核酸提取磁珠通過對(duì)磁珠進(jìn)行一定的包被(如硅基、氨基、羧基等),從而可以實(shí)現(xiàn)對(duì)核酸的高通量、自動(dòng)化提取,這一技術(shù)產(chǎn)生于20世紀(jì)80年代,已經(jīng)有了成熟的試劑盒并形成為產(chǎn)業(yè)。隨著基因檢測(cè)、個(gè)性化給藥、產(chǎn)前診斷等的普及,在生物行業(yè)各領(lǐng)域都追求高通量、自動(dòng)化的***,傳統(tǒng)DNA提取方法的局限愈來(lái)愈明顯,而磁珠法DNA提取的優(yōu)勢(shì)則愈來(lái)愈明顯:①能夠?qū)崿F(xiàn)自動(dòng)化、大批量操作,已有96孔的核酸自動(dòng)提取儀,用一個(gè)樣品的提取時(shí)間即可實(shí)現(xiàn)對(duì)96個(gè)樣品的處理,符合生物學(xué)高通量的操作要求,使得傳染性疾病爆發(fā)時(shí)能夠進(jìn)行快速及時(shí)的應(yīng)對(duì),這一特點(diǎn)使得傳統(tǒng)方法望塵莫及;②操作簡(jiǎn)單、用時(shí)短,整個(gè)提取流程只有四步,大多可以在36-40分鐘內(nèi)完成;③安全無(wú)毒,不使用傳統(tǒng)方法中的苯、氯仿等有毒試劑,對(duì)實(shí)驗(yàn)操作人員的傷害減少到**少,完全符合現(xiàn)代環(huán)保理念;④磁珠與核酸的特異性結(jié)合使得提取的核酸純度高、濃度大。利用人免疫球蛋白構(gòu)建免疫磁珠富集金葡菌條件優(yōu)化。天津anti-HA COIP免疫磁珠生產(chǎn)廠家
磁珠分離細(xì)胞STRO-1+的DPSC、EMSC中HNK-1、Nestin的表達(dá),進(jìn)一步了解DPSC的表型特點(diǎn)及與EMSC的相關(guān)性,為今后研究提供較為純化的細(xì)胞來(lái)源。方法采用間接免疫磁珠分離法獲得DPSC、EMSC,間接免疫熒光雙標(biāo)法檢測(cè)抗原HNK-1、Nestin的表達(dá)。結(jié)果磁珠分離前后進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù),大約有5%的DPSC為STRO-1+的細(xì)胞,大約有1%的EMSC為STRO-1+的細(xì)胞;STRO-1+的DPSC免疫熒光檢測(cè)同時(shí)表達(dá)HNK-1(++)、Nestin(+),STRO-1+的EMSC免疫熒光檢測(cè)顯示也同時(shí)表達(dá)HNK-1(++)、Nestin(++)。結(jié)論免疫磁珠分離法獲得STRO-1+陽(yáng)性的DPSC共表達(dá)EMSC的標(biāo)記HNK-1和Nestin,進(jìn)一步說明二者作為間充質(zhì)來(lái)源的干細(xì)胞,細(xì)胞表型具有繼承性。陜西protein A/G COIP免疫磁珠供應(yīng)商應(yīng)用免疫磁珠分離法純化弓形蟲速殖子的研究。
分離轉(zhuǎn)基因小鼠骨髓造血干細(xì)胞.運(yùn)用針對(duì)小鼠干細(xì)胞表面特異表達(dá)的干細(xì)胞抗原-1(stemcellantigen-1,Sca-1)的單克隆抗體和包被于磁顆粒表面的第二抗體,采用磁吸附細(xì)胞分選方法(MACS)分離小鼠骨髓造血干細(xì)胞,用流式細(xì)胞術(shù)(FACS)檢測(cè)MACS分離后骨髓細(xì)胞中干細(xì)胞(Sca-1陽(yáng)性細(xì)胞)比例,監(jiān)測(cè)細(xì)胞分選效果.結(jié)果顯示MACS分離后骨髓細(xì)胞中Sca-1陽(yáng)性細(xì)胞所占比例達(dá)85%以上,涂片觀察發(fā)現(xiàn)細(xì)胞組成和細(xì)胞形態(tài)學(xué)特征與FACS所得結(jié)果一致.MACS可以從轉(zhuǎn)基因小鼠全骨髓細(xì)胞中分離出Sca-1陽(yáng)性的骨髓造血干細(xì)胞,細(xì)胞純度可達(dá)85%以上.
