建立有效的人類神經(jīng)干細胞分離純化系統(tǒng)和方法.方法:無菌取孕24周流產(chǎn)胎兒的室下區(qū)腦組織,制備細胞懸液,用磁性微珠標記的CD133單克隆抗體與細胞孵育,通過磁分選器分離出CD133(+)和CD133(-)細胞,通過體外培養(yǎng)并誘導分化,觀察CD133陽性細胞和陰性細胞的增殖情況及分化能力.結(jié)果:經(jīng)免疫磁珠分選的室下區(qū)腦組織中,CD133(+)細胞占胚胎腦組織細胞的2%左右,該細胞體外擴增能力強,細胞呈球形生長,并易聚集成團,培養(yǎng)5d,10d,15d,20d進行活細胞計數(shù),細胞增長率分別為1.79%,4.82%,7.21%,14.66%,誘導分化后的細胞經(jīng)染色鑒定可分化為神經(jīng)元,神經(jīng)膠質(zhì)等多種神經(jīng)細胞,陰性細胞擴增能力弱,活細胞計數(shù)以死細胞數(shù)量居多,大約705,另外一些細胞貼壁分化.結(jié)論:免疫磁珠法簡便,有效,經(jīng)免疫磁珠分離的神經(jīng)干細胞在體外能進一步培養(yǎng)擴增并分化.BEENbio Anti HA Co-IP&CHIP磁珠全國招商代理。廣東anti-HA COIP免疫磁珠生產(chǎn)廠家
建立免疫磁珠法分離,并培養(yǎng)人腦膠質(zhì)瘤干細胞的方法.方法將術(shù)中取得的腦膠質(zhì)瘤標本,通過剪切、消化和吹打成單細胞懸液,篩網(wǎng)過濾,免疫磁珠分選試劑盒分選出CD133+細胞,用神經(jīng)干細胞無血清培養(yǎng)法培養(yǎng)出具有單細胞克隆能力的細胞球,取第3代進行誘導分化,分化前后用免疫細胞熒光化學方法鑒定**干細胞及分化后細胞.結(jié)果免疫磁珠分選出的CD133-細胞,可懸浮生長并形成神經(jīng)干細胞樣細胞球,有較強的增殖能力,干細胞標志物巢蛋白(nestin)陽性,分化后細胞表達神經(jīng)元小管相關(guān)蛋白β-3(β-tubulin3)和星形膠質(zhì)細胞膠質(zhì)纖維酸性蛋白質(zhì)(GFAP)特異性抗原,而巢蛋白、CD133陰性,并具有**的核型.結(jié)論免疫磁珠分選法可避免原代培養(yǎng)中眾多細胞混雜牛長的發(fā)生,能夠從大量腫瘤細胞中分離出只占極少比例的**干細胞,細胞結(jié)合磁珠后在體外可以長期培養(yǎng)和傳代,進一步證實了**干細胞的存在,并為膠質(zhì)瘤干細胞的研究奠定基礎.甘肅COIP免疫磁珠銷售BEENbio Anti Flag Co-IP&CHIP磁珠廠家直銷。
核酸提取磁珠通過對磁珠進行一定的包被(如硅基、氨基、羧基等),從而可以實現(xiàn)對核酸的高通量、自動化提取,這一技術(shù)產(chǎn)生于20世紀80年代,已經(jīng)有了成熟的試劑盒并形成為產(chǎn)業(yè)。隨著基因檢測、個性化給藥、產(chǎn)前診斷等的普及,在生物行業(yè)各領(lǐng)域都追求高通量、自動化的***,傳統(tǒng)DNA提取方法的局限愈來愈明顯,而磁珠法DNA提取的優(yōu)勢則愈來愈明顯:①能夠?qū)崿F(xiàn)自動化、大批量操作,已有96孔的核酸自動提取儀,用一個樣品的提取時間即可實現(xiàn)對96個樣品的處理,符合生物學高通量的操作要求,使得傳染性疾病爆發(fā)時能夠進行快速及時的應對,這一特點使得傳統(tǒng)方法望塵莫及;②操作簡單、用時短,整個提取流程只有四步,大多可以在36-40分鐘內(nèi)完成;③安全無毒,不使用傳統(tǒng)方法中的苯、氯仿等有毒試劑,對實驗操作人員的傷害減少到**少,完全符合現(xiàn)代環(huán)保理念;④磁珠與核酸的特異性結(jié)合使得提取的核酸純度高、濃度大。
