周血細(xì)胞中篩選出帶有特異性制備可高效,特異地分離單增李斯特菌的免疫磁珠.探討羧基修飾磁珠與多克隆抗體的不同偶聯(lián)條件和免疫磁珠捕獲單增李斯特菌的能力.方法:以單增李斯特菌作為抗原,免疫新西蘭兔,獲得兔源多克隆抗體,鑒定其與單增李斯特菌體的結(jié)合能力;選擇6種不同的偶聯(lián)緩沖溶液,設(shè)置了6個主要偶聯(lián)時間和6組偶聯(lián)溫度,通過比較磁珠與抗體偶聯(lián)后上清中剩余的抗體量來確定比較好偶聯(lián)條件.結(jié)果:制備的多克隆抗體效價為1.3×105,該抗體與單增李斯特菌體有較好的結(jié)合,抗體與1mg羧基修飾磁珠在pH6.0的0.01mol/L一水嗎啉乙磺酸緩沖溶液(MES)中,37℃偶聯(lián)2h,偶聯(lián)抗體的量為160μg;制得的免疫磁珠的捕獲率可達(dá)77.0%.結(jié)論:獲得羧基磁珠與抗體偶聯(lián)的比較好條件,該免疫磁珠用于食品中單增李斯特菌的檢測,與常規(guī)的平皿增菌培養(yǎng)顯色法比較,檢測時間至少縮短20h.標(biāo)記的腫瘤細(xì)胞湖北protein A/G 免疫共沉淀免疫磁珠性能免疫磁珠的制備及其富集,分離單增李斯特菌的研究。
免疫共沉淀檢測(CO-IP)
BEENbio提供免疫共沉淀(CO-IP)檢測服務(wù)。可對兩種已知蛋白是否存在相互作用進(jìn)行驗證,也可以驗證在總蛋白中是否含有與已知蛋白相互作用的未知蛋白。其實驗方法為將靶蛋白(X)與目的蛋白(Y)在同一細(xì)胞內(nèi)孵育,形成“靶蛋白-目的蛋白”復(fù)合物。將靶蛋白的特異性抗體與復(fù)合物共孵育,形成“抗體-靶蛋白-目的蛋白”復(fù)合物,利用Proterin A/G純化。通過SDS-PAGE銀染,結(jié)合Western Blot及液相質(zhì)譜等對兩種蛋白之間是否存在相互作用進(jìn)行定性分析。
服務(wù)優(yōu)勢
? 使用銀染技術(shù),靈敏度是考馬斯亮藍(lán)100倍,SDS-PAGE電泳結(jié)果更加清晰;
? 擁有液相質(zhì)譜及Fortebio等完整配套檢測設(shè)備,可對檢測結(jié)果進(jìn)一步分析;
? 實驗重復(fù)進(jìn)行兩次,排除隨機因素影響,結(jié)果更加可靠;
? 擁有蛋白、抗體等制備平臺,您只需提供序列便可完成全部實驗;
免疫磁珠分離羊水來源OCT-4陽性胎兒干細(xì)胞的可行性.方法 采用免疫磁珠細(xì)胞分選法去除羊水細(xì)胞中CD44和SSEA4陽性細(xì)胞,使OCT-4陽性胎兒干細(xì)胞間接得到分離,體外培養(yǎng)擴增后,觀察細(xì)胞生長特性,免疫熒光染色計算OCT-4陽性胎兒干細(xì)胞得率,Real-TimePCR比較分離前后OCT-4表達(dá)量的差異,免疫組化檢測NANOG,AKP,MAP-2,NGFR和Myosin等細(xì)胞因子的表達(dá).結(jié)果 經(jīng)免疫磁珠分離的細(xì)胞接種12h內(nèi)貼壁生長,形態(tài)呈梭形,部分呈多角形,融合后形成輻射狀排列.免疫熒光染色OCT-4陽性細(xì)胞得率為(90.15±8.25)%,Real-TimePCR檢測結(jié)果顯示分離后細(xì)胞OCT-4的表達(dá)量較未分離細(xì)胞和MSC有***性差異(P<0.01).原代培養(yǎng)可獲得(1~2)×107個細(xì)胞,3代可獲得(2~4)×108個細(xì)胞,傳至10代以后細(xì)胞的增殖能力下降.免疫組化結(jié)果顯示OCT-4陽性胎兒干細(xì)胞表達(dá)NANOG,AKP,MAP-2和NGFR等細(xì)胞因子.結(jié)論 免疫磁珠細(xì)胞分選法可以從羊水中分離出OCT-4陽性的胎兒干細(xì)胞,分離后的細(xì)胞保持干細(xì)胞原有特性及生物學(xué)特征,可作為組織工程種子細(xì)胞.自制免疫磁珠在前列腺tumor組織干細(xì)胞提取中的應(yīng)用。
