免疫磁珠技術(shù)(immunomagneticbeads,IMB)是近年來(lái)國(guó)內(nèi)外研究的一種新的免疫學(xué)技術(shù).隨著納米技術(shù)的不斷發(fā)展,納米免疫磁珠具備了良好的磁感應(yīng)性,超順磁性,高特異性,高濃縮性,高分離率,且不影響細(xì)胞活性等優(yōu)點(diǎn),因此它能從大量外周血細(xì)胞中篩選出帶有特異性制備可高效,特異地分離單增李斯特菌的免疫磁珠.探討羧基修飾磁珠與多克隆抗體的不同偶聯(lián)條件和免疫磁珠捕獲單增李斯特菌的能力.方法:以單增李斯特菌作為抗原,免疫新西蘭兔,獲得兔源多克隆抗體,鑒定其與單增李斯特菌體的結(jié)合能力;選擇6種不同的偶聯(lián)緩沖溶液,設(shè)置了6個(gè)主要偶聯(lián)時(shí)間和6組偶聯(lián)溫度,通過(guò)比較磁珠與抗體偶聯(lián)后上清中剩余的抗體量來(lái)確定比較好偶聯(lián)條件.結(jié)果:制備的多克隆抗體效價(jià)為1.3×105,該抗體與單增李斯特菌體有較好的結(jié)合,抗體與1mg羧基修飾磁珠在pH6.0的0.01mol/L一水嗎啉乙磺酸緩沖溶液(MES)中,37℃偶聯(lián)2h,偶聯(lián)抗體的量為160μg;制得的免疫磁珠的捕獲率可達(dá)77.0%.結(jié)論:獲得羧基磁珠與抗體偶聯(lián)的比較好條件,該免疫磁珠用于食品中單增李斯特菌的檢測(cè),與常規(guī)的平皿增菌培養(yǎng)顯色法比較,檢測(cè)時(shí)間至少縮短20h.標(biāo)記的腫瘤細(xì)胞免疫磁珠富集與免疫層析一體化檢測(cè)甲型流感病毒的研究。安徽anti-HA COIP免疫磁珠銷(xiāo)售

免疫共沉淀（COIP）優(yōu)點(diǎn)

（1）相互作用的蛋白質(zhì)都是經(jīng)翻譯后修飾的，處于天然狀態(tài)；

（2）蛋白的相互作用是在自然狀態(tài)下進(jìn)行的，可以避免人為的影響；

（3）可以分離得到天然狀態(tài)的相互作用蛋白復(fù)合物。

免疫共沉淀（COIP）缺點(diǎn)

（1）可能檢測(cè)不到低親和力和瞬間的蛋白質(zhì)－蛋白質(zhì)相互作用；

（2）兩種蛋白質(zhì)的結(jié)合可能不是直接結(jié)合，而可能有第三者在中間起橋梁作用；

（3）必須在實(shí)驗(yàn)前預(yù)測(cè)目的蛋白是什么，以選擇***檢測(cè)的抗體，所以，若預(yù)測(cè)不正確，實(shí)驗(yàn)就得不到結(jié)果，方法本身具有冒險(xiǎn)性。

（4）靈敏度沒(méi)有親和色譜高。 浙江anti-Myc 免疫共沉淀免疫磁珠銷(xiāo)售BEENbio ProteinA/G Co-IP&CHIP磁珠蛋白相互作用。

一種免疫磁珠及制作方法和用于檢測(cè)的方法及測(cè)試板,所述的免疫磁珠至少由磁性載體微球組成,該磁性載體微球結(jié)合有至少一種免疫配基;所述的磁性載體微球由磁性納米粒和高分子骨架材料組成,其**為金屬小顆粒,**外為高分子材料,**外層為帶有各種可以結(jié)合不同免疫配基功能基因的功能層;免疫磁珠的制作方法包括:磁珠預(yù)處理;活化磁珠;偶聯(lián)抗體的制作;對(duì)偶聯(lián)抗體用封閉液封閉;免疫磁珠純化等;用于檢測(cè)的方法是:利用免疫學(xué)反應(yīng)夾心法,競(jìng)爭(zhēng)法以及間接法檢測(cè)不同物質(zhì)的存在,并在測(cè)試板上設(shè)置對(duì)照體系:測(cè)試板由包被試紙條,偶聯(lián)墊,樣品墊,吸水墊,覆蓋膜以及測(cè)試板外卡組成,它具有靈敏度高,定量準(zhǔn)確,不受光學(xué)因素干擾,磁信號(hào)穩(wěn)定,不易衰減,試劑簡(jiǎn)單,穩(wěn)定,低廉,檢測(cè)快速,適合現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)等特點(diǎn).

