抗熒光素單克隆抗體免疫磁珠,并進行初步應(yīng)用。方法采用B淋巴細胞雜交瘤技術(shù)制備抗熒光素單克隆抗體;制備腹水,經(jīng)50%硫酸銨粗提后,再經(jīng)陰離子交換樹脂DE52進一步純化單克隆抗體;采用氧化共沉淀法制備納米磁性粒子;乳液聚合法制備羧基磁性微球;用碳二亞胺將抗熒光素單克隆抗體共價偶聯(lián)于磁性微球表面,制備抗熒光素單克隆抗體免疫磁珠。用制備的免疫磁珠檢測乙肝表面抗原,并與市售ELISA試劑盒的檢測結(jié)果進行比較。結(jié)果共獲得5株雜交瘤細胞株,其中1F12細胞株分泌的抗體效價、相對親和力較高,特異性較好;純化的1F12株單抗的純度達95%,蛋白含量為2.4mg/ml,ELISA效價為106,相對親和力為0.2mg/L,與FITC標(biāo)記的BSA可特異性結(jié)合;納米磁性粒子的平均粒徑為150nm,鐵含量為71.63%;羧基磁性微球的平均粒徑為210nm,羧基含量約為2.15mmol/g;每克羧基磁性微球可結(jié)合抗熒光素單克隆抗體約12mg,制備的免疫磁珠可有效結(jié)合熒光素標(biāo)記的蛋白。應(yīng)用抗熒光素單克隆抗體免疫磁珠檢測乙型肝炎表面抗原的靈敏度高于ELISA試劑,檢測限達0.1ng/ml。結(jié)論成功制備了抗熒光素單克隆抗體免疫磁珠,其具有應(yīng)用于免疫檢測分析的價值。BEENbio Anti HA Co-IP&CHIP磁珠 Cell Nature Science。安徽protein A/G 免疫共沉淀免疫磁珠生產(chǎn)廠家

常用的磁珠法DNA提取試劑盒，國外的有Dynal、Qiagen等，國內(nèi)將磁珠應(yīng)用于核酸提取的研究起源于02年左右，經(jīng)過近些年的反復(fù)試驗，形成了穩(wěn)定的核酸提取體系，并已被***用于一些疾?。ㄈ缫腋巍⒈?、結(jié)核菌）等的定量檢測（如惠爾納米的系列磁珠法核酸提取試劑盒）。國產(chǎn)磁珠法試劑盒與進口產(chǎn)品相比，已不單單是只具有價格優(yōu)勢，其產(chǎn)品的穩(wěn)定性、高效性、提取出的核酸的質(zhì)量與產(chǎn)量都足以與進口磁珠法試劑盒媲美。但是進口試劑盒長期以來形成的完善的銷售渠道對國產(chǎn)試劑盒的推廣是一大挑戰(zhàn)。安徽anti-Myc 免疫共沉淀免疫磁珠供應(yīng)商BEENbio ProteinA/G Co-IP&CHIP磁珠廠家直銷。

