碳二亞胺/N-羥基琥珀酰亞胺(EDC/NHS)方法在羧基磁珠表面偶聯(lián)抗體,制備可高效分離細胞的免疫磁珠.方法用EDC和NHS活化磁珠表面羧基,活化的羧基再與抗體上氨基進行反應(yīng),從而將抗體偶聯(lián)于磁珠表面,獲得免疫磁珠.使用高性能納米粒度分析儀(HPPS),二辛可酸(BCA)蛋白定量試劑盒,流式細胞儀,透射電鏡(TEM)表征磁珠的粒徑,磁珠表面聯(lián)接的抗體量及其免疫活性.結(jié)果HPPS檢測磁珠平均水力學(xué)粒徑為110nm;磁珠表面偶聯(lián)52.4μg抗CD11a+抗體/mg磁珠.經(jīng)磁分離后細胞的流式分析結(jié)果表明,CD11a+免疫磁珠可以有效分離髓系白血病細胞系(KG-1a)細胞,免疫磁珠均勻結(jié)合于細胞表面,且不影響細胞的活性.結(jié)論成功制備可用于細胞分離且不影響分離后細胞活性的新型免疫磁珠.免疫磁珠負性富集結(jié)合免疫熒光抗體技術(shù)檢測卵巢Cancer患者外周血CTCs的方法建立和應(yīng)用。甘肅protein A/G COIP免疫磁珠性能

免疫磁珠法(MACS)：免疫磁珠法是2O世紀80年代出現(xiàn)的技術(shù)方法。1983年Ugelstad提出將免疫磁珠用于細胞分選，1990年，Mihenyi建立了MACS。這一方法的**是在磁珠表面包被具免疫反應(yīng)性的抗體進行抗原抗體反應(yīng)，在細胞表面形成玫瑰花結(jié)，這些結(jié)合了磁珠的細胞一旦置于強大的磁場下，就會與其他未被結(jié)合的細胞分群，具***順磁場的磁珠脫離磁場后立即消失磁性，這樣就可以篩選或去除所標記的細胞，從而達到陽性或陰性選擇細胞的目的。這一技術(shù)已經(jīng)***運用于細胞及分子生物學(xué)，分離基因、靶細胞及造血干細胞等。其分離效果得到了免疫熒光、PCR、FISH及FACS等方法的確認。免疫磁珠可以有效地分選細胞，從而決定了這一方法在神經(jīng)干細胞分選中應(yīng)用的技術(shù)可行性。安徽蛋白質(zhì)免疫共沉淀免疫磁珠市場報價BEENbio ProteinA/G Co-IP&CHIP磁珠 蛋白相互作用。

免疫磁性細胞分選系統(tǒng)分離純化骨髓衍生肝干細胞亞群c-Kit^+lin^-。方法:實驗于2006—07/08在南方醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心完成。6~8周齡的SPF級純系BALB,C雄性小鼠10只,體質(zhì)量18~20g。收集小鼠股骨骨髓細胞,利用免疫磁性細胞分選系統(tǒng),通過兩步法分選純化c-Kit^+lin^-:將獲取的lin^-細胞懸液8℃條件下1500r/min離心10min,棄上清,按80μL/10^7加入Buffer重懸細胞。按20μL/10^7加生物素抗體磁珠,混勻,4℃冰箱孵育15min,按1 mL/10^7加入Buffer洗細胞1次,8℃條件下1500r/min離心10min,棄上清,按500μL/10^8加入Buffer重懸細胞。Buffer 500μL潤MS柱,懸液過柱后,Buffer 500μL/次洗柱3次,柱子脫離磁場,加1mL Buffer,用配套柱塞推出柱中的c-Kit^+lin^-細胞,收集到c-kit^+lin-細胞,細胞計數(shù)。取2.0x108個細胞分成10等份,流式細胞儀分析c-Kit^+lin^-細胞純度,計算回收率,評估純化效率,苔盼蘭染色檢測純化前后的細胞活力。計算活細胞的百分率。細胞純度和細胞回收率的計算:細胞純度:分離產(chǎn)物中的陽性細胞數(shù),分離細胞的總細胞數(shù)×100%,細胞回收率:分離產(chǎn)物中的陽性細胞數(shù),起始標本陽性細胞總數(shù)×100%。