免疫磁珠分離法分選弓形蟲(chóng)速殖子,以去除宿主細(xì)胞成分,并 盡可能對(duì)蟲(chóng)體的生物學(xué)特性無(wú)不良影響,為弓形蟲(chóng)的基礎(chǔ)與臨床研究提供技術(shù)基礎(chǔ).方法采用弓形蟲(chóng)Wh3株( China 1基因型)速殖子***小鼠,提取腹腔液,常規(guī)方法制備速殖子可溶性抗原,免疫家兔,獲得兔抗弓形蟲(chóng)多克隆IgG抗體.用抗體包被的免疫磁珠對(duì)小鼠腹腔液內(nèi) 弓形蟲(chóng)速殖子進(jìn)行純化,比較其純度,回收率,蟲(chóng)體活力,毒力與***性.結(jié)果用免疫磁珠分離技術(shù)純化弓形蟲(chóng)速殖子后,其純度提高到98.2%,細(xì)胞***率為 96%,蟲(chóng)體回收率為73.5%;用內(nèi)鹽法( MTS )細(xì)胞增殖與毒性檢測(cè)試劑盒檢測(cè)分離后的速殖子活性為95.6%.定量分組***小鼠后死亡時(shí)間無(wú)***性差異.結(jié)論免疫磁珠分離的速殖子純度,細(xì)胞***率和 蟲(chóng)體回收率較高,能有效去除宿主細(xì)胞,且對(duì)速殖子的活性和毒力無(wú)影響.該法操作簡(jiǎn)便快速,無(wú)需昂貴的儀器設(shè)備,具有較大的實(shí)用價(jià)值.BEENbio Anti Myc Co-IP&CHIP磁珠 蛋白相互作用。

建立有效的人類(lèi)神經(jīng)干細(xì)胞分離純化系統(tǒng)和方法.方法:無(wú)菌取孕24周流產(chǎn)胎兒的室下區(qū)腦組織,制備細(xì)胞懸液,用磁性微珠標(biāo)記的CD133單克隆抗體與細(xì)胞孵育,通過(guò)磁分選器分離出CD133(+)和CD133(-)細(xì)胞,通過(guò)體外培養(yǎng)并誘導(dǎo)分化,觀察CD133陽(yáng)性細(xì)胞和陰性細(xì)胞的增殖情況及分化能力.結(jié)果:經(jīng)免疫磁珠分選的室下區(qū)腦組織中,CD133(+)細(xì)胞占胚胎腦組織細(xì)胞的2%左右,該細(xì)胞體外擴(kuò)增能力強(qiáng),細(xì)胞呈球形生長(zhǎng),并易聚集成團(tuán),培養(yǎng)5d,10d,15d,20d進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù),細(xì)胞增長(zhǎng)率分別為1.79%,4.82%,7.21%,14.66%,誘導(dǎo)分化后的細(xì)胞經(jīng)染色鑒定可分化為神經(jīng)元,神經(jīng)膠質(zhì)等多種神經(jīng)細(xì)胞,陰性細(xì)胞擴(kuò)增能力弱,活細(xì)胞計(jì)數(shù)以死細(xì)胞數(shù)量居多,大約705,另外一些細(xì)胞貼壁分化.結(jié)論:免疫磁珠法簡(jiǎn)便,有效,經(jīng)免疫磁珠分離的神經(jīng)干細(xì)胞在體外能進(jìn)一步培養(yǎng)擴(kuò)增并分化.自制免疫磁珠在前列腺tumor組織干細(xì)胞提取中的應(yīng)用。安徽anti-HA COIP免疫磁珠銷(xiāo)售

密度梯度離心聯(lián)合上皮細(xì)胞黏附分子免疫磁珠富集法檢測(cè)卵巢Cancer循環(huán)腫瘤細(xì)胞及其與腫瘤復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性.安徽anti-HA COIP免疫磁珠銷(xiāo)售

建立檢測(cè)人血清抗白***烯醇化酶(Eno)IgG類(lèi)抗體的免疫磁珠法,并評(píng)估其在***血癥診斷中的價(jià)值。方法將Eno重組蛋白耦聯(lián)至磁性微珠上,以辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的羊抗人IgG為二抗,優(yōu)化免疫磁珠法的反應(yīng)條件,考察其精密度和特異性。收集經(jīng)血培養(yǎng)確診的***血癥患者(n=113)、***定植者(n=50)、細(xì)菌菌血癥患者(n=30)和健康人對(duì)照者(n=100)血清,用免疫磁珠法測(cè)定抗Eno抗體,并與ELISA法結(jié)果進(jìn)行比較。結(jié)果免疫磁珠法測(cè)定抗Eno抗體的批內(nèi)、批間變異系數(shù)(CV)分別為8.2%和14.2%,重組Eno抗原對(duì)相應(yīng)抗體的阻斷率為91.6%。以吸光度(A)值0.29為cutoff值時(shí),診斷***血癥的敏感性、特異性、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值分別為80.5%、92.3%、90.1%和84.5%。免疫磁珠法的敏感性和特異性與ELISA法比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,但檢測(cè)流程從37℃2.5h縮短至常溫1h。結(jié)論免疫磁珠法檢測(cè)抗EnoIgG類(lèi)抗體簡(jiǎn)便、快捷、可靠,在侵襲性******研究中具有潛在的應(yīng)用價(jià)值。安徽anti-HA COIP免疫磁珠銷(xiāo)售

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