免疫磁珠法分離,并培養(yǎng)人腦膠質(zhì)瘤干細胞的方法.方法將術(shù)中取得的腦膠質(zhì)瘤標本,通過剪切,消化和吹打成單細胞懸液,篩網(wǎng)過濾,免疫磁珠分選試劑盒分選出CD133^+細胞,用神經(jīng)干細胞無血清培養(yǎng)法培養(yǎng)出具有單細胞克隆能力的細胞球,取第3代進行誘導分化,分化前后用免疫細胞熒光化學方法鑒定**干細胞及分化后細胞.結(jié)果免疫磁珠分選出的CD133^+細胞,可懸浮生長并形成神經(jīng)干細胞樣細胞球,有較強的增殖能力,干細胞標志物巢蛋白(nestin)陽性,分化后細胞表達神經(jīng)元小管相關(guān)蛋白β-3(β-tubulin3)和星形膠質(zhì)細胞膠質(zhì)纖維酸性蛋白質(zhì)(GFAP)特異性抗原,而巢蛋白,CD133^+陰性,并具有**的核型.結(jié)論免疫磁珠分選法可避免原代培養(yǎng)中眾多細胞混雜生長的發(fā)生,能夠從大量腫瘤細胞中分離出只占極少比例的**干細胞,細胞結(jié)合磁珠后在體外可以長期培養(yǎng)和傳代,進一步證實了**干細胞的存在,并為膠質(zhì)瘤干細胞的研究奠定基礎.免疫磁珠分選兔前軟骨干細胞及細胞研究平臺的建立。
免疫共沉淀(COIP)優(yōu)點
(1)相互作用的蛋白質(zhì)都是經(jīng)翻譯后修飾的,處于天然狀態(tài);
(2)蛋白的相互作用是在自然狀態(tài)下進行的,可以避免人為的影響;
(3)可以分離得到天然狀態(tài)的相互作用蛋白復合物。
免疫共沉淀(COIP)缺點
(1)可能檢測不到低親和力和瞬間的蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用;
(2)兩種蛋白質(zhì)的結(jié)合可能不是直接結(jié)合,而可能有第三者在中間起橋梁作用;
(3)必須在實驗前預測目的蛋白是什么,以選擇***檢測的抗體,所以,若預測不正確,實驗就得不到結(jié)果,方法本身具有冒險性。
(4)靈敏度沒有親和色譜高。 BEENbio ProteinA/G Co-IP&CHIP磁珠 蛋白相互作用。甘肅COIP免疫磁珠銷售
免疫磁珠富集與免疫層析一體化檢測甲型流感病毒的研究。廣東anti-HA COIP免疫磁珠生產(chǎn)廠家
羥基淀粉沉淀去除臍血紅細胞和免疫磁珠(MACS)陽性選擇,建立富集,分離臍血CD34+細胞的簡易實用方法,通過造血祖細胞集落培養(yǎng)分析其在細胞因子作用下的增殖潛能,觀察羥基淀粉沉淀對造血細胞增殖功能的影響.方法:采用羥基淀粉沉淀和改進的MACS富集,分離臍血CD34+細胞,以甲纖半固體造血細胞培養(yǎng)法觀察其粒-單系細胞(CFU-GM)和紅系爆式集落(BFU-E)的數(shù)量和特性.結(jié)果:臍血分離前,CD34+細胞純度為1.5%~3%,MACS分離后其純度可達85%,羥基淀粉沉淀和MACS分離可達91%;CD34+造血祖細胞培養(yǎng)有明顯的增殖,采用IL-3,IL-6,SCF,GM-CSF,EPO等細胞因子組合擴增培養(yǎng)9~14d,CD34+細胞在液體培養(yǎng)中有明顯擴增,MACS分離后CD34+細胞總數(shù)增加39倍,羥基淀粉沉淀和MACS分離可增加45倍.結(jié)論:應用羥基淀粉沉淀和改進的MACS系統(tǒng)可有效富集,分離臍血CD34+細胞,羥基淀粉沉淀對CD34+細胞的富集,分離無影響;臍血細胞分離后作造血祖細胞培養(yǎng),可產(chǎn)生豐富的CFU-GM和BFU-E,說明羥基淀粉沉淀分離的CD34+細胞的增殖功能優(yōu)于MACS分離CD34+細胞的增殖功能.廣東anti-HA COIP免疫磁珠生產(chǎn)廠家
上海普平生物科技有限公司總部位于高逸路112-118號3幢5286室,是一家上海普平生物科技有限公司上海普平生物科技有限公司上海普平生物科技有限公司從事生物科技領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開發(fā)、技術(shù)咨詢、技術(shù)轉(zhuǎn)讓;實驗室設備、化工原料及產(chǎn)品的銷售;計算機軟件開發(fā);計算機網(wǎng)絡工程;從事貨物及技術(shù)進出口業(yè)務。 的公司。公司自創(chuàng)立以來,投身于科研試劑、耗材、儀器,納米脂質(zhì)體,細胞、分子、蛋白實驗,科研項目,是化工的主力軍。普平生物繼續(xù)堅定不移地走高質(zhì)量發(fā)展道路,既要實現(xiàn)基本面穩(wěn)定增長,又要聚焦關(guān)鍵領(lǐng)域,實現(xiàn)轉(zhuǎn)型再突破。普平生物創(chuàng)始人閆冰,始終關(guān)注客戶,創(chuàng)新科技,竭誠為客戶提供良好的服務。