免疫磁珠法分離細(xì)胞是基于細(xì)胞表面抗原能與連接有磁珠的特異性單抗相結(jié)合，在外加磁場(chǎng)中，通過(guò)抗體與磁珠相連的細(xì)胞被吸附而滯留在磁場(chǎng)中，無(wú)該種表面抗原的細(xì)胞由于不能與連接著磁珠的特異性單抗結(jié)合而沒(méi)有磁性，不在磁場(chǎng)中停留，從而使細(xì)胞得以分離。免疫磁珠應(yīng)用分為正選法和負(fù)選法：正選法－磁珠結(jié)合的細(xì)胞就是所要分離獲得的細(xì)胞負(fù)選法－磁珠結(jié)合不需要的細(xì)胞，游離于上清液的細(xì)胞為所需細(xì)胞，一般而言，負(fù)選法比正選法的磁珠用量大磁珠：大小在0.1－0.45mm包被了生產(chǎn)的高質(zhì)量單抗磁珠已為白細(xì)胞亞群的分選所優(yōu)化將包被了特異性單抗的BDIMag磁珠加入細(xì)胞懸液，磁珠特異性地與有相應(yīng)抗原的細(xì)胞亞群結(jié)合，通過(guò)分離得到的連有磁珠的細(xì)胞可直接用于功能試驗(yàn)和用流式細(xì)胞儀檢測(cè)。免疫磁珠法分離白血病轉(zhuǎn)基因小鼠骨髓造血干細(xì)胞。江蘇COIP免疫磁珠批量定制

精原干細(xì)胞(spermatogonialstemcells,SSCs)富集純化是利用SSCs進(jìn)行基因修飾新方法等研究的前提基礎(chǔ)。采用免疫磁珠分選法,使用干細(xì)胞抗體CD90.2進(jìn)行小鼠SSCs的純化富集,并采用流式細(xì)胞分析法和定量PCR驗(yàn)證了磁珠分選效率。流式細(xì)胞分析結(jié)果:免疫磁珠分選后SSCs純度為50.11%。熒光定量PCR檢測(cè)結(jié)果:磁珠分選后支持細(xì)胞特異表達(dá)基因GATA4***下調(diào)(6倍)、SSCs表達(dá)基因GFRα-1上調(diào)(6.5倍)、生殖干細(xì)胞特異表達(dá)基因OCT4極***上調(diào)(5.9倍),3個(gè)基因相對(duì)表達(dá)量的變化說(shuō)明,免疫磁珠分選效率為6倍。流式細(xì)胞分析法所產(chǎn)生的偏差可能是受到了未解離磁珠及SSCs本身轉(zhuǎn)基因熒光的影響。

免疫磁珠法分選人骨髓多能成體祖細(xì)胞,觀察其分選效果,建立體外分選純化及培養(yǎng)人骨髓來(lái)源多能成體祖細(xì)胞(hMAPCs)的方法.方法:取健康成人志愿者適量骨髓后采用梯度密度離心法分離獲取單個(gè)核細(xì)胞,在自制培養(yǎng)基下貼壁培養(yǎng)后,將獲取的骨髓貼壁細(xì)胞通過(guò)CD45,血糖蛋白A(GlyA)免疫微磁珠(miniMACS)負(fù)分選,錐蟲(chóng)藍(lán)拒染實(shí)驗(yàn)計(jì)數(shù)MACS分選前后細(xì)胞活力.流式細(xì)胞儀鑒定分選后細(xì)胞純度;流式細(xì)胞儀分析培養(yǎng)細(xì)胞CD29,CD44,CD34和HLA-DR表達(dá)情況.結(jié)果:通過(guò)MACS分選,平均每1×106/ml骨髓貼壁細(xì)胞可分選出約(5~10)×104/mlhMAPCs,分選后的hMAPCs細(xì)胞生長(zhǎng)良好,**長(zhǎng)傳代到第20代.分選前后細(xì)胞活力分別為(96.7±1.7)%和(96.0±2.4)%,無(wú)明顯差異;流式細(xì)胞儀分析獲取的CD45-,GlyA-細(xì)胞純度大于98%;流式細(xì)胞儀檢測(cè)hMAPCs中CD29陽(yáng)性表達(dá)細(xì)胞比率為99.2%,CD44陽(yáng)性細(xì)胞比率為98.3%,CD34陽(yáng)性細(xì)胞比率為1.2%,HLA-DR陽(yáng)性細(xì)胞比率為5.3%.結(jié)論:CD45,GlyA免疫微磁珠負(fù)分選可從骨髓中分離高純度的hMAPCs;分選后hMAPCs在自行研制的培養(yǎng)基中有較強(qiáng)的增殖能力.BEENbio Anti Flag Co-IP&CHIP磁珠 蛋白相互作用。

Protein A/G COIP & CHIP 磁珠

產(chǎn)品價(jià)格       

產(chǎn)品描述

BEENbio Protein A/G Co-IP & CHIP磁珠在大小為2um的納米磁珠上供價(jià)結(jié)合了大量的Protein A/G蛋白，與傳統(tǒng)的Protein A/G 免疫共沉淀瓊脂糖凝膠比較，抗體結(jié)合能力相同，背景更低的特點(diǎn)，由于采用磁性分離，使得每次Co-IP 和 CHIP可以節(jié)省40%的時(shí)間。

產(chǎn)品特性

儲(chǔ)存條件

pH 6-8, 4^oC長(zhǎng)期穩(wěn)定，禁止產(chǎn)品凍結(jié)。

BEENbio ProteinA/G Co-IP&CHIP磁珠全國(guó)招商代理。江蘇COIP免疫磁珠批量定制

免疫共沉淀（COIP）優(yōu)點(diǎn)

（1）相互作用的蛋白質(zhì)都是經(jīng)翻譯后修飾的，處于天然狀態(tài)；

（2）蛋白的相互作用是在自然狀態(tài)下進(jìn)行的，可以避免人為的影響；

（3）可以分離得到天然狀態(tài)的相互作用蛋白復(fù)合物。

免疫共沉淀（COIP）缺點(diǎn)

（1）可能檢測(cè)不到低親和力和瞬間的蛋白質(zhì)－蛋白質(zhì)相互作用；

（2）兩種蛋白質(zhì)的結(jié)合可能不是直接結(jié)合，而可能有第三者在中間起橋梁作用；

（3）必須在實(shí)驗(yàn)前預(yù)測(cè)目的蛋白是什么，以選擇***檢測(cè)的抗體，所以，若預(yù)測(cè)不正確，實(shí)驗(yàn)就得不到結(jié)果，方法本身具有冒險(xiǎn)性。

（4）靈敏度沒(méi)有親和色譜高。 江蘇COIP免疫磁珠批量定制

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