免疫磁珠法分選人骨髓多能成體祖細(xì)胞,觀察其分選效果,建立體外分選純化及培養(yǎng)人骨髓來源多能成體祖細(xì)胞(hMAPCs)的方法.方法:取健康成人志愿者適量骨髓后采用梯度密度離心法分離獲取單個核細(xì)胞,在自制培養(yǎng)基下貼壁培養(yǎng)后,將獲取的骨髓貼壁細(xì)胞通過CD45,血糖蛋白A(GlyA)免疫微磁珠(miniMACS)負(fù)分選,錐蟲藍(lán)拒染實驗計數(shù)MACS分選前后細(xì)胞活力.流式細(xì)胞儀鑒定分選后細(xì)胞純度;流式細(xì)胞儀分析培養(yǎng)細(xì)胞CD29,CD44,CD34和HLA-DR表達(dá)情況.結(jié)果:通過MACS分選,平均每1×106/ml骨髓貼壁細(xì)胞可分選出約(5~10)×104/mlhMAPCs,分選后的hMAPCs細(xì)胞生長良好,**長傳代到第20代.分選前后細(xì)胞活力分別為(96.7±1.7)%和(96.0±2.4)%,無明顯差異;流式細(xì)胞儀分析獲取的CD45-,GlyA-細(xì)胞純度大于98%;流式細(xì)胞儀檢測hMAPCs中CD29陽性表達(dá)細(xì)胞比率為99.2%,CD44陽性細(xì)胞比率為98.3%,CD34陽性細(xì)胞比率為1.2%,HLA-DR陽性細(xì)胞比率為5.3%.結(jié)論:CD45,GlyA免疫微磁珠負(fù)分選可從骨髓中分離高純度的hMAPCs;分選后hMAPCs在自行研制的培養(yǎng)基中有較強的增殖能力.利用BEENBIO免疫磁珠技術(shù)檢測大腸*細(xì)胞。江蘇蛋白質(zhì)免疫共沉淀免疫磁珠代理價格4折起
多聚抗原肽免疫磁珠在制備單表位抗體中的應(yīng)用。上海COIP免疫磁珠哪家好
建立免疫磁珠法分離,并培養(yǎng)人腦膠質(zhì)瘤干細(xì)胞的方法.方法將術(shù)中取得的腦膠質(zhì)瘤標(biāo)本,通過剪切、消化和吹打成單細(xì)胞懸液,篩網(wǎng)過濾,免疫磁珠分選試劑盒分選出CD133+細(xì)胞,用神經(jīng)干細(xì)胞無血清培養(yǎng)法培養(yǎng)出具有單細(xì)胞克隆能力的細(xì)胞球,取第3代進(jìn)行誘導(dǎo)分化,分化前后用免疫細(xì)胞熒光化學(xué)方法鑒定**干細(xì)胞及分化后細(xì)胞.結(jié)果免疫磁珠分選出的CD133-細(xì)胞,可懸浮生長并形成神經(jīng)干細(xì)胞樣細(xì)胞球,有較強的增殖能力,干細(xì)胞標(biāo)志物巢蛋白(nestin)陽性,分化后細(xì)胞表達(dá)神經(jīng)元小管相關(guān)蛋白β-3(β-tubulin3)和星形膠質(zhì)細(xì)胞膠質(zhì)纖維酸性蛋白質(zhì)(GFAP)特異性抗原,而巢蛋白、CD133陰性,并具有**的核型.結(jié)論免疫磁珠分選法可避免原代培養(yǎng)中眾多細(xì)胞混雜牛長的發(fā)生,能夠從大量腫瘤細(xì)胞中分離出只占極少比例的**干細(xì)胞,細(xì)胞結(jié)合磁珠后在體外可以長期培養(yǎng)和傳代,進(jìn)一步證實了**干細(xì)胞的存在,并為膠質(zhì)瘤干細(xì)胞的研究奠定基礎(chǔ).上海COIP免疫磁珠哪家好
上海普平生物科技有限公司是一家上海普平生物科技有限公司上海普平生物科技有限公司上海普平生物科技有限公司從事生物科技領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開發(fā)、技術(shù)咨詢、技術(shù)轉(zhuǎn)讓;實驗室設(shè)備、化工原料及產(chǎn)品的銷售;計算機軟件開發(fā);計算機網(wǎng)絡(luò)工程;從事貨物及技術(shù)進(jìn)出口業(yè)務(wù)。 的公司,是一家集研發(fā)、設(shè)計、生產(chǎn)和銷售為一體的專業(yè)化公司。普平生物擁有一支經(jīng)驗豐富、技術(shù)創(chuàng)新的專業(yè)研發(fā)團(tuán)隊,以高度的專注和執(zhí)著為客戶提供科研試劑、耗材、儀器,納米脂質(zhì)體,細(xì)胞、分子、蛋白實驗,科研項目。普平生物致力于把技術(shù)上的創(chuàng)新展現(xiàn)成對用戶產(chǎn)品上的貼心,為用戶帶來良好體驗。普平生物始終關(guān)注化工市場,以敏銳的市場洞察力,實現(xiàn)與客戶的成長共贏。