免疫磁珠分離法純化抗血清的實(shí)驗(yàn)條件,并與A蛋白親和層析法比較純化效果,以求得到一種簡(jiǎn)便,快速,高效的純化IgG方法.結(jié)果表明:從5只新西蘭兔獲得210 mL試管凝集效價(jià)高達(dá)1:5 120的兔抗鰻弧菌抗血清,磁珠與IgG結(jié)合10 min達(dá)到平衡,其比較大結(jié)合量為0.227 mg/mL;免疫磁珠分離法與A蛋白親和層析法得到的IgG純度都很高,經(jīng)過SDS-PAGE電泳都只得到25 ku和55 ku左右的兩條帶;免疫磁珠分離法得到的抗體ELISA效價(jià)高于A蛋白親和層析法;免疫磁珠分離法反應(yīng)所需時(shí)間(10 min)小于A蛋白親和層析法所需的20 min,其得率(11.5 mg/mL)也高于A蛋白親和層析法的10.25 mg/mL.用免疫磁珠法檢測(cè)抗白念珠*烯醇化酶抗體。
兔前軟骨干細(xì)胞PSCs,(precartilagiousstemcells)的分離,培養(yǎng)方法及增殖,表型特征,為細(xì)胞移植***椎間盤退變,提供合適的種子細(xì)胞.[方法]取胎兔骨骺周圍軟骨膜(LaCroix環(huán))中的細(xì)胞進(jìn)行原代培養(yǎng),然后采用免疫磁珠分離系統(tǒng)分選純化PSCs.體外培養(yǎng),傳代,凍存復(fù)蘇,繪制生長(zhǎng)曲線,觀察細(xì)胞特性.分別采用免疫組化,免疫熒光,RT-PCR等方法鑒定純化后的PSCs.[結(jié)果]免疫磁珠分離可獲得純度較高的兔PSCs,培養(yǎng)后成活率高,細(xì)胞狀態(tài)良好.細(xì)胞凍存復(fù)蘇后,細(xì)胞增殖速度,細(xì)胞形態(tài)及表面標(biāo)志物無(wú)明顯變化.免疫組化,免疫熒光,RT-PCR等方法鑒定后,細(xì)胞都有明顯的PSCs表面特異性標(biāo)記物的表達(dá).[結(jié)論]PSCs存在于LaCroix環(huán)中,免疫磁珠分離法得到的PSCs,體外培養(yǎng)條件下,細(xì)胞增殖較快,生物學(xué)特性穩(wěn)定.紅細(xì)胞膜免疫磁珠檢測(cè)成分血中抗A/抗B的研究。安徽蛋白質(zhì)免疫共沉淀免疫磁珠送貨上門
免疫磁珠技術(shù)檢測(cè)外周血中卵巢Cancer細(xì)胞。天津anti-HA COIP免疫磁珠生產(chǎn)廠家
探討小鼠脾臟CD8+T細(xì)胞的免疫磁珠負(fù)性分選方法,并對(duì)分選后所得細(xì)胞進(jìn)行純度、活力及功能檢測(cè).方法以免疫磁珠負(fù)性分選法從小鼠脾臟細(xì)胞中分離CD8+T細(xì)胞,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)所得細(xì)胞的純度,臺(tái)盼藍(lán)檢測(cè)細(xì)胞活力并用ConA刺激檢測(cè)增殖能力.結(jié)果經(jīng)過流式細(xì)胞儀測(cè)定免疫磁珠負(fù)性分選后的小鼠脾臟CD8+T細(xì)胞純度達(dá)到(91.6±3.6)%,臺(tái)盼蘭染色細(xì)胞活力為(94.9±3.2)%,ConA刺激72h后有(56.3±1.7)%的細(xì)胞增殖.結(jié)論免疫磁珠負(fù)性分選法能夠分選出高純度的CD8+T細(xì)胞,并且不影響分選靶細(xì)胞的細(xì)胞活力和功能.天津anti-HA COIP免疫磁珠生產(chǎn)廠家
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