免疫共沉淀（COIP）優(yōu)點

（1）相互作用的蛋白質(zhì)都是經(jīng)翻譯后修飾的，處于天然狀態(tài)；

（2）蛋白的相互作用是在自然狀態(tài)下進行的，可以避免人為的影響；

（3）可以分離得到天然狀態(tài)的相互作用蛋白復(fù)合物。

免疫共沉淀（COIP）缺點

（1）可能檢測不到低親和力和瞬間的蛋白質(zhì)－蛋白質(zhì)相互作用；

（2）兩種蛋白質(zhì)的結(jié)合可能不是直接結(jié)合，而可能有第三者在中間起橋梁作用；

（3）必須在實驗前預(yù)測目的蛋白是什么，以選擇***檢測的抗體，所以，若預(yù)測不正確，實驗就得不到結(jié)果，方法本身具有冒險性。

（4）靈敏度沒有親和色譜高。

免疫磁性細胞分選系統(tǒng)分離純化骨髓衍生肝干細胞亞群c-Kit^+lin^-。方法:實驗于2006—07/08在南方醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心完成。6~8周齡的SPF級純系BALB,C雄性小鼠10只,體質(zhì)量18~20g。收集小鼠股骨骨髓細胞,利用免疫磁性細胞分選系統(tǒng),通過兩步法分選純化c-Kit^+lin^-:將獲取的lin^-細胞懸液8℃條件下1500r/min離心10min,棄上清,按80μL/10^7加入Buffer重懸細胞。按20μL/10^7加生物素抗體磁珠,混勻,4℃冰箱孵育15min,按1 mL/10^7加入Buffer洗細胞1次,8℃條件下1500r/min離心10min,棄上清,按500μL/10^8加入Buffer重懸細胞。Buffer 500μL潤MS柱,懸液過柱后,Buffer 500μL/次洗柱3次,柱子脫離磁場,加1mL Buffer,用配套柱塞推出柱中的c-Kit^+lin^-細胞,收集到c-kit^+lin-細胞,細胞計數(shù)。取2.0x108個細胞分成10等份,流式細胞儀分析c-Kit^+lin^-細胞純度,計算回收率,評估純化效率,苔盼蘭染色檢測純化前后的細胞活力。計算活細胞的百分率。細胞純度和細胞回收率的計算:細胞純度:分離產(chǎn)物中的陽性細胞數(shù),分離細胞的總細胞數(shù)×100%,細胞回收率:分離產(chǎn)物中的陽性細胞數(shù),起始標(biāo)本陽性細胞總數(shù)×100%。BEENbio Anti Flag Co-IP&CHIP磁珠 蛋白相互作用。

精原干細胞(spermatogonialstemcells,SSCs)富集純化是利用SSCs進行基因修飾新方法等研究的前提基礎(chǔ)。采用免疫磁珠分選法,使用干細胞抗體CD90.2進行小鼠SSCs的純化富集,并采用流式細胞分析法和定量PCR驗證了磁珠分選效率。流式細胞分析結(jié)果:免疫磁珠分選后SSCs純度為50.11%。熒光定量PCR檢測結(jié)果:磁珠分選后支持細胞特異表達基因GATA4***下調(diào)(6倍)、SSCs表達基因GFRα-1上調(diào)(6.5倍)、生殖干細胞特異表達基因OCT4極***上調(diào)(5.9倍),3個基因相對表達量的變化說明,免疫磁珠分選效率為6倍。流式細胞分析法所產(chǎn)生的偏差可能是受到了未解離磁珠及SSCs本身轉(zhuǎn)基因熒光的影響。免疫磁珠法分離成人骨髓來源神經(jīng)干細胞的生物學(xué)特征。浙江COIP免疫磁珠市場報價

免疫磁珠分選兔前軟骨干細胞及細胞研究平臺的建立。安徽protein A/G 免疫共沉淀免疫磁珠生產(chǎn)廠家

免疫磁珠分離法分選弓形蟲速殖子,以去除宿主細胞成分,并 盡可能對蟲體的生物學(xué)特性無不良影響,為弓形蟲的基礎(chǔ)與臨床研究提供技術(shù)基礎(chǔ).方法采用弓形蟲Wh3株( China 1基因型)速殖子***小鼠,提取腹腔液,常規(guī)方法制備速殖子可溶性抗原,免疫家兔,獲得兔抗弓形蟲多克隆IgG抗體.用抗體包被的免疫磁珠對小鼠腹腔液內(nèi) 弓形蟲速殖子進行純化,比較其純度,回收率,蟲體活力,毒力與***性.結(jié)果用免疫磁珠分離技術(shù)純化弓形蟲速殖子后,其純度提高到98.2%,細胞***率為 96%,蟲體回收率為73.5%;用內(nèi)鹽法( MTS )細胞增殖與毒性檢測試劑盒檢測分離后的速殖子活性為95.6%.定量分組***小鼠后死亡時間無***性差異.結(jié)論免疫磁珠分離的速殖子純度,細胞***率和 蟲體回收率較高,能有效去除宿主細胞,且對速殖子的活性和毒力無影響.該法操作簡便快速,無需昂貴的儀器設(shè)備,具有較大的實用價值.安徽protein A/G 免疫共沉淀免疫磁珠生產(chǎn)廠家

上海普平生物科技有限公司是一家上海普平生物科技有限公司上海普平生物科技有限公司上海普平生物科技有限公司從事生物科技領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開發(fā)、技術(shù)咨詢、技術(shù)轉(zhuǎn)讓；實驗室設(shè)備、化工原料及產(chǎn)品的銷售；計算機軟件開發(fā)；計算機網(wǎng)絡(luò)工程；從事貨物及技術(shù)進出口業(yè)務(wù)。 的公司，致力于發(fā)展為創(chuàng)新務(wù)實、誠實可信的企業(yè)。公司自創(chuàng)立以來，投身于科研試劑、耗材、儀器，納米脂質(zhì)體，細胞、分子、蛋白實驗，科研項目，是化工的主力軍。普平生物不斷開拓創(chuàng)新，追求出色，以技術(shù)為先導(dǎo)，以產(chǎn)品為平臺，以應(yīng)用為重點，以服務(wù)為保證，不斷為客戶創(chuàng)造更高價值，提供更優(yōu)服務(wù)。普平生物始終關(guān)注化工市場，以敏銳的市場洞察力，實現(xiàn)與客戶的成長共贏。