從臍血中分離,培養(yǎng)血管內(nèi)皮祖細胞,研究內(nèi)皮祖細胞的生長特性和誘導(dǎo)分化條件.方法:應(yīng)用MACS磁球抗體標記法純化臍血中的CD133+細胞,通過流式細胞儀,免疫細胞化學(xué),免疫熒光等技術(shù)及形態(tài)學(xué)(光鏡,電鏡)觀察研究內(nèi)皮祖細胞;將細胞接種于添加(或未添加)VEGF,bFGF,干細胞因子(SCF)的含20%胎牛血清(FBS)的IMDM培養(yǎng)基中,觀察內(nèi)皮祖細胞的生長特性.結(jié)果:分離新鮮臍血所得CD133陽性細胞占單個核細胞的(1.41±1.14)%,經(jīng)流式細胞儀鑒定CD133+細胞純度為75%-85%;將分離細胞接種于纖維連接蛋白包被的24孔板內(nèi),培養(yǎng)1-2h即有細胞貼壁,7-10d可見貼壁細胞呈鋪路石樣排列;14d后細胞出現(xiàn)小圓形,梭形等多樣性變化,可見***管腔樣結(jié)構(gòu),電鏡觀察可見胞漿內(nèi)典型的Weibel-Palade小體;在VEGF,bFGF,SCF存在條件下,檢測貼壁細胞培養(yǎng)14d后細胞表面抗原表達情況:與培養(yǎng)開始時相比,祖細胞標志CD133和CD34陽性率呈明顯下降趨勢,分別由(77.0±3.3)%和(93.1±4.7)%降至(1.6±2.2)%和(37.4±4.9)%,P<0.05,內(nèi)皮細胞特異性標志Flk-1表達明顯增加,由(22.3±3.3)%增至(94.3±4.1)%,P<0.05,同時vWF抗原呈強陽性表達,陽性率為(77.9±3.3)%.免疫磁珠的制備及其富集,分離單增李斯特菌的研究。

利用免疫磁珠法分選并鑒定人前列腺*類干細胞.方法利用免疫磁珠法從人前列腺*細胞株P(guān)C3中分選CD133+/CD44+細胞,通過免疫組化,流式細胞術(shù),CCK8,平板克隆形成實驗及裸鼠成瘤實驗鑒定其表面標志物表達情況及**干細胞特性.結(jié)果經(jīng)免疫磁珠法分選所得CD133+/CD44+細胞比例為0.50%;免疫組化及流式顯示其CD44/CD133/整合素α2β1均高表達;其細胞增殖和克隆形成率高于PC3細胞;以低密度注射時,其裸鼠體內(nèi)成瘤率明顯高于PC3細胞.結(jié)論利用免疫磁珠法可從人前列腺*細胞株P(guān)C3中高效的分選出具有**干細胞生物學(xué)特性的前列腺*類干細胞.BEENbio protein A/G Co-IP&CHIP磁珠 Cell Nature Science。安徽蛋白質(zhì)免疫共沉淀免疫磁珠供應(yīng)商

免疫磁珠陰性法富集惡性胸腔積液中腫瘤細胞方法的建立。甘肅protein A/G COIP免疫磁珠性能

Anti HA COIP磁珠

產(chǎn)品價格

產(chǎn)品描述

BEENbio Anti HA COIP磁珠在大小為2um的納米磁珠上供價結(jié)合了大量的小鼠Anti HA單克隆抗體，與傳統(tǒng)的Anti HA COIP瓊脂糖凝膠比較，抗體結(jié)合能力相同，背景更低，由于采用磁性分離，使得每次COIP可以節(jié)省40%的時間。

產(chǎn)品特性

儲存條件

4^oC長期穩(wěn)定

使用說明

磁珠的準備

重懸Anti HA 免疫磁珠，取10 μL加入到500 μL TBS，洗滌3次，分離磁珠，棄上清。

樣品的結(jié)合（binding）

在上述沉淀中加入500 μL細胞裂解液，室溫緩慢孵育2小時或者4°C條件下過夜，分離磁珠，棄上清。

注意：結(jié)合過程中，磁珠可能會出現(xiàn)聚團或呈片狀，屬于正?，F(xiàn)象，不會影響實驗結(jié)果。

洗滌（washing）：0.5 mL TBS緩沖液洗滌四次，每次5min，分離磁珠，棄上清。

洗脫（elution）:上述所得沉淀中加 入50 μL 1×蛋白上樣緩沖液，煮沸5 min，冷卻后分離磁珠，吸取上清液，進行SDS-PAGE檢測。 甘肅protein A/G COIP免疫磁珠性能

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