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浙江外泌體lncRNA芯片

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2023-12-21

液體活檢是一種非侵入性的血液檢測(cè)突破性技術(shù),能早期快速地檢測(cè)中流及其病灶或者轉(zhuǎn)移過(guò)程中釋放到血液中的循環(huán)中流細(xì)胞(circulatingtumorcell,CTC)、循環(huán)中流DNA(circulatingtumorDNA,ctDNA)和中流外泌體等中流組分。中流外泌體作為液體活檢的一個(gè)重要組成,基于其內(nèi)容物成分多樣和穩(wěn)定等優(yōu)勢(shì),正成為中流標(biāo)志物相關(guān)研究的熱點(diǎn)。中流來(lái)源納米大小的外泌體具有易通過(guò)血腦屏障、天然的歸巢特性、雙分子層脂質(zhì)結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性和高效的生物相容性等特征。因此,中流外泌體正成為中流靶向zhiliao理想的載體,尤其是工程化外泌體更表現(xiàn)出很好的中流靶向干預(yù)和增強(qiáng)藥物zhiliao的效果。從癥狀患者樹(shù)突狀細(xì)胞釋放的外泌體中,含有各種癥狀細(xì)胞來(lái)源的蛋白質(zhì)。浙江外泌體lncRNA芯片

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在血液和大多數(shù)體液(如尿液、腦脊液、唾液、胸腹腔積液、羊水和乳汁等)中均可檢測(cè)到外泌體。血液外泌體的檢測(cè)通常采用EDTA抗凝血分離的血漿,miRNA等一些微小RNA則采用血清樣本。泌尿系統(tǒng)中存在大量的RNA水解酶可降解尿液中的裸miRNAs,但外泌體外膜則可幫助RNA免于被降解,因此研究尿液外泌體miRNAs更具有應(yīng)用價(jià)值。相較于血清中相關(guān)miRNA的水平,腦脊液外泌體中的miR-21可作為膠質(zhì)瘤診斷和預(yù)后的指標(biāo),特別對(duì)預(yù)測(cè)中流復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移具有價(jià)值。唾液樣本在安靜狀態(tài)下主要來(lái)源于舌下腺和頜下腺,刺激狀態(tài)下則主要來(lái)源于腮腺。鼻腔灌洗液外泌體tmt外泌體具有良好的生物兼容性、穩(wěn)定性和內(nèi)在靶向性,使其在藥物遞送方向大有潛力。

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在Rameshwar等的研究中,采用轉(zhuǎn)染間充質(zhì)干細(xì)胞的方法,使外泌體載有anti-miR-9。在進(jìn)行間充質(zhì)細(xì)胞和多形性成角質(zhì)細(xì)胞瘤(GBM)細(xì)胞間anti-miR-9傳遞的實(shí)驗(yàn)時(shí),發(fā)現(xiàn)兩種細(xì)胞不僅可以通過(guò)縫隙連接介導(dǎo)的細(xì)胞間通訊(GJIC)也可以通過(guò)外泌體傳遞anti-miR-9。且anti-miR-9降低兩種GBM細(xì)胞(U87和T98G)對(duì)中流藥物替莫唑胺(TMZ)的抵抗能力的功能主要由外泌體傳遞的anti-miR-9實(shí)現(xiàn),而非經(jīng)GJIC傳遞的anti-miR-9,顯示出外泌體在運(yùn)載miRNA進(jìn)行基因zhiliao時(shí)的潛力。利用外泌體進(jìn)行GBM的zhiliao不只停留在體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)上,也已經(jīng)有相關(guān)的體內(nèi)zhiliao報(bào)道。

臨床上,干細(xì)胞外泌體主要治理燒傷、燙傷、皮膚潰瘍、再生健康皮膚。在護(hù)膚方面,主要是對(duì)外傷受損、衰老進(jìn)行修復(fù),比較全的調(diào)理皮膚、改善膚質(zhì),令肌膚恢復(fù)年輕、健康的狀態(tài)。干細(xì)胞外泌體可以再生皮膚和強(qiáng)化皮膚屏障,具有比較好的再生效果,且沒(méi)有其它副作用。干細(xì)胞外泌體或?qū)⒊蔀橹?、特異性皮炎等寬泛炎癥性皮膚疾病的一種有效且安全可靠的治理方法。如今,干細(xì)胞外泌體已在幾種不同類(lèi)型的疾病中顯示出令人鼓舞的治理效果,包括腎損傷、心臟損傷、腦損傷和肝肺損傷等。主要機(jī)制可能是外泌體介導(dǎo)了MSC的旁分泌/自分泌機(jī)制。外泌體與各種疾病的相關(guān)性被檢測(cè)出,特別是血液中釋放的病細(xì)胞來(lái)源的外泌體。

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基于免疫細(xì)胞來(lái)源的外泌體能夠介導(dǎo)和調(diào)節(jié)機(jī)體對(duì)中流的免疫反應(yīng),外泌體在中流免疫zhiliao方面的潛力受到廣fan關(guān)注。其中樹(shù)枝狀細(xì)胞產(chǎn)生的外泌體包含大量的MHC-多肽復(fù)合物和免疫刺激相關(guān)的分子,能夠激huo相關(guān)的T細(xì)胞,介導(dǎo)體內(nèi)抗中流應(yīng)答,在多個(gè)臨床試驗(yàn)中表現(xiàn)出良好的抗中流療效。Morse等考察了樹(shù)枝狀細(xì)胞外泌體對(duì)非小細(xì)胞肺ai患者的療效。結(jié)果表明,患者對(duì)樹(shù)枝狀細(xì)胞外泌體耐受性良好,1/3患者表現(xiàn)出了對(duì)樹(shù)枝狀細(xì)胞外泌體的T細(xì)胞響應(yīng),2/4患者自然殺傷細(xì)胞活性得以激huo。外泌體及活性蛋白能直接穿透皮膚間隙,快速直達(dá)基底層起效。浙江外泌體lncRNA芯片

隨著EV研究倍受世界矚目,各國(guó)啟動(dòng)了大型研究項(xiàng)目。浙江外泌體lncRNA芯片

為獲得外泌體的大小、濃度、形態(tài)及蛋白質(zhì)組成等信息,可以通過(guò)電鏡、動(dòng)態(tài)光散射、納米顆粒跟蹤分析儀、蛋白質(zhì)免疫印跡、酶聯(lián)免疫吸附法、流式細(xì)胞儀等對(duì)外泌體進(jìn)行表征。通過(guò)電鏡可獲得外泌體的形態(tài)信息,不同類(lèi)型的顯微鏡由于操作環(huán)境不同,得到的外泌體形態(tài)存在差異。例如,在掃描電鏡、透射電鏡和原子力顯微鏡中,外泌體呈現(xiàn)囊泡獨(dú)有的茶托形,可能由于樣品在固定或染色過(guò)程中極度脫水,導(dǎo)致外泌體塌陷所致。與之相反,在冷凍電鏡中外泌體呈現(xiàn)圓形,由于不會(huì)脫水變性,所得的外泌體形態(tài)可能更加接近囊泡的真實(shí)狀態(tài)。另外,由于透射電鏡和原子力顯微鏡具有較高分辨率,也能夠提供外泌體磷脂雙分子層厚度、粒徑分布等信息。浙江外泌體lncRNA芯片

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